维生素片中泛酸检测方案(液相色谱仪)

SSL-CA20-182Excellence in Science Excellence in ScienceLC-209 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn 使用 LC-2030 测定保健食品中泛酸含量 LC-209 摘要：本文建立了高效液相色谱法测定保健品中泛酸含量中方法。样品参照国标《GB 5009.210-2016》中的前处理方式，进行提取、上机分析。结果显示泛酸在1.0-32.0 ug/mL浓度范围内具有较好的线性关系，线性相关系数 r> 0.9998，定量限为 0.1 ug/mL。加标回收实验平均回收率为93.5%，连续6次进样保留时间RSD% 为0.11%、峰面积 RSD% 为0.13%，系统精密度良好。 关键词：高效液相色谱法 泛酸 保健食品 泛酸是一种水溶性B族维生素，又名维生素B5，其性质偏酸性并广泛存在于多种食物中故命名为泛酸。泛酸是辅酶A的成分，参与体内脂肪、蛋白质和能量代谢，因此是维持机体健康和生长不可缺少的物质。 泛酸具有制造及更新身体组织、帮助伤口愈合、抵抗传染病、防止疲劳等功效，被广泛用于营养增补剂。 食品安全国家标准《GB 5009.210-2016》中增加 了高效液相色谱方法，适用于对营养素补充剂类保健食品和配方食品中泛酸含量的测定，并对检测限和定量限做了明确的规定。 本实验参照标准中的实验条件，使用岛津一体机Prominence-i LC-2030 液相色谱仪对维生素片中泛酸含量进行测定，结果表明，该方法检测灵敏度高，重复性好，可以满足标准中的检测要求。 实验部分 1.1仪器 岛津一体机 Prominence-i LC-2030 液仪色谱仪(配紫外检测器))。 1.2分析条件 色谱柱： Symmetry C18 (150 mm x 4.6 mm l.D.， 3.5 um) 流动相： A： 0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液； B：乙腈 流速：1.0 mL/min 柱温：28C 检测波长：210nm 进样体积：20uL 洗脱方式：等度洗脱， A： B=96：4 1.3标准品与试剂 标准品：D-泛酸钙(C18H32CalN2018)，于-20℃冰箱保存，备用。 试剂：磷酸二氢钾溶液 (0.02mol/L)：称取2.722g磷酸二氢钾，加入500mL水溶解，用磷酸调节 pH至3.0，用水定容至1000 mL， 用0.45 um 滤膜过滤。 乙腈：色谱级，室温保存。 实验用水：由Milli-Q Plus 水净化系统经去离子水二次净化制得。 样品前处理 提取：称取2.0g粉碎后的维生素片，于50mL锥形瓶中，加入30 mL 40℃温水水声提取20 min，用水定容至刻度。转入离心管，4000 r/min 离心 10 min， 取上清液过0.45 um滤膜，滤液待上机测定。 结果与讨论 3.1标准品溶液色谱图和线性范围 精密量取泛酸标准品适量，用水稀释成浓度为1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 ug/mL 六个浓度的标准溶液，按1.2中的分析条件进行测定，泛酸标准品溶液色谱图如图1所示。 图11标准品溶液色谱图(16.0ug/mL) 以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，采用外标法建立标准曲线，结果如图2所示。所得曲线线性关系良好，线性方程、线性范围、相关系数和检出限见表1。按照10倍信噪比为定量限，将标准样品浓度逐步稀释，在浓度稀释至0.1ug/mL时，信噪比为11.45，以此浓度为定量限。 图2泛酸标准品校准曲线 表1 校准曲线参数 中文名称 标准曲线 相关系数r 线性范围(ug/mL) 定量限(ug/mL) 泛酸 Y=5821.72X-1447.34 0.9998 1.0-32.0 0.1 3.2精密度实验 按照1.2分析条件测定，选择浓度为25 ug/mL的标准品溶液连续进样测定6次，重复性色谱图如图3所示。泛酸的保留时间RSD% 为0.11%；峰面积RSD%为0.12%，结果见表2。精密度实验结果表明，Prominence-iLC-2030 高效液相色谱仪具有良好的精密度。 图3标准品溶液6针重复性色谱图(浓度25ug/mL) 表2 泛酸保留时间和峰面积重复性结果((rn=6) 名称 RSD% 5((25 pg/mL) R.T. Area 泛酸 0.11 0.12 3.3回收率试验 由于维生素片本身有泛酸添加，回收率采用标准添加法计算，称取维生素片样品，加入一定量泛酸标准品，使样品加标浓度C为25.0mg/100 g， 按照2.中所述前处理方式处理3个平行加标样品，然后按1.2中条件进行测试。维生素空白基质样品平行测定两次，检出浓度C。 为 27.59 mg/100 g， 加标样品检测浓度为C_，回收率计算参照以下公式： 回收率计算公式：回收率%=.C1--C×0100% 维生素基质样品色谱图见图4，加标样品的回收色谱图见图5，平均回收率为93.5%，3个平行样重复性结果为0.28%，结果详见表3。 图4 空白样品色谱图 图55加标样品色谱图(加标量25.0 mg/100g) 表3 加标回收率(n=3) 名称 加标样品检测浓度 Ci(mg/100g) 平均回收率% RSD% 51.0 泛酸 51.1 93.5 0.28 50.9 结论 本文采用岛津一体机 Prominence-i LC-2030 高效液相色谱仪，参考《GB 5009.210-2016食品中泛酸的测定》中规定的检测方法，建立了一种测定保健食品中泛酸的检测方法。该方法检测灵敏度高，重复性好，泛酸在1.0-32.0 ug/mL浓度范围内具有较好的线性关系，线性相关系数 r>0.9998，定量限为0.1 ug/mL。加标回收实验平均回收率93.5%，连续6次进样保留时间 RSD% 为 0.11%、峰面积 RSD% 为 0.12%，系统精密度良好。实验表明，该方法完全满足标准中的各项规定，可用于食品中泛酸的检测。 岛津应用云 泛酸是一种水溶性B族维生素，又名维生素B5，其性质偏酸性并广泛存在于多种食物中故命名为泛酸。食品安全国家标准《GB 5009.210-2016》中增加了高效液相色谱方法，适用于对营养素补充剂类保健食品和配方食品中泛酸含量的测定，并对检测限和定量限做了明确的规定。本实验参照标准中的实验条件，使用岛津一体机Prominence-i LC-2030液相色谱仪对维生素片中泛酸含量进行测定，结果表明，该方法检测灵敏度高，重复性好，可以满足标准中的检测要求。