甾体类、非甾体类抗炎药中识别和定量分析检测方案(液质联用仪)

LAAN-A-LM-C009岛津SHIMADZU Applicationn.No.C98Newshttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行日：2015年1月 LC/MSLiquid Chromatography Mass Spectrometry 使用三重四极杆LC/MS/MS 对甾体类、非甾体性抗炎药进行识别和定量分析 Analysis of Steroids and NSAIDs Using the Shimadzu LCMS-8050 Triple Quadrupole Mass Spectrometer 由于服用兴奋剂既违反公平竞争的原则，也违反体育道德，同时对运动员的健康也会造成不良影响，所以世界反兴奋剂机构(WADA)规定要对运动员进行兴奋剂检测。 目前，将主要用于增强肌肉的蛋白同化甾类(AAS)、具有抗炎症作用和免疫抑制作用的甾体类抗炎药、麻醉剂、新化合致幻药等化学物质作为违禁物质。而对于治疗疼痛、炎症和发烧等症状的药剂中包含的非甾体类抗炎药(NSAIDs， non-steroidal ■标准溶液的 MRM 测定和基质标准曲线的绘制MRM Analysis of Standards and Matrix-Matched Calibration Curves 我们对代表性甾体类及非甾体类抗炎药14种成分的混合标准溶液夜行了 MRM 测定。图1为混合标准溶液(50ng/mL) 的 MRM色谱图；图2为代表性化合物 LOQ附近的 MRM色谱图。表1为 anti-inflammatory drugs)，因为尚未指定为违禁药物，所以运动员的滥用现象近年来成为一大问题。 兴奋剂的检测结果将是影响运动员运动生涯的重要因素，因此必须保证其准确性和公平性。本文向您介绍使用多个参比离子，对具有代表性的甾体类和非甾体类抗炎药进行识别和高灵敏度测定的示例。 标准曲线的最小浓度和最大浓度。定量下限为10~100 pg/mL (20~200fg)。由图表可知，任一成分均在3位数的宽范围中得到了良好的线性。 表1各成分的标准曲线最小浓度和最大浓度 Calibration Curve Min./Max. Concentrations Compounds Min. Conc Max.Conc. 克仑特罗 0.01 10 泼尼松龙 0.05 20 醋酸氢化可的松 0.1 50 甲泼尼龙 0.5 50 地塞米松 0.5 50 a-，β-群勃龙 0.1 50 玉米赤霉醇 0.1 50 酮洛芬 0.05 50 睾酮 0.05 10 氯斯太宝 0.05 50 双氯芬酸 0.01 50 醋酸美伦孕酮 0.05 50 氯氰碘柳胺 0.01 10 (单位： ng/mL) 图2代表性化合物定量下限(LOQ) 附近的 MRM 色谱图 MRM Chromatograms near the LOQ of Typical Compounds 使用多个参比离子的峰识别 Peak Determination Using Multiple Reference lons 为提高峰识别的准确性，需要使用多个参比离子。在此操作中，选择和输入参比离子的作业繁琐复杂。 如果使用 Labsolutions Ver. 5.65， 可自动选择并输入分析方法中第2通道以后的 MRM 离子对，将其作为参比离子(最大5个)。 <新功能示例> ①自动输入多个参比离子(可通过下拉方式选择并更改要使用的离子对) ② STD 的离子比被自动设定为基准值 ③可对各参比离子设定不同的相对离子比带 ④根据离子比、允许范围和参比离子模式自动计算识别范围(%) 图3参比离子的设定画面 Reference lon Setting Window 图4使用多个参比离子的峰识别示例 Example of Peak Determination Using Multiple Reference lons 表2分析条件 Analytical Conditions 色谱柱 ：Shim-pack XR-ODS II (75 mmL.x2.0 mml.D.， 2.2 pm) 流动相A ：：0.1%蚁酸-水 流动相B ：乙腈 时间程序 1%B (0 min)→15%B(1 min)→40 %B (6 min) →100%B (10-13 min) → 1%B (13.01-16 min) (12.01-15 min) 流速 0.2 mL/min 进样体积 2uL 柱温 ： 40℃ 离子模式 ：ESI(正/负) 离子源电压 ： +4.5 kV/-3.5 kV 雾化气流速 ： 3.0L/min. 干燥气流速 ：10.0L/min .加热气流速 ： 10.0L/min. 接口温度 ：400℃ DL温度 ： 200 加热模块温度 ：400 ( 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ) ( 400-650-0439 ) ( 免责声明： ) *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 本文介绍使用多个参比离子，对具有代表性的甾体列和非甾体类抗炎药进行识别和高灵敏度测定。对14种成分混标溶液MRM测定，定量下限为10-100pg/mL。任一成分均在3位数的宽范围中获得良好线性。为提高峰识别准确性，需要使用多个参比离子。选择和输入参比离子操作繁琐复杂。如果使用LabSolutions Ver.5.65以上版本，可自动选择并输入分析方法中MRM离子对，将其作为参比离子。