决明子中35个禁用农药残留物检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-446Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-211 GC-MS/MS 法测定中药材决明子中35个农药残留物 GCMSMS-211 摘要：本文采用岛津三重四极杆气质联用仪 GCMS-TQ8040 NX 建立了中药材决明子中35个农药残留物的检测方法。在2~40 ug/L(以对硫磷计)的浓度范围，各化合物线性关系良好，相关系数均大于 0.9983。对空白决明子进行 10~25 ug/kg的加标，35个农药残留物的回收率在57%~114%之间。本方法操作简单、灵敏度高，完全满足《中国药典》2020年版规定的药材及饮片(植物类)|中禁用农药残留物的准确测定。 《中国药典》2020年版已于2020年12月30日正式实施。为了有效控制外源性污染物对中药安全性造成的影响，国家药典委员会对《0212药材与饮片检定通则》进行修订。0212 通则最显著的变化是首次收载33种禁用农药残留检测项目，规定了禁用农药不得检出(低于定量限)，并给出具体的检测方法，形成整体检验标准，对中药安全性控制提出了更高的要求。 33种禁用农药在中药材中以母体或代谢物形式存在，因此需要同时检测的母体和代谢物共55个。通则《2341农药残留量测定法》中增加了第五法“药材及饮片(植物类)中禁用农药多残留测定法”，该法中 实验部分 1.1仪器 GCMS-TQ8040 NX 三重四极杆气相色谱质谱联用仪 1.2分析条件 色谱柱： SH-Rxi-17Sil MS， 30 m×0.25 mm×0.25 um 柱温程序：60℃(1min)_10℃ /min_160℃_2℃/ min_230℃_15℃/min_300℃ (6 min) 进样口温度：250℃ 进样方式：不分流进样 进样时间：1min GC-MS/MS 法测定的农药残留物共有35个。 决明子为豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子，味甘、苦、咸，性微寒，具有清热明目、润肠通便的功能，用于目赤涩痛，羞明多泪，头痛眩晕，目暗不明等。 本文采用岛津 GCMS-TQ8040 NX 三重四极杆气相色谱质谱联用仪，选用《2341农药残留量测定法》第五法的4.1直接提取法结合4.3固相萃取法方式一作为前处理方法，建立了中药材决明子中35个农药残留物测定的 MRM 方法。该方法灵敏度高，重复性好，完全满足《中国药典》2020年版规定的药材及饮片(植物类)中禁用农药残留量的准确测定。 载气控制方式：恒压力，146 KPa |进样量：1pL 离子化方式：E 离子源温度：250℃ 接口温度：250℃ 检测器电压：调谐电压+0.7kV 采集模式：MRM，参数见表1 样品前处理 结果与讨论 3.1标准品图谱 决明子基质中35个农药残留物和磷酸三苯酯混标溶液 MRM 总离子流图如图1所示，各化合物信息见表1。使用决明子空白基质配制浓度为 2~5 ug/L的农药残留物标准溶液(决明子中禁用农药残留物含量为0.002~0.005 mg/kg)，此浓度约为《0212药材和饮片检定通则》规定限值的1/10，农药组分的 MRM 质量色谱图如图2所示。 图1 35个农药残留物和磷酸三苯酯混标溶液 MRM 总离子流图(10~25 ug/L) 表1 35 个农药残留物和内标磷酸三苯酯的保留时间及 MRM条件设置 NO. 化合物名称 英文名称 保留时间(min) CAS 号 特征离子对 碰撞电压(CE) 内吸磷 -O demeton(O) 11.897 8065-48-3 88.0>60.0 4 88.0>59.0 20 2 灭线磷 Ethoprophos 12.878 13194-48-4 199.7>157.8 5 157.8>96.7 20 3 杀虫脒 13.614 6164-98-3 chlordimeform 152.0>117.0 15 free base 196.0>181.0 5 No. 