【应用分享】中药桔梗的33种农残测定分析

样品净化：Q法净化管：Q-15PCSG01 SelectCore QuEChERS净化管 15mL, 900mg MgSO4, 300mg PSA, 300mg C18, 300mg Silica, 90mg GCB净化：取上述提取液上清液9mL置Q-15PCSG01净化管中涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟使净化完全，离心(每分钟4000转)5分钟，即得。气相色谱-串联质谱法（岛津GC-MS-TQ8040 NX）色谱柱：NanoChrom BP-50+MS,30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度：250 ℃升温程序：初始温度为60 ℃，保持1 min；                       以10 ℃/min升温至160 ℃；                再以2 ℃/min升温至230 ℃;                 最后以15 ℃/min升温至300 ℃, 保持6 min；载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；进样方式：不分流进样；恒压模式：146 kPa；进样量：   1 μL高效液相色谱-串联质谱法（岛津LC-MS 8045）色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱 2.1mm×100mm×2.6μm；  流动相：A：0.1%甲酸水溶液（含有5 mmol/L甲酸铵）B：乙腈-0.1%甲酸水溶液（含有5 mmol/L甲酸铵）=95:5流速：0.3 mL/min柱温：40 ℃进样量：2 µL中药桔梗的33种农残测定分析 背景 桔梗为桔梗科植物桔梗的干燥根，含有较多皂苷类成分。今天，我们来看看桔梗项目的前处理效果吧。 适用范围 本方法参考中国药典2020版2341第五法中的QuEChERS法，适用于常规中药材的农残检测。 实验步骤 1 对照品溶液的制备 1.1混合对照品配制 精密量取禁用农药混合1mL， 置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用； 1.2气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备 取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL 含 0.1ng的溶液。 1.3空白基质溶液的制备 取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。 1.4基质混合对照溶液的制备 分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份)，置氮吹仪上，40'C水浴浓缩至约 0.6mL，分别加入混合对照品溶液10 IL、20pL、50pL、100pL、150 pL、200pL， 加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。 2 供试品溶液的制备 2.1提取(QuEChERS 法) 取供试品粉末(过三号筛)3g，精密称定，置50mL 聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液 15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15mL， 涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟，加入 QS-002盐包，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(500次/分)3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心(每分钟4000转)5分钟，待净化。 3 净化 Q法净化管： Q-15PCSG01 SelectCore QuEChERS 净化管 15mL， 900mg MgSO， 300mg PSA， 300mg C18，300mg Silica， 90 mg GCB 净化：取上述提取液上清液9mL置Q-15PCSG01 净化管中涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟使净化完全，离心(每分钟4000转)5分钟，即得。 GC/MS/MS 测定： 基质加标配制：精密吸取上清液5mL， 置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.6mL， 加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL 磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22m针式尼龙滤头，上机分析。 样品溶液配制：精密吸取上清液5mL，置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至1.0mL， 加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22!m针式尼龙滤头，上机分析。 