中药材中18种多环芳烃检测方案(气质联用仪)

SSL-CA14-448Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-111 岛津全球应用技术开发支持中心上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋 咨询电话：021-34193996http：//www.shimadzu.com.cn GC-MS/MS 法测定中药材中的18种多环芳烃 GCMSMS-111 摘要：本文利用岛津公司的 GCMS-TQ8050 三重四极杆气质联用仪，建立了一种中药材中18种多环芳烃的测定方法。样品经正己烷+丙酮超声提取，经固相萃取柱净化，用GC-MS/MS 检测。在5~200 pg/L 浓度范围内各组分线性关系良好，各组分相关系数均达到0.999以上，检出限在 0.06~1.01 ug/kg 之间。5 ug/L 标准品溶液连续进样6针，各组分峰面积 RSD%均小于5%。该方法简便快速，能够有效检测中药材中多环芳烃的含量。 关键词： GCMS-TQ8050三重四极杆气质联用仪中药材多环芳烃 近些年来，环境污染物对中草药的影响已经引起了广泛的关注，有害物质的残留，严重影响着中草药的品质，已成为阻碍中草药向国际化发展的“瓶颈”。多环芳烃 (PAHs) 是一种由二至七个不等的苯环所组成的线状、角状或团状的化学物质，是一类非常广泛的有机污染物，有很强的致癌、致畸、致突变性和高亲脂性，很容易在人体内蓄积。中草药在其生长过程中可以吸收或吸附污染空气或土壤中的 PAHs， 并且在其体内不断富集，从而对人体健康产生危害，中草药在其生产和加工过程中会引入一些热加工工艺，包括炒、蒸等，在这些 高温条件下也可能会导致多环芳烃化合物的生成。按中医理论，，一般中草药服用的时间较长，用量也较大，多环芳烃的侵入会造成严重隐患，因此，研究中草药中的多环芳烃含量水平对于规范中草药种植和生产，以及降低人体健康风险，具有重要的意义。 本文采用岛津 GCMS-TQ8050 三重四极杆气质联用仪，建立一种分析中药材中18种多环芳烃的检测方法，该方法简单方便，抗干扰能力强，检出限低，能够有效的监测中药材中多环芳烃的含量。 实验部分 1.1仪器 GCMS-TQ8050 三重四极杆气相色谱-质谱联用仪 1.2分析条件 色谱柱： Rtx-5sil ms(30 m x0.25 mm ×0.25 um) 进样量：1uL 离子化方式： EI 离子源温度：200℃ 进样口温度：280℃ 色谱质谱接口温度：280℃ 流速控制方式：恒线速度方式 检测器电压：调谐电压+0.3 kv 线速度：36.9 cm/sec 采集模式： MRM，离子信息见表1。 进样方式：不分流进样 1.3样品前处理 前处理过程如下：中药材粉碎后，精密称取1.0g粉末放入50 mL 离心管中，加入20 mL 正己烷+丙酮(1：1)溶液，在40℃超声提取30 min 后5000 r/min 离心7 min， 收集上层清液，样品中再次加入20 mL 正己烷+丙酮(1：1)溶液，超声提取10 min， 离心后合并两次提取液，氮吹至近1mL，转移至C18固相萃取柱上，使用前在 C18 固相萃取柱上加入约150 mg PSA 粉末， 并用5 mL正己烷活化，上样后用5 mL正己烷：二氯甲烷(3：2)溶液洗脱，收集洗脱液，氮吹至近干，用2mL正己烷溶解，过 0.22 um有机滤膜后上机分析。 结果讨论 2.1多环芳烃标准溶液谱图 18种多环芳烃标准溶液 TIC 如图1所示，各组分质量色谱图如图2所示。 图1多环芳烃标准溶液TIC图(5 ug/L) 荧蒽 芘 苯并[a]蒽 表1 多环芳烃各组分保留时间及MRM参数 No. 中文名称 保留时 间(min) 定量离子对 CE 定性离子对1 CE 定性离子对2 CE 1 萘 5.391 128.00>102.10 21.00 128.00>78.10 24.00 128.00>76.10 30.00 2 苊烯 7.307 152.00>150.20 27.00 152.00>126.10 21.00 152.00>102.10 27.00 3 苊 7.518 154.00>152.10 30.00 153.00>151.20 27.00 153.00>127.10 24.00 4 芴 8.152 165.00>163.10 27.00 165.00>115.10 27.00 166.00>164.20 30.00 5 菲 9.338 178.00>152.10 21.00 178.00>176.20 27.00 176.00>150.10 21.00 6 蒽 9.400 178.00>152.10 21.00 178.00>176.10 24.00 176.00>150.10 21.00 7 荧蒽 10.803 202.00>200.10 36.00 101.00>88.10 27.00 202.00>152.10 36.00 8 芘 11.085 202.00>200.10 36.00 101.00>88.10 39.00 203.00>201.10 36.00 9 苯并[a]蔥 13.005 228.00>226.10 30.00 226.00>224.10 33.00 229.00>227.00 33.00 10 屈 13.082 228.00>226.10 33.00 226.00>224.10 30.00 229.00>227.10 33.00 11 苯并[b]荧蒽 15.985 252.00>250.00 42.00 250.00>248.00 36.00 126.00>113.10 12.00 12 苯并[k]荧蒽 15.985 252.00>250.00 42.00 250.00>248.00 39.00 126.00>113.10 12.00 13 苯并[j]荧蒽 16.060 