化合物名称 英文名称 保留时间(min) CAS号 特征离子对 碰撞电压 (CE) 23 a-硫丹 alpha-Endosul- fan 30.148 959-98-8 240.8>205.6 194.8>159.0 15 10 24 氟虫腈砜 fipronil-sulfone 32.073 120068-36-2 383.0>255.0 20 383.0>213.0 32 25 狄氏剂 Dieldrin 32.897 60-57-1 276.8>240.7 10 263.0>193.0 35 26 4，4'-滴滴伊 P，p'-DDE 32.913 72-55-9 246.0>176.0 30 316.0>246.0 25 27 苯线磷 Fenamiphos 34.648 22224-92-6 303.1>122.0 20 303.1>154.0 30 28 甲基硫环磷 phosfolan-meth- 35.558 5120-23-0 227.0>92.0 10 227.0>60.0 30 29 除草醚 Nitrofen 37.404 1836-75-5 201.8>138.7 28 282.8>201.8 15 30 2，4'-滴滴涕 o，p'-DDT 37.403 789-02-6 235.0>165.0 25 237.0>165.0 25 31 4，4'-滴滴滴 P，p'-DDD 38.407 72-54-8 235.0>165.0 25 237.0>165.0 25 32 3-充丹 beta-Endosulfan 38.503 33213-65-9 194.8>159.0 10 194.8>124.7 30 33 4，4'-滴滴涕 P，p'-DDT 40.773 50-29-3 235.0>165.0 25 237.0>165.0 25 34 硫丹硫酸酯 Endosulfan sul- fate 42.682 1031-07-8 271.8>236.7 15 273.8>238.9 15 35 磷酸三苯酯 Triphenyl phos- 44.639 115-86-6 326.0>233.0 10 (内标) phate 326.0>215.0 25 36 蝇毒磷 Coumaphos 48.356 56-72-4 361.8>109.0 16 361.8>225.8 14 Q181.00>145.00(+) 7.09e2 1.0e4 7.5e3 5.0e3 2.5e3 0.0e0- 15.0 RT 治螟磷 甲拌磷 4，4'-滴滴涕 硫丹硫酸酯 图2 决明子空白基质加标部分农药组分质量色谱图(农药组分浓度2~5 ug/L) 3.2标准曲线 使用决明子空白基质配制农药混合标准溶液，浓度范围为2~40 ug/L(以对硫磷计)，每1mL标准溶液加入 0.3 mL 浓度为 0.1 ug/mL磷酸三苯酯作为内标，取1uL进样。以目标农药与内标浓度比为横坐标，峰面积比为纵坐标，制作内标曲线。各农药残留物内标曲线如图3所示，各组分标准曲线线性相关系数见表2。 图 3 决明子基质中部分农药组分标准曲线 3.3检出限及重复性 根据决明子基质混合标准溶液(2~5ug/L) 数据，1，以3倍信噪比(峰至峰)计算各组分检出限。决明子基质混合标准溶液(2~5ug/L) 重复测定6次，考察仪器重复性。各组分检出限及重复性见表2。 表2 35个农药残留物线性相关系数、检出限及重复性数据 3.4样品加标回收率 平行取决明子空白样品3份，添加35个农药残留物混合标准品，各组分浓度为10~25 ug/kg。按照上述前处理步骤处理，取1uL进样，考察方法的回收率。样品加标回收结果见表 3. 表3 样品加标回收结果 No. 化合物名称 加标浓度 (ug/kg) 平均回收率 (%) No. 