石菖蒲中农残测定检测方案(QuEChERS)

背景石菖蒲别名菖蒲、苦菖蒲、山菖蒲，为天南星科植物石菖蒲的干燥根茎，含有挥发油、糖分及有机酸类成分，其含有的挥发油成分容易造成GC-MS/MS分析中目标物保留时间漂移和干扰，其中杀虫脒干扰较为明显，另外这些干扰组分也会造成LC-MS/MS分析中目标物干扰大响应低等问题。纳谱分析推出的Q-15A06（含色素挥发油中药农残Q法）净化管，在不少中药中得以验证净化效果不错，如厚朴、木香、陈皮等。今天，我们来看看石菖蒲项目的前处理效果吧。适用范围本方法参考中国药典2020版2341第五法中的QuEChERS法，适用于常规中药材的农残检测。实验讨论通过以上实验数据可以看出，石菖蒲使用QuEChERS法处理搭配SelectCore QuEChERS Q-15A06净化管净化后各化合物出峰良好，搭配上述解决办法有效地提高了实验效率，也为石菖蒲的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。中药石菖蒲的33种农残测定分析 背景 石菖蒲别名菖蒲、苦菖蒲、山菖蒲，为天南星科植物石菖蒲的干燥根茎，含有挥发油、糖分及有机酸类成分，其含有的挥发油成分容易造成 GC-MS/MS分析中目标物保留时间漂移和干扰，其中杀虫脒干扰较为明显，另外这些干扰组分也会造成LC-MS/MS分析中目标物干扰大响应低等问题。纳谱分析推出的Q-15A06(含色素挥发油中药农残Q法)净化管，在不少中药中得以验证净化效果不错，如厚朴、木香、陈皮等。今天，我们来看看石菖蒲项目的前处理效果吧。 石菖蒲 适用范围 本方法参考中国药典2020版2341 第五法中的 QuEChERS法，适用于常规中药材的农残检测。实验步骤 1 对照品溶液的制备 1.1混合对照品配制 精密量取禁用农药混合1mL， 置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用； 1.2气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备 取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每 1mL 含 1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL 含0.1ug的溶液。 1.3空白基质溶液的制备 取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。 1.4基质混合对照溶液的制备 分别精密量取空白基质溶液 1.0mL(6份)，置氮吹仪上，40℃水浴浓缩至约 0.6mL，分别加入混合对照品溶液 10pL、20uL、50uL、100uL、150pL、200uL，加乙腈稀释至 1mL，涡旋混匀，即得。 2 供试品溶液的制备 2.1提取(QuEChERS 法) 取供试品粉末(过三号筛)3g，精密称定，置50mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液 15mL， 涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15mL，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟，加入 QS-002盐包，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(500次/分)3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心(每分钟4000转)5分钟，待净化。 3 净化 Q法净化管： Q-15A06 SelectCore QuEChERS 净化管 15mL， Pesticide Residue A06 (含色素挥发油中药农残Q法) 净化：量取上述石菖蒲提取液上清液 9mL 置Q-15A06 净化管中涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡(500 次/分)5分钟使净化完全，离心(每分钟4000转)5分钟，即得。 GC/MS/MS 测定： 基质加标配制：精密吸取上清液2.5mL， 置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.6mL， 加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL 磷酸三苯酯溶液，混匀，过 0.22um 针式尼龙滤头，上机分析。 样品溶液配制：精密吸取上清液2.5mL，置氮吹仪上于 40°℃水浴浓缩至1.0mL，加入 0.3 mL 磷酸三苯酯溶液，混匀，过 0.22um针式尼龙滤头，上机分析。 LC/MS/MS 测定： 基质加标配制：精密吸取上清液2.5mL， 置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约 0.6mL， 加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0mL，涡旋混匀，再加入0.3mL水，混匀，过 0.22um针式尼龙滤头，上机分析。 样品溶液配制：精密吸取上清液2.5mL，置氮吹仪上于40°℃水浴浓缩至1.0mL， 加入0.3mL水，混匀，过 0.22um针式尼龙滤头，上机分析。 