大黄中农残测定检测方案(石墨化碳混合小柱)

纳谱分析推出的GCB/NH2-A产品，适用于黄连、黄柏的气质质前处理分析。本方法参考中国药典2020版2341第五法中的固相萃取法二和固相萃取法三，适用于含色素、挥发油类成分的中药材的农残检测。实验讨论通过以上实验数据可以看出，大黄使用SelectCore GCB/NH2-A 固相萃取柱处理对其色素类和蒽醌类成分吸附良好，有效地减轻了样品中蒽醌类成分对GC-MS/MS柱前端的污染和基质中干扰物对目标物的影响；使用SelectCore HLB固相萃取柱处理的大黄LC-MS/MS基质加标液中化合物出峰良好，搭配上述解决办法有效地解决了大黄农残检测中存在的问题，提高了实验效率，为大黄的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。固相萃取法二处理大黄基质 LOQ浓度点加标谱图 (LC-MS/MS 方法) 中药大黄的33种农残测定分析 背景 大黄为蓼科植物掌叶大黄，唐古特大黄、药用大黄的干燥根和根茎，含有大量的蒽醌类成分，这些成分极易污染 GC-MS/MS柱前端，造成目标物拖尾、丢峰、回收率不达标等问题，且常规净化小柱无法有效地去除这些蒽醌类成分。纳谱分析推出的 GCB/NH，-A产品，适用于黄连、黄柏的气质质前处理分析。今天，我们来看看大黄项目的前处理效果吧。 大黄 适用范围 本方法参考中国药典2020版2341 第五法中的固相萃取法二和固相萃取法三，适用于含色素、挥发油类成分的中药材的农残检测。 实验步骤 1 对照品溶液的制备 1.1混合对照品配制 精密量取禁用农药混合1mL， 置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用； 1.2气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备 取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每 1mL 含0.1ng的溶液。 1.3空白基质溶液的制备 取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。 1.4基质混合对照溶液的制备 分别精密量取空白基质溶液 1.0mL(6份)，置氮吹仪上，40'C 水浴浓缩至约0.6mL， 分别加入混合对照品溶液 10mL、20pL、50 uL、100mL、150uL、200pL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。 2 供试品溶液的制备 2.1提取(直接提取法) 精密称取5g样品(3号筛)，加氯化钠1g，加入50mL乙腈，匀浆处理2分钟，离心后分取上清液，残渣再加50mL 乙腈，匀浆处理1分钟，离心后，合并两次提取上清液，减压浓缩至3~5mL，加乙腈定容至10mL，摇匀，待净化。 3 净化 GC/MS/MS样品净化： SPE柱： SelectCore GCB/NH，-A 固相萃取柱 500mg/500mg/6mL 净化：取 SelectCore GCB/NH，-A 固相萃取柱用乙腈：甲苯(33：： 1) 10mL活化，量取上述大黄提取液2mL，置已活化的 SelectCore GCB/NH，-A固相萃取柱中，用乙腈：：甲苯(3：1)20mL洗脱， 收集全部样品液与洗脱液，40℃水浴减压回收至2mL， 即得。 GC/MS/MS测定： 基质加标配制：精密量取上述减压回收后的样品溶液1mL，氮吹至0.6mL加入混合对照溶液，乙腈定容至1mL， 再加入0.3mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22.m尼龙针式过滤器，上机分析。 样品溶液配制：精密量取上述减压回收后的样品溶液1mL 加入 0. 3 mL 磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22以m 尼龙针式过滤器，上机分析。 LC/MS/MS 样品净化： SPE 柱： SelectCore HLB 固相萃取柱200mg/6mL 净化：量取上述大黄提取液 3mL， 过 SelectCore HLB 固相萃取柱，收集全部净化液，混匀，即得。 LC/MS/MS 测定： 基质加标配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液 1mL氮吹至0.6mL 加入混合对照品液，乙腈定容至1mL，再加入0.3mL水，混匀，过0.22um 尼龙针式过滤器，上机分析。 样品溶液配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液 1mL 加入0.3mL水，混匀，过0.22.m尼龙针式过滤器，上机分析。 