化合物名称 加标浓度 (ug/kg) 平均回收率 (%) 1 内吸磷-0 10 89.62 19 对硫磷 10 91.42 2 灭线磷 10 88.46 20 p，p'-三氯杀螨醇 25 86.50 3 杀虫脒 10 57.65 21 甲基异柳磷 10 102.9 4 治螟磷 10 85.27 22 水胺硫磷 25 114.8 5 甲拌磷 10 85.95 23 a-硫丹 25 89.05 6 a-六六六 25 88.80 24 氟虫腈砜 10 89.10 7 特丁硫磷 10 99.44 25 狄氏剂 25 91.69 8 内吸磷-S 10 90.00 26 4，4'-滴滴伊 25 85.55 9 v-六六六 25 88.52 27 苯线磷 10 94.09 10 久效磷 15 103.4 28 甲基硫环磷 15 109.4 11 氟甲腈 10 88.93 29 除草醚 25 111.3 12 B-六六六 25 87.04 30 2，4'-滴滴涕 25 91.20 13 8-六六六 25 83.20 31 4，4'-滴滴滴 25 97.58 14 艾氏剂 25 84.25 32 β-硫丹 25 91.66 15 甲基对硫磷 10 94.14 33 4，4'-滴滴涕 25 93.73 16 o，p'-三氯杀螨醇 25 87.86 34 硫丹硫酸酯 25 97.68 17 氟虫腈亚砜 10 95.16 35 蝇毒磷 25 105.8 18 氟虫腈 10 113.5 3.5样品测定 取市售中药材决明子，按照上述前处理步骤处理，并测定。测定的部分结果如下所示。 图4 决明子样品色谱图 表4 决明子样品测定结果 No. 化合物名称 样品浓度(ug/ kg) No. 化合物名称 样品浓度(ug/ kg) 1 内吸磷-O N.D. 19 对硫磷 N.D. 2 灭线磷 N.D. 20 p，p'-三氯杀螨醇 N.D. 3 杀虫脒 N.D. 21 甲基异柳磷 N.D. 4 治螟磷 N.D. 22 水胺硫磷 N.D. 5 甲拌磷 N.D. 23 a-硫丹 N.D. 6 α-六六六 N.D. 24 氟虫腈砜 N.D. 7 特丁硫磷 N.D. 25 狄氏剂 N.D. 8 内吸磷-S N.D. 26 4，4'-滴滴伊 N.D. 9 y-六六六 N.D. 27 苯线磷 N.D. 10 久效磷 N.D. 28 甲基硫环磷 N.D. 11 氟甲腈 N.D. 29 除草醚 N.D. 12 B-六六六 N.D. 30 2，4'-滴滴涕 N.D. 13 8-六六六 N.D. 31 4，4'-滴滴滴 N.D. 14 艾氏剂 N.D. 32 β-硫丹 N.D. 15 甲基对硫磷 N.D. 33 4，4'-滴滴涕 N.D. 16 o，p'-三氯杀螨醇 N.D. 34 硫丹硫酸酯 N.D. 17 氟虫腈亚砜 N.D. 35 蝇毒磷 N.D. 18 氟虫腈 N.D. 注： N.D.表示未检出 结论 采用岛津 GCMS-TQ8040 NX三重四质杆气质联用仪测定决明子中35个农药残留物。决明子样品采用2341第五法4.1直接提取法结合4.3固相萃取法方式一进行净化，净化效果明显。在2~40 ug/L(以对硫磷计)浓度范围内，35个农药残留物线性良好，线性相关系数大于0.9983；浓度为2~5 ug/L的35个农药残留物的混合标准溶液(基质标液)重复进样6次，各组分峰面积 RSD 均小于 4.41%，精密度良好。空白决明子样品在10~25 ug/kg加标浓度下，35个农药残留物回收率分布在57%~114%之间。该方法完全满足2020年版《中国药典》对禁用农药限量值的要求。 岛津应用云 α- 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：mail： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn 本文采用岛津三重四极杆气质联用仪GCMS-TQ8040   NX建立了中药材决明子中35个农药残留物的检测方法。决明子样品采用2341第五法4.1直接提取法结合4.3固相萃取法方式一进行净化，净化效果明显。在2~40   μg/L（以对硫磷计）浓度范围内，35个农药残留物线性良好，线性相关系数大于0.9983；浓度为2~5   μg/L的35个农药残留物的混合标准溶液（基质标液）重复进样6次，各组分峰面积RSD均小于4.41%，精密度良好。空白决明子样品在10~25   μg/kg加标浓度下，35个农药残留物回收率分布在57%~114%之间。该方法完全满足2020年版《中国药典》对禁用农药限量值的要求。