药物中甘露醇检测方案(液相色谱仪)

LAAN-A-LC-C036岛津SHIMADZU News岛津SHIMADZUhttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行日：2015年4月400-650-0439 高效液相色谱 High Performance Liquid Chromatography 使用示差折光检测器“RID-20A” 测定甘露醇 Analysis of Mannitol by RID-20A Differential Refractive Index Detector 因为甘露醇具有吸水性小和稳定性好等特点，因此近年被用作药物的赋形剂。在2014年2月颁布的日本药典第十六次修改第二增补版中增加了D-甘露醇(以下称甘露醇)的试验方法”。该方法规定甘露醇的定量方法为使用示差折光检测器的 HPLC 法。 示差折光检测器“RID-20A”通过对光学系统进行双重温度调节，从而减少微小温度变化带来的影响，得到稳定的基线。 本文向您介绍使用“RID-20A”进行甘露醇的分析示例。 系统适应性 System Suitability 图1为甘露醇的结构式。我们对两种系统适应性试验用标准溶液进行了分析。图2上方为标准溶液1即异麦芽酮糖和麦芽糖醇的标准样品(各1g/L)色谱图；图2下方为标准溶液2即甘露醇和山梨糖醇的标准样品(各25g/L)色谱图。图1为分析条件。 表2为系统适应性试验的标准值和分析结果。由此可知，所有项目都满足系统适应性的要求。 表1分析条件 系统 Analytical Conditions ： Prominence 色谱柱 ： Shim-pack SCR-101C (300mm L.×7.9 mm I.D.， 10 um) 流动相 ：水 流速 ： 0.5 mL/min 柱温 ：85°C 进样体积 ： 20pL 检测器 ：RID-20A 表2系统适应性试验结果 Results of System Suitability Test 系统适应性试验项目 目标成分 标准值 分析结果 保留时间 甘露醇 约20分钟 20.9分钟 异麦芽酮糖(1) 约0.6 0.68 其他成分对于甘露醇的 麦芽糖醇 约0.69 0.73 相对保留时间 异麦芽酮糖(2) 约 0.73 0.76 山梨糖醇 约1.2 1.2 甘露醇和 分离度 山梨糖醇 2.0以上 5.0 峰面积的 相对标准偏差 甘露醇 1.0%以下 0.03% 图1D-甘露醇的结构Structure of D-Mannitol 图24种糖醇成分的色谱图 上：系统适应性溶液1(异麦芽酮糖、麦芽糖醇) 下：系统适应性溶液2(甘露醇、山梨糖醇) Chromatograms of a Standard Mixture of Four Sugar AlcoholsUpper： System Suitability Solution 1 (Isomalt，Maltitol)Lower： System Suitability Solution 2 (Mannitol， Sorbitol) 线性Linearity 图3为按照表1的分析条件得到的甘露醇标准曲线。由图可知，在浓度范围1~100 g/L 内线性相关系数 R²达到0.999以上，表示线性良好。 图3标准曲线Linearity of Calibration Curve ■色谱柱温度的效果 Effect of Column Temperature 图4为色谱柱温度分别为85℃和60℃时，得到的4种糖醇成分标准样品的色谱图。上方为异麦芽酮糖醇和麦芽糖醇的色谱图；下方为甘露醇和山梨糖醇的色谱图。由图可知，色谱柱温度为60℃时，甘露醇的保留时间为23分钟，说明无法满足系统适应性要求。 在85℃的高温分析中，保持色谱柱整体温度均匀非常重要。本分析中使用的柱温箱 CTO-20AC 采用空气循环方式，在高温下也能稳定地进行分析。 图44种糖醇成分的色谱图(85℃、60℃) Chromatograms of a Standard Mixture of Four Sugar Alcohols 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 Analysis of Pharmaceutical Excipient 图5为将甘露醇作为主成分的药物赋形剂的分析示例。进样体积为20uL， 浓度为 50 g/L。上方为药物赋形剂的色谱图；下方为该色谱图的放大图。由图可知，从药物赋形剂中除了检测到甘露酒外，还检测到微量的山梨糖醇和异麦芽酮糖醇。 图5药物赋形剂的色谱图 上：整体图 下：放大图 Chromatogram of Pharmaceutical Excipient Upper： Chromatogram Lower： Expanded Chromatogram ( 参考文献 ) ( 1)日本药典第十六次修改第二增补版 ) ( (日本厚生劳动省告示第47号2014年2月28日) ) ( 免责声明： ) ( *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ) ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 由于甘露醇具有吸水性小和稳定性好等特点，近年被用作药物的赋形剂。示差折光检测器RID-20A通过对光学系统进行双重温度调节，从而减少微小温度变化带来的影响，得到稳定基线。本文介绍使用RID-20A进行甘露醇分析示例。在浓度范围1-100g/L线性相关系数达到0.999以上