4 气相色谱-串联质谱法(岛津GC-MS -TQ8040 NX) 色谱条件 色谱柱： NanoChrom BP-50+MS气相柱，30m×0.25mm， 0.25.m； 进样口温度：250℃； 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以10℃/min升温至160℃；再以2℃/min 升温至230℃，最后以15℃/min 升温至300℃，保持6min； 载气：高纯氦气(纯度>99.999%)； 进样方式：不分流进样； 恒压模式：：146kPa： 进样量： luL。 质谱条件 电离方式：电子轰击电离源(EI)； 电离能量：：70Ev： 接口温度：250℃； 离子源温度：250℃； 监测方式：多反应检测模式(MRM)； 溶剂延迟：10.0min。 5 高效液相色谱-串联质谱法(岛津 LC-MS 8045) 色谱条件 色谱柱： ChromCore C18-MS Pesticides 中药农残专用柱(2.1>×100mm， 2.6.m)流动相： A： 0.1%甲酸水溶液(含有5mmol/L甲酸铵) B： 乙腈-0.1%甲酸水溶液(含有 5mmol/L甲酸铵)=95：5 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量：2HL 梯度： 时间(min) 流速(mL/min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 0.3 70 30 1 0.3 70 30 12 0.3 0 100 14 0.3 0 100 14.1 0.3 70 30 16 0.3 70 30 质谱条件 离子源：电喷雾离子源 (Electrospray ionization， ESI) 正离子扫描 监测方式：：多反应监测 (Multiple Reaction Monitoring， MRM) 离子源接口电压：4.5kV 雾化气：：氮气3.0L/min 加热气： 干燥空气 10.0L/min DL温度：250℃ 加热模块温度：400℃ 接口温度：300℃ 干燥气：：N， 10 L/mir 6 注意事项 GC-MS/MS： 由于 SelectCore GCB/NH，-A固相萃取柱对久效磷有一定吸附容易导致其回收率偏低，故久效磷参考 LC-MS/MS分析结果。 7实验结果 1：为大黄提取液原液 2： 为 SelectCore HLB 净化后的大黄提取液 3：为 SelectCore GCB/NH，-A 净化后的大黄提取液 大黄基质加标 GC-MS/MS 部分化合物分析结果谱图 固相萃取法三处理大黄基质 LOQ 浓度点加标谱图 (GC-MS/MS 方法) 1-六六六 6-六六六 甲基硫环磷 杀虫脒 大黄基质加标 LC-MS/MS部分化合物分析结果谱图 表1大黄中33种农药残留的测定添加回收结果(%) 农残成分 回收率 农残成分 回收率 农残成分 回收率 甲胺磷 81.9% 苯线磷亚砜 70.0% 3-羟基克百威 101.8% 甲基对硫磷 79.7% 地虫硫磷 89.5% 涕灭威 92.3% 对硫磷 98.6% 硫线磷 85.4% 涕灭威砜 111.6% 久效磷 76.7% 蝇毒磷 73.0% 涕灭威亚砜 79.6% 磷胺 101.2% 治螟磷 92.1% 灭线磷 81.3% α-六六六 84.2% 特丁硫磷 84.9% 氯唑磷 99.5% β-六六六 85.0% 特丁硫磷砜 74.6% 水胺硫磷 72.2% Y-六六六 85.0% 特丁硫磷亚砜 73.2% a-硫丹 84.9% 6-六六六 85.5% 甲基硫环磷 76.5% β-硫丹 83.2% 2，4'-滴滴涕 80.5% 甲磺隆 90.8% 硫丹硫酸酯 82.7% 4，4'-滴滴滴 82.5% 氯磺隆 77.3% 氟虫腈 79.3% 4，4'-滴滴涕 80.9% 胺苯磺隆 81.6% 氟虫腈砜 78.9% 4，4'-滴滴伊 83.7% 甲拌磷 75.1% 氟虫腈亚砜 83.5% 杀虫脒 74.3% 甲拌磷砜 89.8% 氟甲腈 84.8% 除草醚 77.3% 甲拌磷亚砜 87.1% o，p'-三氯杀螨醇 101.6% 艾氏剂 85.7% 甲基异柳磷 80.5% p，p'-三氯杀螨醇 107.1% 狄氏剂 80.1% 内吸磷-O 82.5% 硫环磷 83.7% 苯线磷 76.3% 内吸磷-S 81.1% 苯线磷砜 110.0% 克百威 89.6% 8实验讨论 通过以上实验数据可以看出，大黄使用 SelectCore GCB/NH，-A 固相萃取柱处理对其色素类和蒽醌类成分吸附良好，有效地减轻了样品中蒽醌类成分对 GC-MS/MS 柱前端的污染和基质中干扰物对目标物的影响；使用 SelectCore HLB 固相萃取柱处理的大黄 LC-MS/MS 基质加标液中化合物出峰良好，搭配上述解决办法有效地解决了大黄农残检测中存在的问题，提高了实验效率，为大黄的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。 纳谱分析纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com NanoChrom