血清中铅检测方案(原子吸收光谱)

石墨炉测定血液中的铅 临床医学 作者：王艳萍 摘要 本文建立了石墨炉简单、快速测定血铅的方法，采用5%的 HNO3 稀释10倍震荡离心测定上清液。方法测定的线性范围0—60 u g/L， 最低血液中的检测浓度2.5 u g/L， 回收率97.4-105.3%， RSD 在0.4—4.9%之间 1、引言(黑体小四) 血铅是诊断铅吸收和铅中毒的一个重要指标。目前测定血铅的方法包括化学比色法、石墨炉原子吸收分光光度法，氢化物原子荧光法， ICPMS等。本实验介绍了石墨炉原子吸收测定血铅5%硝酸稀释后直接测定。实验结果表明采用 Triton X-100+HNO3 实验结果表明采用 TritonX-100+HNO3 直接稀释测定对于进样稳定性和石墨管积碳的问题都很难解决，而采用 5%HNO3 震荡离心后测定上清液，可以有效克服进样稳定和石墨管积碳的问题。 2、实验方法 2.1材料与方法 2.2.1仪器 Agilent240Z 原子吸收光谱仪(Zeeman 效应背景校正)；热解涂层石墨管；铅空心阴极灯；漩涡混合器；离心机。 2.2.2试剂铅标准溶液；硝酸；人血；牛血铅标准物质 2.2.3基体改进剂的配制(0.5%的 (NH3) H2PO4 称取 0.5g(NH3)H2PO4 于 100mL 容量瓶加去离子水摇匀稀释定容到刻度。 2.2.4仪器的工作条件 1仪器的工作条件 Table 1 Instrument Operating Parameters 波长nm 283.3 狭缝 nm 0.5 灯电流mA 10 背景 Zeeman 测量方式 峰高 2.2.5石墨炉升温条件 Table 2 Furnace Parameters 2.3样品和标准曲线的配制 2.3.1 样品的处理取 100uL 的全血样品加入900uL 的5%的硝酸在漩涡混合器震荡15s 充分混匀。在离心机上以12000转离心 5min，取上清液上机测试。 2.3.2标准曲线的配制 表3血铅标准配制 Table 3 Calibration for lead in blood 管号 0 1 2 3 铅标 uL 0 10 20 50 硝酸 ul 900 890 880 850 全血 ul 100 100 100 100 铅标：1.ooomg/L Pb in 5%HNO3 硝酸：浓硝酸按照质量比稀释20倍 3结果与讨论 3.1前处理方法 实验中比较了两种前处理方式对血铅测定结果的影响。第一种前处理方式采用 Txriton X-100+HNO3 稀释10倍直接测定，实验结果发现前5个样品重复测定两次的 RSD 在3%以内，但越是后面明显发现 RSD越来越差，超出10%甚至达到30%，可以明显观 进样体积uL 石墨管类型 15(5基改) 察到毛细管进样针头挂珠现象，而且涂层 从进样摄像头可以观测到明显的积碳现象。 图1可视摄像头 Table 2 Furnace Parameters 表2程序升温 程序 温度℃ 时间S 气体流量L/MIN 干燥 85 5 0.3 干燥 95 40 0.3 干燥 120 10 0.3 灰化 400 5 0.3 灰化 400 1 0.3 灰化 400 2 0 原子化 2100 0.9 0 原子化 2100 2 0 除残 2100 2 0.3 3.2标准曲线 图1：水中铅的图谱 Figure1： Lead in water 图2：血中铅的图谱 Figure2： Lead in Blood ■缩放 比较血中铅和水中铅的谱图可以发现，在水中铅中塞曼背景信号很低(灰色线)，血中铅塞曼背景信号(灰色)很高比校正后的铅的实际信号(蓝色)还高，可以的出结论铅在水中和血中基体相差很大，所以我们要考虑到基体匹配，在配制工作曲线 必须按照表3来配制。 图3：血中铅标准曲线 Figure3： Calibration for Lead in Blood Abs 线性 - Cal. Set 3 曲线拟合：线性 相关系数r： 0.9999 3.3准确度验证 为了考察方法的准确度，采用了牛血铅标准物质作为样品测试，测定结果如下： 表 4 NIST SRM955b标准物质的测定结果 Table 4 Determination of NIST SRM955b 样品标号 保证值 测定值 Level1 12 11.3 Level2 23 22.9 Level3 39 38.7 Level4 51 50.9 实验结果表明这种方法血铅结果和真值符合的很好，表明方法准确可靠。 3 结论 血液中的铅采用5%的硝酸直接稀释震荡离心后，石墨炉测定上清液，方法准确可靠。适用于血铅的快速测定。 摘要本文建立了石墨炉简单、快速测定血铅的方法，采用5%的HNO3稀释10倍震荡离心测定上清液。方法测定的线性范围0—60ｕg/L，最低血液中的检测浓度2.5ｕg/L，回收率97.4—105.3%，RSD在0.4—4.9%之间。引言血铅是诊断铅吸收和铅中毒的一个重要指标。目前测定血铅的方法包括化学比色法、石墨炉原子吸收分光光度法，氢化物原子荧光法，ICPMS等。本实验介绍了石墨炉原子吸收测定血铅5%硝酸稀释后直接测定。实验结果表明采用Triton X-100+HNO3直接稀释测定对于进样稳定性和石墨管积碳的问题都很难解决，而采用5%HNO3震荡离心后测定上清液，可以有效克服进样稳定和石墨管积碳的问题。实验结果表明采用Triton X-100+HNO3直接稀释测定对于进样稳定性和石墨管积碳的问题都很难解决，而采用5%HNO3震荡离心后测定上清液，可以有效克服进样稳定和石墨管积碳的问题。结论血液中的铅采用5%的硝酸直接稀释震荡离心后，石墨炉测定上清液，方法准确可靠。适用于血铅的快速测定。