款冬花中农残测定检测方案(石墨化碳混合小柱)

背景款冬花为菊科植物款冬的干燥花蕾，含有较多的色素类、挥发油类成分，这些成分会造成农残分析中个别目标物干扰较大、无法准确定性等问题，其中地虫硫磷干扰较为明显。针对花类含有色素和挥发油的项目，我们推荐固相萃取法二和固相萃取法三结合净化，效果较好。今天，我们来看看款冬花项目的前处理效果吧。适用范围本方法参考中国药典2020版2341第五法中的固相萃取法二和固相萃取法三，适用于含色素、挥发油类成分的中药材的农残检测。实验讨论通过以上实验数据可以看出，款冬花使用SelectCore GCB/NH2-II 固相萃取柱处理对其色素类成分吸附良好，有效地避免了样品中色素成分对GC-MS/MS柱前端的污染；使用SelectCore HLB固相萃取柱处理的款冬花LC-MS/MS样品液中干扰较少，搭配上述解决办法有效地解决了款冬花农残检测中地虫硫磷存在的问题，提高了实验效率，为款冬花的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。中药款冬花的33种农残测定分析 背景 款冬花为菊科植物款冬的干燥花蕾，含有较多的色素类、挥发油类成分，这些成分会造成农残分析中个别目标物干扰较大、无法准确定性等问题，其中地虫硫磷干扰较为明显。针对花类含有色素和挥发油的项目，我们推荐固相萃取法二和固相萃取法三结合净化，效果较好。今天，我们来看看款冬花的前处理效果吧。 款冬花 适用范围 本方法参考中国药典2020版2341 第五法中的固相萃取法二和固相萃取法三，适用于含色素、挥发油类成分的中药材的农残检测。 实验步骤 对照品溶液的制备 1.1混合对照品配制 精密量取禁用农药混合1mL， 置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用； 1.2气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备 取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每 1mL 含 1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL含0.1ng的溶液。 1.3空白基质溶液的制备 取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。 1.4基质混合对照溶液的制备 分别精密量取空白基质溶液 1.0mL(6份)，置氮吹仪上，40'C水浴浓缩至约0.6mL，分别加入混合对照品溶液 10mL、20pL、50 pL、100mL、150uL、200uL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。 2 供试品溶液的制备 2.1提取(直接提取法) 精密称取 5g样品(3号筛)，加氯化钠1g，加入50mL乙腈，匀浆处理2分钟，离心后分取上清液，残渣再加50mL 乙腈，匀浆处理1分钟，离心后，合并两次提取上清液，减压浓缩至3~5mL，加乙腈定容至10mL，摇匀，待净化。 3 净化 GC/MS/MS 样品净化：SPE 柱： SelectCore GCB/NH，-II 固相萃取柱500mg/500mg/6mL 净化：取 SelectCore GCB/NH，-II固相萃取柱用乙腈：甲苯(3：：1)10mL活化，量取上述款冬花提取液2mL， 置已活化的 SelectCore GCB/NH，-II固相萃取柱中，用乙腈：甲苯(3：1)20mL洗脱，收集全部样品液与洗脱液，40℃水浴减压回收至2mL，即得。 GC/MS/MS 测定： 基质加标配制：精密量取上述减压回收后的样品溶液1mL，氮吹至0.6mL加入混合对照溶液，乙腈定容至1mL， 再加入 0.3mL 磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22.m尼龙针式过滤器，上机分析。 样品溶液配制：精密量取上述减压回收后的样品溶液1mL加入 0.3mL 磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22n m 尼龙针式过滤器，上机分析。 LC/MS/MS 样品净化： SPE 柱： SelectCore HLB 固相萃取柱200mg/6mL 净化：量取上述款冬花提取液 3mL， 过 SelectCore HLB 固相萃取柱，收集全部净化液，混匀，即得。 LC/MS/MS 测定： 纳谱分析 基质加标配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液 1mL氮吹至0.6mL 加入混合对照品液，乙腈定容至1mL， 再加入0.3mL水，混匀，过0.22.m 尼龙针式过滤器，上机分析。 样品溶液配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液 1mL 加入0.3mL水，混匀，过0.22.m尼龙针式过滤器，上机分析。 