普拉克索盐酸盐中杂质检测方案(液相色谱仪)

LAAN-A-LC-C025High Performance Liquid Chromatography ApplicationnNo.L478Newshttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2015年1月 ApplicationNews 高效液相色谱 使用 Prominence-i 和核-壳技术色谱柱快速分析医药品杂质 No.L478 High Speed Analysis of Impurities of Pramipexole Dihydrochloride by Prominence-i 使用填充粒径小的色谱柱可以得到高分离高灵敏度的色谱图。但是粒径越小，施加在色谱柱上的压力就会越高。而核-壳技术色谱柱“Kinetex 5 um”以与 5 um 粒径的同等柱压，实现了更高的分辨率。因此，即使使用通用LC系统，也可得到高分离高灵敏度的色谱图。 本文向您介绍使用“Kinetex 5 um”和一体化高效液相色谱仪Prominence-i，根据欧洲药典规定对医药品杂质进行快速分析的示例。 使用“Kinetex 5 um”进行普拉克索盐酸盐 的杂质分析 Analysis of Impurities in Pramipexole DihydrochlorideU一sing the Kinetex 5 pum Core-Shell Column 普拉克索作为多巴胺受体激动剂，广泛用于抗帕金森病药物。本次分析根据欧洲药典规定测定了普拉克索盐酸盐的标准溶液(1.5 mg/mL)"。表1为分析条件；图1(a)为使用“Kinetex 5 um”得到的结果， (b) 为使用“Shim-pack VP-ODS”得到的结果。下方为3~10分钟的色谱放大图。由此可知，使用“Kinetex 5 um”不仅提高了主成分的灵敏度，还分离了图1中圆圈标注的峰。另外，主成分的洗脱时间与 Shim-pack VP-ODS 相比，大约提前了2分钟。 表1 分析条件 Analytical Conditions 色谱柱(1) Kinetex 5p C18 100A (150 mmL.×4.6 mml.D.，5 um) 色谱柱(2) Shim-pack VP-ODS (150 mmL.×4.6 mml.D.， 5 um) 流速 ： 1.5 mL/min 流动相 ： A) 67 mmol/L磷酸盐(钾盐)缓冲液 (pH3.0) 含 21 mmol/L1-辛烷磺酸盐(钠盐) B)溶液A/乙腈(1/1) 时间程序 B.CONC 40%(0 min)→80%(15 min)→40%(15.1-20min) 柱温 40℃ 进样体积 5uL 检测器 LC-2030264nm 流通池 一体化LC用标准池 图1 (a) Kinetex 5 um 与 (b)Shim-pack VP-ODS 的比较-普拉克索盐酸盐的色谱图- Comparison of Chromatograms of Pramipexole DihydrochlorideUsing (a) Kinetex 5 pm Core-shell Column and (b) Shim-pack VP-ODS ：与其他公司 LC 系统的分离兼容性 Compatibility with Third-Party LC Systems Prominence-i 与其他公司的LC系统具有分离兼容性。在表1所示的分析条件(使用色谱柱(1))下测定了普拉克索盐酸盐的标准溶液(1.5 mg/mL)。图2下方中的(a)为上方 Prominence-i得到的色谱放大图；(b)为其他公司 LC 系统得到的色谱放大图。由图可知，两种系统均有分离兼容性。 ·mV 图2普拉克索盐酸盐的色谱图 上：Prominence-i下：放大图(a)其他公司LC系统、(b)Prominence-iChromatograms of Pramipexole DihydrochlorideUpper： Prominence-iLower： Enlarged Views of Data Using (a) Third-Party Systemand (b)Prominence-i 普拉克索盐酸盐杂质的快速分析 High Speed Analysis of Impurities of Pramipexole Dihydrochloride 我们又根据欧洲药典规定对普拉克索盐酸盐杂质进行了快速分析。表2为欧洲药典中记载的 HPLC 参数更改允许范围。图3 表2欧洲药典中记载的 HPLC更改允许范围 项目 允许范围 流动相组成(副成分) 选择±30%或绝对量±2%中较大的一个 (其他成分) 可进行绝对量±10%的更改 pH 可进行±0.2%的更改 盐浓度 可进行±10%的更改 UV 波长 不可更改 色谱柱内径 可进行±25%的更改 粒径 可最大减少50%、不可增加 流速 可进行±50%的更改 柱温 可进行±10%的更改(最高60℃) 进样体积 满足系统适应性时可更改 ( 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ) 为普拉克索盐酸盐标准溶液(1.5mg/mL)的测定结果。表3中的分析条件满足表2中的允许范围。图中下方为1~3分钟的色谱放大图。在快速分析中使用了低延迟体积系统套件(选配件)和核-壳技术色谱柱“Kinetex 2.6 um”。由此可知，主成分的洗脱与使用“Kinetex 5 um”相比，大约提前了3分钟。 根据表4的系统适应性测试结果可知，无论是按照欧洲药典的规定还是进行快速分析，均满足系统适应性要求。 表3分析条件-快速分析- Analytical Conditions-High-Speed Analysis- 色谱柱 Kinetex 2.6p C18 100A (75 mmL.×4.6 mml.D.， 2.6 um) 流速 2.0 mL/min 流动相 A) 67 mmol/L 磷酸盐(钾盐)缓缓液 (pH3.0) 含21 mmol/L 1-辛烷磺酸盐(钠盐) 时间程序 B) 溶液A/乙腈(1/1) B.CONC 40 %(0 min)→ 80%(5.63 min) →40%(5.64-8.63 min) 实时进样：230 uL 柱温 ： 40℃ 进样体积 2pL 检测器 LC-2030C 264nm 流通池 ： 快速高灵敏度流通池 表4系统适应性测试结果 Results of System Suitability Test According to EP 系统适应性项目 基准值 EP同等条件 快速分析条件 判定 分离度 杂质A与普拉克索 6.0 8.2 9.7 PASS 图3普拉克索盐酸盐的色谱图-快速分析-(使用低延迟体积系统套件) Chromatograms of Pramipexole Dihydrochloride- High Speed Analysis-(with Low-Delay Volume System Kit) ( [参考文献] ) ( 1)E. Pharmacopoeia 0 1 /2012： 2 4 16 "Pramipexole Dihydrochloride" ) ( 2) E. Pharmacopoeia 01/2008： 20246 General C h apters ) ( 2 .2.46. Chromatographic separation technique ) ( 免责声明： ) ( *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ) ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 使用填充粒径小的色谱柱可以得到高分辨率高灵敏度的色谱图，但粒径越小，色谱柱压力越高。核-壳技术色谱柱Kinetex 5um以5微米粒径的同等柱压，实现了更高分辨率。因此，即使使用通用L系统，也可得到高分辨率高灵敏度谱图。本文介绍使用Kinetex 5um色谱柱和一体化高效液相色谱Prominence-i，根据欧洲药典对药品杂质进行快速分析。使用常规色谱柱按照欧洲药典规定或使用核-壳色谱柱使用快速分析参数均满足系统适应性要求。