山药中33种禁用农药检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-514Excellence in Science Excellence in Science 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.- Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn GC-MS/MS 法测定中药材山药中35个农药残留物含量 GCMSMS-219 摘要：本文采用岛津三重四极杆气质联用仪 GCMS-TQ8050 NX 建立了中药材山药中35个禁用农药残留物的检测方法。本方法依照2020年版《中国药典》通则2341第五法《药材及饮片(植物类)中禁用农药多残留测定法》规定建立。在2~40 ug/L(以对硫磷计)浓度范围内建立基质校准曲线，线性关系良好，相关系数r均大于0.999。取校准曲线最低点连续分析6次，35个禁用农药残留物峰面积精密度均在10.88%以内。该方法适用于《中国药典》2020年版规定的药材及饮片(植物类)中禁用农药残留量的定量测定。 关键词：气相色谱-三重四极杆质谱联用仪山药禁用农药 表1 农药残留物及内标磷酸三苯酯的保留时间及 MRM条件设置 No. 化合物名称 英文名称 保留时间 (min) CAS 号 特征离子对 碰撞电压(CE) 1、8 demeton(O&S) 12.058 8065-48-3 88.0>60.0 4 内吸磷(O&S) 16.561 88.0>59.0 20 灭线磷 Ethoprophos 13.034 13194-48-4 199.7>157.8 5 157.8>96.7 20 3 杀虫脒 chlordimeform free base 13.761 6164-98-3 152.0>117.0 15 196.0>181.0 5 GCMSMS-219 GCMSMS-219 27 苯线磷 Fenamiphos 34.866 22224-92-6 303.1>122.0 20 303.1>154.0 30 28 甲基硫环磷 phosfolan-methyl 35.756 5120-23-0 168.0>109.0 15 227.0>92.0 10 29 2，4'-滴滴涕 0，p'-DDT 37.707 789-02-6 235.0>165.0 235.0>199.0 25 15 30 除草醚 Nitrofen 37.659 1836-75-5 201.8>138.7 28 282.8>253.0 10 31 4，4'-滴滴滴 p，p'-DDD 38.685 72-54-8 235.0>165.0 25 237.0>165.0 25 32 3-硫丹 beta-Endosulfan 38.799 33213-65-9 206.8>171.8 15 194.8>124.7 30 33 4，4'-滴滴涕 P，p'-DDT 41.072 50-29-3 235.0>165.0 25 235.0>199.0 15 34 硫丹硫酸酯 Endosulfan sulfate 42.900 271.8>236.7 15 1031-07-8 273.8>238.9 15 IS 磷酸三苯酯 44.800 115-86-6 326.0>233.0 10 (内标) Triphenyl phosphate 326.0>215.0 25 361.8>109.0 361.8>81.0 16 32 35 蝇毒磷 Coumaphos 48.519 56-72-4 样品前处理 样品处理流程见下图1。 图1样品前处理流程 结果与讨论 3.1标样总离子流和质量色谱图 35个禁农药残留物混标溶液 MRM 谱图见图2，各物质出峰时间详见表1。 图235个农药残留物和磷酸三苯酯 (TPP)混标溶液 MRM总离子流图(10~25 ug/L) 使用山药空白基质配置浓度为 2~5 ug/L(以对硫磷计)的35个禁用农药残留物的标准溶液(相当于山药中禁用农药含量为 0.002~0.005 mg/kg)，其中部分农药组分的 MRM 质量色谱图如图3所示。 图33山药空白基质加标农药组分质量色谱图(农药组分浓度2~5pg/L) 注：由于篇幅所限，只列出了部分农药及代谢物的质量色谱图 3.2标准曲线 使用山药空白基质配制农药混合标准溶液，每1mL标准溶液加入0.3 mL浓度为 0.1ug/mL磷酸三苯酯作为内标(参照《中国药典》通则2341第五法)，取1uL进样。以目标农药与内标浓度比为横坐标，峰面积比为纵坐标，制作内标曲线。因篇幅所限，部分农药组分内标曲线如图4所示。根据2~5 ug/L标准混合溶液数据，计算方法检出限(3倍噪声计算，噪声计算方式为峰至峰)，各组分内标曲线线性相关系数及检出限见表2. Area Ratio Area Ratio 0 20 40 60 0 20 40 60 80 100 Conc.Ratio (ug/L) Conc.Ratio (ug/L) 图4部分禁用农药标准曲线 表2 35个农药残留物线性相关系数及检出限 No. 