多西他赛注射液中杂质检测方案(液相色谱仪)

SSL-CA19-256Excellence in Science Excellence in ScienceLC-193 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn 高效液相色谱法测定多西他赛注射液有关物质 LC-193 摘要：本实验使用 Nexera LC-40 建立了多西他赛注射液有关物质分析的 HPLC 分析方法，同时对比 NexeraLC-40 和 LC-20A进行分析，表明在多西他赛注射液有关物质项目上， Nexera LC-40 超高效液相色谱仪具有分离效能高、分析时间短等特点。 关键词： LC-40 有关物质 多西他赛注射液 多西他赛注射液为一种抗癌类药物，多用于先期化疗失败的晚期或转移性乳腺癌以及顺铂化疗失败的晚期或转移性非小细胞肺癌的治疗。 射液有关物质的测定，进行Nexera LC-40 和 LC-20A对比分析，表明 Nexera LC-40 高效液相色谱仪能够提供更出色的分析效果、缩短分析运行时间，为客户色谱分析提高通量、降低成本。 本文参考国家食品药品监督管理局标准YBH04022012，采用高效液相色谱法进行多西他赛注 实验部分 1.1仪器 超高效液相色谱仪 Nexera LC-40 系统。具体配置为： LC-40B X3输液泵， SIL-40C X3自动进样器，， CTO-40S 柱温箱， SCL-40 系统控制器， SPD-M40 光电二极管阵列检测器，LabSolutions Ver. 5.97 色谱工作站。 图11Nexera LC-40B X3 系统 1.2分析条件 色谱柱： Shim-pack GIST 2.1 mml.D. × 100 mm L.， 2 um (P/N：227-30001-04，，岛津(上海)实验器材有限公司) 流动相：乙腈/甲醇/水(30/30/40，v/v/v) 流速： 0.4mL/min 波长：232nm 柱温：40℃洗脱程序：等度洗脱 进样量：5uL 结果与讨论 2.1LC-20A分析结果 图2 LC-20A测试色谱图 (色谱柱：InertSustain C18 4.6 mm l.D. × 150 mm L. 5 um， 流动相：乙腈/甲醇/水(30/30/40，v/v/v)， 流速：1.0mL/min， 进样量：10uL) 根据国家食品药品监督管理局标准YBH04022012所列方法，精密量取多西他赛注射液1mL，置于100mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。图2为 LC-20A用于多西他赛注射液有关物质测定结果色谱图。由表1可以看出多西他赛主成分出峰时间为 14.04 min，完成多西他赛注射液有关物质一针分析时间约为 35 min (参考标准YBH04022012，运行时间为主成分出峰时间的2.5倍)) 表1LC-20A分析结果 成分 保留时间((min) 分离度 面积归一化(%) 杂质1 11.29 N/A 0.1 多西他赛 14.04 4.70 99.7 杂质2 16.61 3.73 0.2 2.2 Nexera LC-40分析结果 图33NNexera LC-40 测试色谱图 图3为Nexera LC-40 用于多西他赛注射液有关物质测定结果色谱图。由表2可以看出多西他赛主成分出峰时间为 4.35 min， 完成多西他赛注射液有关物质一针分析时间约为10 min。相比于 LC-20A 分析多西他赛注射液的有关物质，在保证分离度良好的前提下，一针分析时间从 35 min 减少为 10min， 效率提升显著。 表2NNexera LC-40 测试结果 成分 保留时间(min) 分离度 面积归一化(%) 杂质1 3.52 N/A 0.1 多西他赛 4.35 4.35 99.7 杂质2 5.15 3.60 0.2 2.3重复性 在 UHPLC 分析条件下对待测样品连续进样6次，进行重复性考察。 结果显示，多西他赛及有关物质保留时间的 RSD%小于0.25%、峰面积的 RSD%小于3.0%，均在可接受范围内，表明 Nexera LC-40 超高效液相色谱急稳定可靠、重复性良好。 图41Nexera LC-40 进样分析时保留时间和峰面积(n=6)重复性结果 表3重复性结果 杂质1 多西他赛 杂质2 RT((min) Area RT (min) Area RT (min) Area Injection-1 3.51 12349 4.35 11817192 5.14 22139 Injection-2 3.51 13197 4.34 11796368 5.13 22469 Injection-3 3.51 12349 4.35 11817192 5.14 22139 Injection-4 3.50 12348 4.34 11807379 5.13 21534 Injection-5 3.50 13384 4.34 11807379 5.12 21534 Injection-6 3.50 13283 4.33 11813940 5.12 21425 Average 3.51 12485 4.34 11809908 5.13 21873 RSD% 0.22 2.8 0.17 0.07 0.17 2.0 2.4成本计算 从表4中可以看出， Nexera LC-40 超高效液相色谱仪相较于 LC-20A 进行多西他赛注射液有关物质的分析时，连续24h工作可完成144针运行，相同时间下比LC-20A 运行针数多出103针，效率提升250%，大大提高了分析通量、节省时间。从经济和环保角度看看，有机相使用量降低58%，降低色谱分析成本同时节省环保相关费用的支出。 表4成本计算结果 单针运行时间 35 min 10 min 24h 可运行针数 41针 144针 经济成本 Nexera LC-40 LC-20A 流速 1.0 mL/min 0.4 mL/min 运行24h消耗流动相 1440 mL 576 mL 流动相节省 864 mL 流动相比例 乙腈：甲醇：水=30：30：40 乙腈节省量 259 mL 甲醇节省量 259 mL 有机相单价 乙腈 0.13 RMB/ mL 甲醇 0.05 RMB/mL 24h有机相节省成本 46RMB 有机溶剂价格来源于试剂供应商当月报价 结论 采用 Nexera LC-40 建立多西他赛注射液有关物质的 UHPLC分析方法，并与原HPLC 方法进行对比，结果显示在有效提升分析效率的同时，Nexera LC-40 开发的 UHPLC 方法稳定可靠，且分离度、重复性良好、结果一致。另外，从时间成本和经济成本角度出发，极大为客户节省运行时间、降低运行成本。 岛津应用云 采用Nexera LC-40建立多西他赛注射液有关物质的UHPLC分析方法，并与原HPLC方法进行对比，结果显示在有效提升分析效率的同时，Nexera LC-40开发的UHPLC方法稳定可靠，且分离度、重复性良好、结果一致。另外，从时间成本和经济成本角度出发，极大为客户节省运行时间、降低运行成本。