252.00>250.00 33.00 126.00>113.10 39.00 253.00>251.00 33.00 14 苯并[a]芘 16.991 252.00>250.00 36.00 126.00>113.10 33.00 253.00>251.00 42.00 15 苯并[e]芘 17.200 252.00>250.00 36.00 126.00>113.00 36.00 253.00>251.10 33.00 16 茚并[1，2，3-cd]芘 22.568 276.00>274.00 39.00 277.00>275.10 36.00 138.00>125.10 15.00 17 二苯并[a，h]蒽 22.756 278.00>276.20 39.00 279.00>277.10 30.00 278.00>274.20 42.00 18 苯并[g，h，i]芘 23.634 276.00>274.00 45.00 277.00>275.00 39.00 138.00>136.20 30.00 2.2标准曲线 分别配制5、10、20、50、100、200 ug/L 的多环芳烃混合标准溶液，取1pL进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线，各组分标准曲线如图3所示，各组分标准曲线相关系数如表2所示。 1.50- 1.25- 1.00- 0.75- 0.50- 0.25- 0.00 Conc. nZOVWIHS 罗 图33多环芳烃各组分标准曲线 2.3检出限和重复性 取5 ug/L 和10 ug/L标准品溶液，分别连续进样6次，考察仪器的重复性，根据5 ug/L标准溶液数据，计算检出限(以3倍信噪比计算)，测定结果见表2。 表2各组分检出限及峰面积重复性(n=6) No. 化合物 相关系数 检出限(ug/kg) RSD%(5ug/L) RSD%(10pg/L) 萘 0.9998 0.12 4.55 2.38 苊烯 0.9997 0.08 2.36 2.40 苊 0.9998 0.12 2.86 2.27 4 0.9996 0.18 3.43 2.22 0.9996 0.24 3.11 2.32 6 蒽 0.9996 0.16 4.45 3.14 荧蒽 0.9996 0.07 2.98 2.66 8 芘 0.9994 0.06 4.41 3.91 苯并[a]蒽 0.9992 0.07 1.85 2.62 10 屈 0.9995 0.12 3.21 1.91 11 苯并[b]荧蒽+ 苯并[k]荧蒽 0.9999 0.18 3.82 2.39 12 苯并[i]荧蒽 0.9997 0.17 4.56 3.02 13 苯并[a]芘 0.9994 0.17 3.20 2.41 14 苯并[e]芘 0.9999 0.21 4.12 1.68 15 茚并[1，2，3.cd]芘 0.9994 0.31 3.46 1.93 16 二苯苯[a，h]蒽 0.9994 1.01 3.13 3.03 17 苯并[g，h，i]芘 0.9996 0.31 4.57 1.87 2.4加标回收率 将多环芳烃混标溶液添加到空白中药材样品中，加标浓度为0.05 ug/g，按照样品前处理方法制备，平行处理三个样品，回收率结果见表3。 表3样品中18种多环芳烃的回收率结果 No. 化合物 添加浓度 0.05 ug/g 平均回收率 回收率1(%) 回收率2(%) 回收率3(%) (%) 1 萘 100.01 115.12 97.72 104.28 2 造烯 93.80 81.72 82.41 85.98 3 苊 95.16 86.24 84.88 88.76 芴 93.95 89.84 83.60 89.13 5 菲 105.72 120.36 101.88 109.32 6 蒽 108.69 103.48 102.12 104.76 7 荧蒽 100.32 102.52 97.12 99.98 8 芘 102.36 113.44 103.28 106.36 9 苯并[a]蒽 105.44 106.92 103.80 105.38 10 屈 98.92 95.04 92.81 95.59 11 苯并[b]荧蒽+ 苯并[k]荧蒽 96.04 103.76 97.32 99.04 12 苯并[j]荧蒽 99.88 98.76 97.76 98.80 13 苯并[a]芘 96.20 97.52 92.84 95.52 14 苯并[e]芘 100.9 104.28 99.12 101.43 15 茚并[1，2，3.cd]芘 98.41 101.16 94.12 97.89 16 二苯并[a，h]蒽 96.12 98.41 91.48 95.34 17 苯并[g，h，i]芘 89.92 92.72 86.28 89.64 结论 本方法采用岛津 GCMS-TQ8050 检测中药材中的18种多环芳烃，在5~200 pg/L 浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数均在0.999以上，检出限在0.06~1.01 ug/kg。5 ug/L 标准品溶液连续进样6针，峰面积 RSD%均小于5%，精密度良好，在0.05 ug/g 加标水平下，各组分平均回收率在 85.98-109.32%之间，该方法简单准确，灵敏度高，能够有效的检测中药材中多环芳烃的含量。 利用岛津公司的GCMS-TQ8050三重四极杆气质联用仪，建立了一种中药材中18种多环芳烃的测定方法。样品经正己烷+丙酮超声提取，经固相萃取柱净化，用GCMSMS检测。在5~200 µg/L浓度范围内各组分线性关系良好，各组分相关系数均达到0.999以上，检出限在0.06~1.01 µg/kg之间。5 µg/L标准品溶液连续进样6针，各组分峰面积RSD%均小于5%。该方法简便快速，能够有效检测中药材中多环芳烃的含量。