枸杞中甜菜碱检测方案

枸杞中甜菜碱的检测 背景 枸杞子，为茄科植物枸杞的成熟果实。枸杞子具有多种保健功效，是卫生部批准的药食两用食物。适量食用有益健康，配合菊杞茶有清肝明目的效果。其质量标准在历版中国药典中以测定枸杞多糖和甜菜碱成分。由于甜菜碱极性大的特点，反相C18分析柱不能对其有较好的保留效果，因此2015版中国药典一直以薄层扫描测定为主，直到2020版中国药典才开始采用 HILIC 体系的氨基柱进行分析。本实验采用SelectCore Alumina B 固相萃取柱(2000mg/12mL)对枸杞子进行前处理，并用 ChromCore NH2 5um， 4.6×250mm 色谱柱进行分析，甜菜碱保留效果好，峰形良好，干扰杂质少，能有效保证实验顺利进行。 适用范围 本方法(参考中国药典2020版方法)，适用于枸杞中甜菜碱含量的测定。 实验步骤 1、试剂 无水乙醇、超纯水 2、对照品配制 称取 8 mg 甜菜碱对照品置于50 mL 容量瓶中，用水定容至刻度线，即浓度为160 ug/mL。 3、提取 称取1g枸杞样品(精确到0.01g) 于50mL离心管中，加入50 mL甲醇溶液，涡旋震荡1 min， 超声20 min， 4000 r/min 离心3 min 后，取上清液待净化。 4、净化 4.1、SPE柱： SelectCore Alumina B 固相萃取柱(2000mg/12mL) 活化：用10mL无水乙醇活化； 上样：加入2mL上清液， 弃去； 洗脱：用30mL 无水乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，水浴蒸至近干，用超纯水溶液复溶并定容至2 mL后过 0.22 um MCE针式滤器，上机检测。 5、液相色谱仪器条件 Column： ChromCore NH2，5 um Dimension： 4.6×250 mm Mobile Phase： 85/15 v/v 乙腈/水 Flow Rate： 1.0 mL/min Temperature： 30°C Injection： 10 pL Detection： UV 195 nm 图1：甜菜碱标准品色谱图 Phone： 400-808-3822 E-mail： customerservice@nanochrom.com 图2：枸杞提取原液色谱图 图3：枸杞提取液过固相萃取柱色谱图 图4：枸杞提取液加标(100%水平加标)过固相萃取柱色谱图 样品加标回收率实验结果 样品名称 加标回收率% 甜菜碱 96.35% 6、实验结论 由结果得出，选择纳谱分析的 SelectCore Alumina B 固相萃取柱(2000mg/12mL)，枸杞中甜菜碱的回收率大于90%，并且可以有效去除杂质干扰，使得样品图谱更加干净。选择 ChromCore NH2 5um， 4.6x250mm色谱柱，乙腈/水=85：15做流动相，甜菜碱对照品和实际样品中甜菜碱的理论塔板数分别为8769和10135，均超过药典规定的3000，符合检测标准。 纳谱分析纳谱分析技术(苏洲)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com NanoChrom 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Web：www.nanochrom.com 实验步骤1、试剂无水乙醇、超纯水2、对照品配制   称取8 mg甜菜碱对照品置于50 mL容量瓶中，用水定容至刻度线，即浓度为160 µg /mL。3、提取称取1 g枸杞样品（精确到0.01 g）于50 mL离心管中，加入50 mL甲醇溶液，涡旋震荡1 min，超声20 min， 4000 r/min离心3 min后，取上清液待净化。4、净化4.1、SPE柱：SelectCore Alumina B固相萃取柱（2000mg/12mL）活化：用10mL无水乙醇活化；上样：加入2 mL上清液，弃去；洗脱：用30 mL无水乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，水浴蒸至近干，用超纯水溶液复溶并定容至2 mL后过0.22μm MCE针式滤器 ，上机检测。