姜黄中农残测定检测方案(亲水亲脂平衡SPE柱)

姜黄为姜科植物姜黄Curcuma Longa L.的干燥根茎，含有大量色素和挥发油类成分，这些成分会造成GC-MS/MS分析中目标物保留时间漂移、干扰大、严重污染色谱柱等问题，从而导致分析结果误差过大、回收率不达标，其中六六六类化合物干扰较为明显；同样也会造成LC-MS/MS分析中目标物响应变低、丢峰等问题，其中地虫硫磷和甲拌磷砜干扰较为明显。纳谱分析推出的HLB-C中药农残专用柱，特别适用于重色素和重油脂的中药材农残测定。今天，我们来看看姜黄项目的前处理效果吧。适用范围本方法参考中国药典2020版2341第五法中的固相萃取法二，适用于含色素、挥发油类成分的中药材的农残检测。实验讨论通过以上实验数据可以看出，姜黄使用SelectCore HLB-C 500mg/6mL中药农残专用柱处理对其色素类成分、挥发油吸附良好，有效地减轻了样品中色素和挥发油成分对GC-MS/MS柱前端的污染和基质中干扰物对目标物的影响；并且使用SelectCore HLB 500mg/6mL固相萃取柱处理的姜黄LC-MS/MS基质加标液中化合物出峰良好，搭配上述解决办法可以有效解决姜黄中农残分析中存在的问题，提高了实验效率，为姜黄的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。中药姜黄的33种农残测定分析 背景 姜黄为姜科植物姜黄 Curcuma Longa L.的干燥根茎，含有大量色素和挥发油类成分，这些成分会造成GC-MS/MS分析中目标物保留时间漂移、干扰大、严重污染色谱柱等问题，从而导致分析结果误差过大、回收率不达标，其中六六六类化合物干扰较为明显；同样也会造成LC-MS/MS分析中目标物响应变低、丢峰等问题，其中地虫硫磷和甲拌磷砜干扰较为明显。纳谱分析推出的 HLB-C 中药农残专用柱，特别适用于重色素和重油脂的中药材农残测定。今天，我们来看看姜黄项目的前处理效果吧。 姜黄 适用范围 本方法参考中国药典2020版2341 第五法中的固相萃取法二，适用于含色素、挥发油类成分的中药材的农残检测。 实验步骤 1 对照品溶液的制备 1.1混合对照品配制 精密量取禁用农药混合1mL， 置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用； 1.2气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备 取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每 1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL含0.1以g的溶液。 1.3空白基质溶液的制备 取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。 1.4基质混合对照溶液的制备 分别精密量取空白基质溶液 1.0mL(6份)，置氮吹仪上，40'C 水浴浓缩至约0.6mL， 分别加入混合对照品溶液 10mL、20pL、50 uL、100mL、150uL、200pL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。 2 供试品溶液的制备 2.1提取(直接提取法) 精密称取5g样品(3号筛)，加氯化钠1g，加入50mL乙腈，匀浆处理2分钟，离心后分取上清液，残渣再加50mL 乙腈，，匀浆处理1分钟，离心后，合并两次提取上清液，减压浓缩至3~5mL左右，加乙腈定容至 10mL，摇匀，置冰箱冷藏2小时，取出离心1分钟，取上清液至新的离心管内，放置至室温待净化。 3 净化 GC/MS/MS 样品净化：SPE柱： SelectCore HLB-C 中药农残专用柱 500mg/6mL 净化：取SelectCore HLB-C 固相萃取柱 500mg/6mL，加乙腈5ml活化，再取上述姜黄提取液1mL置已活化的 SelectCore HLB-C 固相萃取柱中，收集样品液，待所有样品液进入柱体填料后，取5mL乙腈洗脱，合并样品液与洗脱液，即得。 GC/MS/MS 测定： 基质加标配制：取上述净化后的样品液与洗脱液的混合液40℃氮吹至 0.6mL 加入混合对照溶液，乙腈定容至1mL， 再加入 0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22mm尼龙针式过滤器，上机分析。 样品溶液配制：取上述净化后的样品液与洗脱液的混合液40℃吹至1mL 加入 0.3mL 磷酸三苯酯溶液，混匀，过 0.22.m尼龙针式过滤器，上机分析。 LC/MS/MS 样品净化： SPE柱： SelectCore HLB 固相萃取柱500mg/6mL 净化：量取上述姜黄提取液 4mL， 过 SelectCore HLB 固相萃取柱 500mg/6mL， 收集全部净化液，混匀，即得。 LC/MS/MS 测定： 基质加标配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液 1mL氮吹至0.6mL 加入混合对照品液，乙腈定容至1mL， 再加入0.3mL水，混匀，过0.22.m尼龙针式过滤器厂，9上机分析。 样品溶液配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液 1mL 加入0.3 mL水，混匀，过0.22.m尼龙针式过滤器，上机分析。 