化合物名称 浓度范围(ug/mL) 相关系数 (R) LOD (ug/kg) 内吸磷-0 0.002~0.04 0.9999 0.071 灭线磷 0.002~0.04 0.9999 0.257 3 杀虫脒 0.002~0.04 0.9999 0.032 4 治螟磷 0.002~0.04 0.9999 0.003 5 甲拌磷 0.002~0.04 0.9999 0.002 6 a-六六六 0.005~0.1 0.9999 0.007 特丁硫磷 0.002~0.04 0.9994 0.183 8 内吸磷-S 0.002~0.04 0.9991 0.153 9 y-六六六 0.005~0.1 0.9998 0.017 10 久效磷 0.003~0.06 0.9999 0.042 11 氟甲腈 0.002~0.04 0.9997 0.001 12 β-六六六 0.005~0.1 0.9999 0.014 13 8-六六六 0.005~0.1 0.9997 0.038 14 艾氏剂 0.005~0.1 0.9999 0.030 15 甲基对硫磷 0.002~0.04 0.9997 0.020 16 o，p'-三氯杀螨醇 0.005~0.1 0.9999 0.011 17 氟虫腈亚砜 0.002~0.04 0.9996 0.003 18 氟虫腈 0.002~0.04 0.9998 0.002 19 对硫磷 0.002~0.04 0.9997 0.131 20 p，p'-三氯杀螨醇 0.005~0.1 0.9999 0.024 21 甲基异柳磷 0.002~0.04 0.9998 0.013 22 水胺硫磷 0.005~0.1 0.9999 0.151 23 a-硫丹 0.005~0.1 0.9999 0.016 24 氟虫腈砜 0.002~0.04 0.9999 0.003 25 狄氏剂 0.005~0.1 0.9998 0.113 26 4，4'-滴滴伊 0.005~0.1 0.9999 0.015 27 苯线磷 0.002~0.04 0.9998 0.186 28 甲基硫环磷 0.003~0.06 0.9998 0.046 29 除草醚 0.005~0.1 0.9999 0.018 30 2，4'-滴滴涕 0.005~0.1 0.9998 0.014 31 4，4'-滴滴滴 0.005~0.1 0.9998 0.014 32 B-硫丹 0.005~0.1 0.9999 0.089 33 4，4'-滴滴弟 0.005~0.1 0.9997 0.014 34 硫丹硫酸酯 0.005~0.1 0.9991 0.010 35 蝇毒磷 0.005~0.1 0.9998 0.024 3.3检出限及重复性 取低、中、高三个浓度标准溶液，连续进样6次，考察分析方法保留时间和峰面积的重复性。结果表明：35个农药残留物保留时间的 RSD % 均小于0.04%，峰面积的 RSD%均小于10.88%，方法重复性良好，仪器精密度良好，结果见表3. 表3 重复性测试(n=6) 名称 RSD% (2~5pg/L) RSD% (10~15 ug/L) RSD% (20~50 ug/L) R.T. Area R.T. Area R.T. Area 内吸磷-O 0.03 1.73 0.02 1.52 0.02 1.27 灭线磷 0.02 3.59 0.02 1.53 0.01 1.41 杀虫脒 0.03 2.62 0.01 1.24 0.01 1.34 治螟磷 0.03 5.06 0.01 1.81 0.02 1.37 甲拌磷 0.03 9.83 0.02 0.95 0.02 1.11 α-六六六 0.03 0.73 0.02 1.08 0.01 1.27 特丁硫磷 0.03 4.13 0.02 2.23 0.02 2.50 内吸磷-S 0.04 6.70 0.02 2.13 0.02 2.64 y-六六六 0.03 1.49 0.01 2.23 0.01 1.73 久效磷 0.04 6.98 0.02 4.26 0.02 4.09 氟甲腈 0.04 1.66 0.02 0.96 0.01 1.86 β-六六六 0.04 5.25 0.01 1.03 0.01 1.31 6-六六六 0.04 5.90 0.01 2.37 0.01 2.19 艾氏剂 0.04 2.56 0.02 3.83 0.01 1.28 甲基对硫磷 0.03 4.01 0.01 2.74 0.01 3.64 o，p'-三氯杀螨醇 0.04 2.97 0.01 1.73 0.01 1.96 氟虫腈亚砜 0.04 3.10 0.02 1.90 0.01 2.22 氟虫腈 0.03 5.07 0.02 1.44 0.01 2.27 对硫磷 0.03 5.18 0.02 4.51 0.01 2.66 p，p'-三氯杀螨醇 0.03 2.05 0.01 1.03 0.01 1.52 甲基异柳磷 0.03 4.19 0.01 1.23 0.01 2.27 水胺硫磷 0.03 1.54 0.01 1.45 0.01 1.50 a-硫丹 0.03 2.66 0.02 1.43 0.01 1.30 氟虫腈砜 0.04 1.37 0.01 1.65 0.01 0.83 狄氏剂 0.04 3.91 0.03 2.15 0.01 1.23 4，4'-滴滴伊 0.03 1.33 0.01 0.91 0.01 1.13 苯线磷 0.03 10.88 0.02 2.84 0.01 0.62 甲基硫环磷 0.03 2.35 0.02 2.66 0.01 3.01 除草醚 0.03 3.06 0.01 1.43 0.00 1.33 2，4'-滴滴涕 0.03 1.91 0.01 1.01 0.01 1.73 4，4'-滴滴滴 0.03 1.78 0.01 0.81 0.01 1.43 β-硫丹 0.04 3.15 0.01 1.90 0.01 1.60 4，4'-滴滴涕 0.02 2.94 0.01 0.97 0.01 2.10 硫丹硫酸酯 0.02 2.96 0.01 2.77 0.00 4.98 蝇毒磷 0.01 1.89 0.00 1.12 0.00 1.50 3.4加标回收率 取山药样品，按照样品前处理步骤中制备样品和加标样品，三个水平加标浓度如下表4所示，各样品平行测定6次。