LC/MS/MS 测定： 基质加标配制：精密吸取上清液 5mL，置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约 0.6mL，加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0 mL， 涡旋混匀，再加入0.3mL水，混匀，过0.22!m针式尼龙滤头，上机分析。样品溶液配制：精密吸取上清液5mL， 置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至1.0mL， 加入0.3 mL水，混匀，过0.221m针式尼龙滤头，上机分析。 4 气相色谱-串联质谱法(岛津GC-MS-TQ8040NX) 色谱条件 色谱柱： NanoChrom BP-50+MS气相柱， 30m×0.25mm， 0.25mm； 进样口温度：250℃； 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以10℃/min升温至160℃；再以2℃/min 升温至230℃，最后以15℃/min 升温至300℃，保持6min； 载气：高纯氦气(纯度>99.999%)； 进样方式：：不分流进样； 恒压模式：146kPa： 进样量：1luL。 质谱条件 电离方式：电子轰击电离源(EI)； 电离能量：：70Ev： 接口温度：2250℃： 离子源温度：250℃； 监测方式：多反应检测模式 (MRM)； 溶剂延迟：：10.0min。 5 高效液相色谱-串联质谱法(岛津 LC-MS 8045) 色谱条件 色谱柱： ChromCore C18-MS Pesticides 中药农残专用柱(2.11×100mm，2.6rm) 流动相： A： 0.1%甲酸水溶液(含有5mmol/L甲酸铵) B： 乙腈-0.1%甲酸水溶液(含有 5mmol/L 甲酸铵)=95：5 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量：2HL 梯度： 时间(min) 流速(mL/min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 0.3 70 30 1 0.3 70 30 12 0.3 0 100 14 0.3 0 100 14.1 0.3 70 30 16 0.3 70 30 质谱条件 离子源：电喷雾离子源 (Electrospray ionization， ESI) 正离子扫描监测方式：多反应监测 (Multiple Reaction Monitoring， MRM) 离子源接口电压：4.5kV 雾化气：：氮气 3.0L/min 加热气： 干燥空气 10.0L/min DL温度：250℃ 加热模块温度：400℃ 接口温度：300℃ 干燥气： N，10L/min 6 注意事项 使用 QuEChERS 法提取，加入盐包脱水时会放热，为减轻脱水时的放热可在加入盐包脱水之前将样品液与脱水盐包一起放入冰箱冷冻半小时，取出立刻加入脱水盐包充分摇匀。 7实验结果 桔梗基质加标 GC-MS/MS 部分化合物分析结果谱图 时间 41.581 扫描号13.203强度 -5，876 柱温箱温度229.1 A 从 人从 A QuEChERS 法处理桔梗基质 LOQ 浓度点加标谱图 (GC-MS/MS方法) 甲基异柳磷 水胺硫磷 桔梗基质加标 LC-MS/MS部分化合物分析结果谱图 Tine 2.0oz 3Caliln8.488 iel. QuEChERS 法处理桔梗基质 LOQ浓度点加标谱图 (LC-MS/MS方法) 地虫硫磷 硫线磷 表1 桔梗中33种农药残留的测定添加回收结果(%) 农残成分 可收率 农残成分 回收率 农残成分 回收率 甲胺磷 82.3% 苯线磷亚砜 86.7% 3-羟基克百威 76.9% 甲基对硫磷 89.0% 地虫硫磷 89.2% 涕灭威 75.9% 对硫磷 71.2% 硫线磷 87.8% 涕灭威砜 100.3% 久效磷 91.3% 蝇毒磷 93.0% 涕灭威亚砜 90.8% 磷胺 86.6% 治螟磷 87.8% 灭线磷 83.9% 们-六六六 86.5% 特丁硫磷 83.2% 氯唑磷 85.1% β-六六六 87.7% 特丁硫磷砜 91.9% 水胺硫磷 89.9% Y-六六六 87.1% 特丁硫磷亚砜 88.3% α-硫丹 81.4% 6-六六六 90.2% 甲基硫环磷 92.8% β-硫丹 85.9% 2，4-滴滴涕 85.5% 甲磺隆 85.9% 硫丹硫酸酯 91.2% 4，4-滴滴滴 86.6% 氯磺隆 78.8% 氟虫腈 86.3% 4，4'-滴滴涕 87.5% 胺苯磺隆 83.0% 氟虫腈砜 83.9% 4，4-滴滴伊 84.0% 甲拌磷 86.0% 氟虫腈亚砜 84.4% 杀虫脒 81.9% 甲拌磷砜 81.4% 氟甲腈 86.3% 除草醚 86.2% 甲拌磷亚砜 86.1% o，p'-三氯杀螨醇 84.8% 艾氏剂 82.4% 甲基异柳磷 86.3% p，p'-三氯杀螨醇 87.5% 狄氏剂 77.0% 内吸磷-O 92.2% 硫环磷 84.1% 苯线磷 84.5% 内吸磷-S 85.9% 苯线磷砜 82.1% 克百威 83.5% 8实验讨论 通过以上实验数据可以看出，桔梗使用 QuEChERS 法处理后各农残化合物出峰良好，回收数据也在规定范围内，为桔梗的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com