4 气相色谱-串联质谱法(岛津GC-MS -TQ8040 NX) 色谱条件 色谱柱： NanoChrom BP-50+MS气相柱，30m×0.25mm， 0.25rm； 进样口温度：250℃； 升温程序：初始温度为60℃，保持 1min； 以10℃/min 升温至160℃；再以2℃/min 升温至230℃，最后以 15℃/min 升温至300℃，保持6min； 载气：高纯氦气(纯度>99.999%)； 进样方式：：不分流进样； 恒压模式：：146kPa： 进样量： lnL。 质谱条件 电离方式：电子轰击电离源(EI)； 电离能量：：70Ev： 接口温度：250℃； 离子源温度：250℃； 监测方式：多反应检测模式(MRM)； 溶剂延迟：10.0min。 5 高效液相色谱-串联质谱法(岛津 LC-MS8045) 色谱条件 色谱柱： ChromCore C18-MS Pesticides 中药农残专用柱(2.1×100mm， 2.6 um)流动相： A： 0.1%甲酸水溶液(含有5mmol/L甲酸铵) B： 乙腈-0.1%甲酸水溶液(含有 5mmol/L 甲酸铵)=95：5 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量：2四L 梯度： 时间(min) 流速(mL/min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 0.3 70 30 1 0.3 70 30 12 0.3 0 100 14 0.3 0 100 14.1 0.3 70 30 16 0.3 70 30 质谱条件 离子源：电喷雾离子源 (Electrospray ionization， ESI) 正离子扫描 监测方式：多反应监测 (Multiple Reaction Monitoring， MRM) 离子源接口电压：4.5kV 雾化气：氮气3.0L/min 加热气：干干燥空气 10.0L/min DL温度：250℃ 加热模块温度：400℃ 接口温度：300℃ 干燥气：：N10L/min 6 注意事项 GC-MS/MS： 内吸磷、灭线磷和久效磷参考 LC-MS/MS 分析结果； LC-MS/MS： 地虫硫磷参考 GC-MS/MS分析结果，采集条件参考下表； 水胺硫磷参考 GC-MS/MS 分析结果； 如遇个别目标物回收率低于60%可将上柱净化量增加到5mL。 目标物 监测离子对 电压(CE) 地虫硫磷(GC-MS/MS) 245.9>109.0 15 136.9>109.0 5 108.9>80.9 5 245.9>137.0 5 备注：离子对条件参照2341第四法中的离子对信息 7实验结果 ①：为姜黄提取液原液 ②：为HLB500mg/6mL 净化后的姜黄提取液 ③：为HLB-C500mg/6mL 净化后的姜黄提取液 姜黄基质加标 GC-MS/MS部分化合物分析结果谱图 固相萃取法二处理姜黄基质 LOQ浓度点加标谱图 (GC-MS/MS 方法) o，p'-三氯杀螨醇 p，p'-三氯杀螨醇 地虫硫磷 甲基对硫磷 水胺硫磷 特丁硫磷 α-六六六 Y-六六六 姜黄基质加标LC-MS/MS部分化合物分析结果谱图 固相萃取法二处理姜黄基质 LOQ浓度点加标谱图 (LC-MS/MS 方法) 甲胺磷 甲拌磷砜 久效磷 灭线磷 特丁硫磷砜 涕灭威 治螟磷 表1 姜黄中33种农药残留的测定添加回收结果(%) 农残成分 回收率 农残成分 回收率 农残成分 回收率 甲胺磷 81.8% 苯线磷亚砜 81.0% 3-羟基克百威 79.9% 甲基对硫磷 95.4% 地虫硫磷 93.1% 涕灭威 70.6% 对硫磷 88.0% 硫线磷 82.5% 涕灭威砜 89.4% 久效磷 84.9% 蝇毒磷 89.4% 涕灭威亚砜 91.6% 磷胺 90.1% 治螟磷 100.4% 灭线磷 93.4% a-六六六 81.9% 特丁硫磷 95.5% 氯唑磷 82.0% β-六六六 90.6% 特丁硫磷砜 78.9% 水胺硫磷 88.5% Y-六六六 91.7% 特丁硫磷亚砜 85.1% α-硫丹 89.2% 6-六六六 110.8% 甲基硫环磷 87.2% β-硫丹 84.1% 2，4'-滴滴涕 88.4% 甲磺隆 73.4% 硫丹硫酸酯 91.6% 4，4'-滴滴滴 89.1% 氯磺隆 67.9% 氟虫腈 75.6% 4，4'-滴滴涕 90.7% 胺苯磺隆 72.5% 氟虫腈砜 111.2% 4，4'-滴滴伊 86.2% 甲拌磷 101.7% 氟虫腈亚砜 91.4% 杀虫脒 82.5% 甲拌磷砜 83.2% 氟甲腈 94.1% 除草醚 101.3% 甲拌磷亚砜 90.6% o，p'-三氯杀螨醇 93.6% 艾氏剂 84.7% 甲基异柳磷 104.5% p，p'-三氯杀螨醇 82.7% 狄氏剂 101.9% 内吸磷 74.0% 硫环磷 74.5% 苯线磷 72.7% 苯线磷砜 100.9% 克百威 72.5% 8实验讨论 通过以上实验数据可以看出，姜黄使用 SelectCore HLB-C 500mg/6mL 中药农残专用柱处理对其色素类成分、挥发油吸附良好，有效地减轻了样品中色素和挥发油成分对 GC-MS/MS 柱前端的污染和基质中干扰物对目标物的影响；并且使用 SelectCore HLB 500mg/6mL 固相萃取柱处理的姜黄 LC-MS/MS 基质加标液中化合物出峰良好，搭配上述解决办法可以有效解决姜黄中农残分析中存在的问题，提高了实验效率，为姜黄的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。 纳谱分析纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com NanoChrom 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com