4 气相色谱-串联质谱法(岛津GC-MS-TQ8040 NX) 色谱条件 色谱柱： NanoChrom BP-50+MS气相柱， 30m×0.25mm， 0.25mm； 进样口温度：250℃； 升温程序：初始温度为60℃，保持1min； 以10℃/min 升温至160℃；再以2℃/min 升温至230℃，最后以 15℃/min 升温至300℃，保持6min； 载气：高纯氦气(纯度>99.999%)； 进样方式：不分流进样； 恒压模式：：146kPa： 进样量： luL。 质谱条件 电离方式：电子轰击电离源(EI)； 电离能量：：70Ev： 接口温度：250℃； 离子源温度：250℃； 监测方式：多反应检测模式(MRM)； 溶剂延迟：10.0min。 5 高效液相色谱-串联质谱法(岛津 LC-MS 8045) 色谱条件 色谱柱： ChromCore C18-MS Pesticides 中药农残专用柱(2.1×100mm，2.6nm) 流动相： A： 0.1%甲酸水溶液(含有5mmol/L甲酸铵) B： 乙腈-0.1%甲酸水溶液(含有 5mmol/L甲酸铵)=95：5 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量：2HL 梯度： 时间(min) 流速(mL/min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 0.3 70 30 1 0.3 70 30 12 0.3 0 100 14 0.3 0 100 14.1 0.3 70 30 16 0.3 70 30 质谱条件 离子源：电喷雾离子源 (Electrospray ionization， ESI) 正离子扫描 监测方式：多反应监测 (Multiple Reaction Monitoring， MRM) 离子源接口电压：4.5kV 雾化气：氮气3.0L/min 加热气：：干燥空气 10.0L/min DL温度：250℃ 加热模块温度：400℃ 接口温度：300℃ 干燥气：： N10L/min 6 注意事项 由于款冬花基质复杂，在LC-MS/MS分析中地虫硫磷存在较大干扰无法准确判定，故选用 GC-MS/MS来检测款冬花中地虫硫磷的残留结果， GC-MS/MS 检测地虫硫磷条件如下表所示。 目标物 监测离子对 电压(CE) 地虫硫磷 245.9>109.0 15 136.9>109.0 5 108.9>80.9 5 245.9>137.0 5 备注：离子对条件参照 2341 第四法中的离子对信息 备注：离子对条件参照 2341 第四法中的离子对信息 7实验结果 1：为款冬花提取液原液 2： 为 SelectCore HLB 净化后的款冬花提取液 3：为 SelectCore GCB/NH-II 净化后的款冬花提取液 款冬花基质加标 GC-MS/MS部分化合物分析结果谱图 固相萃取法三处理款冬花基质 LOQ浓度点加标谱图 (GC-MS/MS方法) 地虫硫磷 甲基硫环磷 款冬花基质加标 LC-MS/MS部分化合物分析结果谱图 固相萃取法二处理款冬花基质 LOQ浓度点加标谱图 (LC-MS/MS 方法) 氯唑磷 特丁硫磷砜 表1 款冬花中33种农药残留的测定添加回收结果(%) 农残成分 回收率 农残成分 回收率 农残成分 回收率 甲胺磷 77.4% 苯线磷亚砜 77.1% 3-羟基克百威 82.9% 甲基对硫磷 92.3% 地虫硫磷 96.2% 涕灭威 77.1% 对硫磷 88.6% 硫线磷 74.3% 涕灭威砜 86.4% 久效磷 84.6% 蝇毒磷 95.9% 涕灭威亚砜 79.3% 磷胺 80.8% 治螟磷 93.6% 灭线磷 94.1% α-六六六 91.0% 特丁硫磷 96.2% 氯唑磷 75.2% β-六六六 93.5% 特丁硫磷砜 84.6% 水胺硫磷 94.5% Y-六六六 92.4% 特丁硫磷亚砜 84.1% α-硫丹 92.8% 6-六六六 90.1% 甲基硫环磷 87.3% β-硫丹 94.4% 2，4'-滴滴涕 90.0% 甲磺隆 80.4% 硫丹硫酸酯 88.7% 4，4'-滴滴滴 92.6% 氯磺隆 87.4% 氟虫腈 93.4% 4，4'-滴滴涕 92.2% 胺苯磺隆 62.1% 氟虫腈砜 93.4% 4，4'-滴滴伊 94.0% 甲拌磷 92.8% 氟虫腈亚砜 91.6% 杀虫脒 81.0% 甲拌磷砜 84.4% 氟甲腈 77.4% 除草醚 93.4% 甲拌磷亚砜 79.5% o，p'-三氯杀螨醇 94.2% 艾氏剂 94.3% 甲基异柳磷 94.2% p，p'-三氯杀螨醇 98.7% 狄氏剂 89.7% 内吸磷-O 92.3% 硫环磷 78.1% 苯线磷 94.8% 内吸磷-S 90.9% 苯线磷砜 96.7% 克百威 86.0% 8实验讨论 通过以上实验数据可以看出，款冬花使用 SelectCore GCB/NH，-II 固相萃取柱处理对其色素类成分吸附良好，有效地避免了样品中色素成分对 GC-MS/MS 柱前端的污染；使用 SelectCore HLB 固相萃取柱处理的款冬花 LC-MS/MS 样品液中干扰较少，搭配上述解决办法有效地解决了款冬花农残检测中地虫硫磷存在的问题，提高了实验效率，为款冬花的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com 纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com NanoChrom