4 气相色谱-串联质谱法(岛津 GC-MS -TQ8040 NX) 色谱条件 色谱柱： NanoChrom BP-50+MS 气相柱， 30mx0.25mm， 0.25um； 进样口温度：250℃； 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以 10℃/min 升温至160℃；再以2℃/min 升温至230℃，最后以15℃/min 升温至300℃，保持 6min； 载气：高纯氦气(纯度>99.999%)； 进样方式：：不分流进样； 恒压模式：146kPa： 进样量：1uL。 质谱条件 电离方式：：电子轰击电离源(EI)； 电离能量：70Ev： 接口温度：：250°C： 离子源温度：250℃； 监测方式：多反应检测模式(MRM)； 溶剂延迟：10.0min。 5 高效液相色谱-串联质谱法(岛津 LC-MS 8045) 色谱条件 色谱柱： ChromCore C18-MS Pesticides 中药农残专用柱(2.1x100 mm， 2.6um) 流动相： A：00.1%甲酸水溶液(含有5mmol/L 甲酸铵) B： 乙腈-0.1%甲酸水溶液(含有 5mmol/L 甲酸铵)=95：5 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量：2uL 梯度： 时间(min) 流速(mL/min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 0.3 70 30 1 0.3 70 30 12 0.3 0 100 14 0.3 0 100 14.1 0.3 70 30 16 0.3 70 30 质谱条件 离子源：电喷雾离子源(Electrospray ionization， ESI) 正离子扫描 监测方式：多反应监测(Multiple Reaction Monitoring， MRM) 离子源接口电压：4.5kV 雾化气：氮气3.0L/min 加热气：二干燥空气 10.0L/min DL温度：250℃ 加热模块温度：400℃ 接口温度：300℃ 干燥气： N2 10L/min 6注意事项 由于石菖蒲样品富含挥发油和色素成分，为保障实验结果的稳定和准确性也为了减轻样品中色素类成分对 GC-MS/MS 色谱柱的污染，故对样品浓度进行减半处理，减半后的样品与基质液浓度为0.5g/mL (与直 接提取法样品浓度一致)； 提取石菖蒲样品时加入盐包前将提取液与盐包都放入冰箱冷藏30min， 取出，立即加入盐包可有效防止脱水时放热，农残回收率更稳定；如遇杀虫脒回收率过低可取加入脱水盐包离心后的样品上清液 5mL 过 HLB固相萃取小柱，收集净化液，取净化液 2.5mL 同上述样品液与基质加标液配制方法配制， LC-MS/MS 分析筛查杀虫脒残留情况。本实验中杀虫脒选择的气质质的离子对是参照2341 第四法中的离子对信息，相对来说，干扰更小，灵敏度更高。 GC-MS/MS： 杀虫脒监测离子对见下表 目标物 监测离子对 电压(CE) 杀虫脒 (GC-MS/MS) 152.0>117.0 15 180.9>140.0 15 7实验结果 ①：为石菖蒲提取液原液 (QuEChERS 法提取未浓缩) ②：为 SelectCore QuEChERS Q-15A06 净化后的石菖蒲提取液(QuEChERS 法提取 2.5mL 浓缩至1mL) 石菖蒲基质加标 GC-MS/MS 部分化合物分析结果谱图 QuEChERS 法处理石菖蒲基质 LOQ浓度点加标谱图(GC-MS/MS方法) 石菖蒲基质加标LC-MS/MS 部分化合物分析结果谱图 QuEChERS 法处理石菖蒲基质LOQ浓度点加标谱图 (LC-MS/MS方法) 氯唑磷 表1 石菖蒲中33种农药残留的测定添加回收结果(%) 农残成分 回收率 农残成分 回收率 农残成分 回收率 甲胺磷 82.3% 苯线磷亚砜 86.2% 3-羟基克百威 88.0% 甲基对硫磷 91.4% 地虫硫磷 102.8% 涕灭威 87.0% 对硫磷 80.7% 硫线磷 99.1% 涕灭威砜 93.1% 久效磷 89.8% 蝇毒磷 82.3% 涕灭威亚砜 102.3% 磷胺 93.3% 治螟磷 92.3% 灭线磷 89.6% α-六六六 89.2% 特丁硫磷 87.4% 氯唑磷 93.5% β-六六六 91.6% 特丁硫磷砜 76.2% 水胺硫磷 96.1% y-六六六 88.0% 特丁硫磷亚砜 92.8% α-硫丹 71.7% 8-六六六 85.5% 甲基硫环磷 91.1% B-硫丹 84.9% 2，4'-滴滴涕 68.6% 甲磺隆 85.8% 硫丹硫酸酯 85.9% 4，4'-滴滴滴 77.3% 氯磺隆 71.5% 氟虫腈 90.8% 4，4'-滴滴涕 65.9% 胺苯磺隆 93.9% 氟虫腈砜 90.1% 4，4'-滴滴伊 64.0% 甲拌磷 96.2% 氟虫腈亚砜 91.6% 杀虫脒 61.6% 甲拌磷砜 80.5% 氟甲腈 89.2% 除草醚 77.2% 甲拌磷亚砜 98.5% o，p'-三氯杀螨醇 99.0% 艾氏剂 71.4% 甲基异柳磷 92.1% p，p'-三氯杀螨醇 79.6% 狄氏剂 72.5% 内吸磷-O 115.5% 硫环磷 89.6% 苯线磷 86.7% 内吸磷-S 96.1% 苯线磷砜 98.8% 克百威 92.7% 8实验讨论 通过以上实验数据可以看出，石菖蒲使用 QuEChERS 法处理搭配 SelectCore QuEChERS Q-15A06 净化管净化后各化合物出峰良好，搭配上述解决办法有效地提高了实验效率，也为石菖蒲的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com