测试结果显示：通过两步提取，各水平的加标回收率在89.49~118.58%之间，相对标准偏差RSD%在0.37~12.04%之间。 表4基质加标实验结果 名称 加标 (2~5ug/kg) ，n=6 加标(10~15ug/kg)，n=6 加标(20~30 ug/kg) ，n=6 回收率% RSD% 回收率% RSD% 回收率% RSD% 内吸磷-O 99.70 2.90 108.61 0.91 100.24 0.79 灭线磷 108.73 0.76 106.14 1.41 100.60 1.33 杀虫脒 100.67 1.62 108.50 0.92 99.52 0.52 治螟磷 102.94 5.44 109.59 0.79 101.73 1.67 甲拌磷 103.19 8.31 109.11 0.87 101.65 1.41 α-六六六 97.64 1.48 104.89 0.82 97.38 0.37 特丁硫磷 102.78 4.60 112.56 0.99 103.08 2.53 内吸磷-S 92.47 12.04 98.99 5.90 96.29 3.15 v-六六六 100.28 3.82 106.07 1.24 97.58 1.11 久效磷 91.96 5.04 98.41 2.23 89.49 4.66 氟甲腈 96.29 1.37 106.27 0.89 98.45 1.52 β-六六六 99.72 2.16 107.64 1.26 100.08 0.68 8-六六六 91.05 4.86 96.92 2.69 88.81 3.53 艾氏剂 101.46 4.57 106.26 3.61 101.89 0.88 甲基对硫磷 118.58 3.49 117.78 1.49 106.86 2.52 o，p'-三氯杀螨醇 101.67 1.94 109.36 1.18 102.41 1.23 氟虫腈亚砜 99.92 1.21 109.79 0.74 102.56 0.74 氟虫腈 102.25 2.90 108.94 1.49 101.03 0.97 对硫磷 100.82 5.23 104.47 2.39 101.13 1.75 p，p'-三氯杀螨醇 103.55 1.54 110.45 0.91 102.70 1.21 甲基异柳磷 100.83 1.34 108.89 1.11 101.43 1.35 水胺硫磷 90.04 2.41 99.49 1.50 90.21 2.38 a-硫丹 102.47 2.99 108.85 0.67 101.53 1.22 氟虫腈砜 100.47 1.65 108.82 0.83 101.12 0.79 狄氏剂 102.42 2.34 108.80 1.88 101.17 0.66 4，4'-滴滴伊 102.34 1.44 110.97 0.97 104.01 1.24 苯线磷 103.23 4.56 114.06 1.80 103.42 1.22 甲基硫环磷 95.63 3.77 100.77 1.99 90.38 3.76 除草醚 97.84 1.56 107.65 0.83 98.54 0.75 2，4'-滴滴涕 104.75 2.03 111.95 0.92 102.77 1.36 4，4'-滴滴滴 98.26 1.40 106.98 0.67 99.79 0.47 -充丹 104.42 6.64 108.88 1.63 100.23 2.03 4，4'-滴滴涕 105.97 1.62 111.41 1.33 101.11 1.57 硫丹硫酸酯 92.58 4.10 96.32 4.39 90.05 5.67 蝇毒磷 97.71 1.03 105.53 1.01 97.90 1.29 结论 本文利用岛津 GCMS-TQ8050NX， 建立一种简便、快速、准确的药材及饮片(植物类)中禁用农药多残留的分析方法。该方法采用内标法定量，校准曲线在2~40 ug/L(以对硫磷计)的浓度范围内，各组分线性相关系数均在0.999以上，线性良好。对高、、中、低水平的标准溶液重复进样6针，保留时间和峰面积均表现出了良好的重复性。加标回收实验中，各物质回收率在89.49~118.58%之间，平行样品的峰面积RSD%值在0.37~12.04%之间，回收率及精密度良好。该方法操作简捷，为药材及饮片(植物类))中禁用农药多残留的检测提供很好的参考。 岛津应用云 本文利用岛津GCMS-TQ8050NX，建立一种简便、快速、准确的药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留的分析方法。该方法采用内标法定量，校准曲线在2~40   µg/L（以对硫磷计）的浓度范围内，各组分线性相关系数均在0.999以上，线性良好。对高、中、低水平的标准溶液重复进样6针，保留时间和峰面积均表现出了良好的重复性。加标回收实验中，各物质回收率在89.49   ~ 118.58 %之间，平行样品的峰面积RSD %值在0.37~ 12.04 %之间，回收率及精密度良好。该方法操作简捷，为药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留的检测提供很好的参考。