GCMS法测定甲磺酸盐类药物中甲磺酸烷基酯类杂质含量

本方法采用岛津GCMS-QP2020 NX气相色谱-质谱联用仪，建立了甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯两杂质含量的检测方法。在5~80 ng/mL浓度范围内，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯线性关系良好，相关系数达到0.9999以上，取浓度为10 ng/mL的标准品溶液连续进样7针，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯峰面积RSD均小于4%。加标实验中，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯回收率在94.30%~110.00%之间。该方法简单方便，可满足甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯两种甲磺酸烷基酯类杂质的检测。SSL-CA23-265 Excellence in Science GCMS 法测定甲磺酸盐类药物中甲磺酸烷 基酯类杂质含量 GCMS-529 摘要：本文利用岛津 GCMS-QP2020 NX 气相色谱-质谱联用仪，建立了甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸 乙酯两种甲磺酸烷基酯类杂质的检测方法。在5~80 ng/mL浓度范围内，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯线性关系良好，相关系数达到0.9999以上，仪器检出限在0.28~0.85 ng/mL 之间。取浓度为 10 ng/mL的标准品溶液连续进样7针，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯峰面积 RSD 均小于4%。加标实验中，回收率在94.30%~110.00%之间。该方法简单方便，可满足甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯两种甲磺酸烷基酯类杂质的检测。 关键词：：气相色谱-质谱联用仪 甲磺酸烷基酯 基因毒性杂质 技术特点： 必采用溶剂萃取，前处理操作更加简单方便。 必使用液体进样结合 GCMS 法同时测定甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯。 磺酸盐药品是化学合成药品中的一大类，由于药 物与磺酸成盐后具有溶解度增加、溶解速率加快、稳 定性增强、引湿性降低以及晶型更稳定等优点。因此，通过与磺酸成盐是一种提高有机弱碱性药物成药性的 重要手段。 甲磺酸烷基酯类杂质存在于制药过程中，可能是 由于剩余原料或甲磺酸(通常作为药物分子的抗衡离 子)与甲醇或乙醇(通常作为生产过程中溶剂)反应 而生成。磺酸烷基酯杂质是一类基因毒性杂质，能够 或可能造成对 DNA的危害。欧洲药品管理局要求基因 毒素每日摄入限量为1.5 ug。在药物生产的过程中这 些基因毒素的含量要控制在小于等于2ug/g。 目前甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯 的检测方法有衍生结合顶空-GCMS 法或利用 GCMSMS 直接检测。本文参考国家药品监督管理局发布的《气 相色谱质谱法检测甲磺酸伊马替尼片中甲磺酸甲酯和 甲磺酸乙酯》，建立了甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯 和甲磺酸乙酯两种甲磺酸烷基酯的检测方法。本方法 灵敏度高，重复性好，能够满足该标准的检测要求。 1.1仪器 GCMS-QP2020 NX气相色谱-质谱联用仪 1.2分析条件 色 谱 柱主： SH-PolarWax， 30m×0.25mm×0.25um 柱温程库序： 80℃ (5 min)_20℃/min_180℃ _40℃ /min_220℃(9 min) 进样口温度： 230℃离子方式：EI 进样方式：：分流进样离子 温度：230℃分流比：5：1色谱质谱接口温度：230℃进样量量： 1uL检测器电压：调谐电压 +0.5 kV 载气控制方式：恒压方式采集 模 式：SIM， 离子信息见表1 压 力：：65.2kPa GCMS-529 样品前处理 图1 前处理流程图 ■结果与讨论 3.1甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯标准溶液色谱图 图2 甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯标准溶液色谱图((30 ng/mL) 表1 甲磺酸烷基酯各组分信息 NO. 化合物名称 英文名称 CAS 号 保留时间(min) 定量离子((m/z) 定性离子(m/z) 1 甲磺酸甲酯 Methyl methanesulfonate 66-27-3 10.231 80 79 2 甲磺酸乙酯 Ethylmethylsulfonate 62-50-0 10.362 109 79 3.2标准曲线和检出限 分别配制5、10、20、30、40、80 ng/mL 的甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯混合标准溶液，取1pL进样，以浓 度为横坐标，峰面积为纵坐标拟合标准曲线，两种甲磺酸烷基酯标准曲线如图3所示，线性相关系数见表2。质量色谱图见图4。以浓度为 5 ng/mL标准混合溶液进样分析，以3倍信噪比计算两种甲磺酸烷基酯检出限，两种化合物线性相关系数及检出限如表2所示。 Area 甲磺酸甲酯 甲磺酸乙酯 图3 甲磺酸烷基酯标准曲线 甲磺酸甲酯 甲磺酸乙酯 图4 甲磺酸烷基酯标准品溶液质量色谱图(10ng/mL) 表2 甲磺酸烷基酯相关系数及检出限 NO. 化合物名称 相关系数(R) 检出限(ng/mL) 1 甲磺酸甲酯 0.99996 0.85 2 甲磺酸乙酯 0.99992 0.28 3.3重复性实验 取 10 ng/mL标准品混合溶液，连续进样7次，考察仪器的重复性，测定结果见表3。 表3.两种甲磺酸烷基酯重复性结果(n=7) NO. 化合物名称 浓度 10 ng/mL RSD(%) 峰面积1 峰面积2 峰面积3 峰面积4 峰面积5 峰面积6 峰面积7 1 甲磺酸甲酯 5060 4794 4642 4573 4629 4803 4801 3.44 2 甲磺酸乙酯 18389 18117 18257 17880 17544 17579 17280 2.31 3.4加标回收率 对甲磺酸伊马替尼片药物样品，其中未检出甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯，将甲磺酸伊马替尼片样品进行 0.5 mg/kg 浓度加标实验，按照上述前处理方法处理后上机，平行6份样品考察回收率和 RSD， 具体结果如下：0.5 mg/kg 添动浓度的加标回收率在 94.3%~110.0% 之间， RSD 在1.22%~5.02%之间，样品加标回收率结果 见表4。 表4样品加标回收率测定结果 NO. 化合物名称 0.5 mg/kg 平均回收率(%) RSD(%) 1 甲磺酸甲酯 94.3 5.02 2 甲磺酸乙酯 110.0 1.22 3.5实际样品检测结果 某市售甲磺酸伊马替尼片药物，按照前处理流程进行提取，上机分析。该样品色谱图见图5，样品中未检测 到甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯。 915 697 T8 99100110.110.210.310410.510.610.710.810.91101121131415 图5 样品色谱图 结论 本方法采用岛津 GCMS-QP2020 NX 气相色谱-质谱联用仪，建立了甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸 乙酯两杂质含量的检测方法。在5~80 ng/mL 浓度范围内，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯线性关系良好，相关系数 达到0.9999 以上，取浓度为 10 ng/mL的标准品溶液连续进样7针，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯峰面积 RSD 均 小于4%。加标实验中，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯回收率在 94.30%~110.00%之间。该方法简单方便，可满足 甲磺酸盐类药物中甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯两种甲磺酸烷基酯类杂质的检测。 岛津应用云