白蛋白中K、Na 和 Zn检测方案(原子吸收光谱)

使用火焰原子吸收光谱测定白蛋白中的K、Na 和 Zn 应用简报 标识符区域 作者 前言 Carmen Dews 白蛋白是一种可溶性较高的蛋白质，在体内具有多种功能。尽管白蛋白可作为药物、金属、脂肪酸、激素和酶的转运蛋白，而它的主要作用是维持血浆渗透压。钠是细胞外液中的一种主要阳离子，参与多种生理功能。钾是人体内已发现的主要细胞内阳离子。细胞内液和细胞外液中的离子浓度通过主动转运机制维持。锌是体细胞生长和酶发挥功能必不可少的元素，在血浆和白蛋白中以痕量浓度存在。 Agilent Technologies 仪器 使用 Agilent 240 FS 双光束原子吸收光谱仪对所有样品进行分析，该仪器的规格如下： 光学元件 .所有反射光学元件均有最佳传输效率 带有硬石英涂层镜的全密封双光束光学元件 带有旋转光束组合镜的单分束器，可获得最大透光率和低噪音 单色器 带有细分驱动器的 Czerny-Turner 0.25 m 焦距单色器，可提高分辨率 1200线/mm的全息光栅 波长范围为 185-900 nm 由计算机控制的波长和狭缝选择，可使每个分析波长自动出峰 .波长重复性为±0.04 nm 或更高 灯控制和电源 .电源以两种模式运行。第一种模式是双灯电源：!：一个用于运行指示灯，另一个用于按顺序自动预热下一个灯。第二种模式为四个灯同时供电，能够对每个样品运行实现快速、连续的多元素测定 用户可选选项可在自动运行结束时使灯保持开启或自动关闭 灯经过电子调制后具有更高的灵敏度和更长的使用寿命 .具有快速自动灯选择功能(传统灯架选择慢)的四个固定灯位，可实现不同样品的快速连续多元素测定 灯直接安装在灯座中，无需防腐蚀夹具、导线和电路接头 背景校正 高速气背景校正器可准确校正背景信号 校正范围为185-425 nm，总吸光度为2.5 带有自动增益衰减的电子调制器，可改善光束平衡 。i带有安全联锁装置的完全可编程火焰控制器 通过 PC设置燃气和助燃气流速 气体控制可瞬间改变气流，以便快速连续运行 空气和一氧化二氮火焰之间可自动切换，每个元件的最佳气体流速也可自动调节和设置。 .独立的点火和熄火按钮 八个安全联锁装置和独立的火焰上挡板和下挡板 雾化室 。外部手动调节撞击球(无需工具)可完全控制灵敏度和原子化干扰 PTFE撞击球适用于包含氢氟酸的应用 撞击球可与空气-乙炔和一氧化二氮-乙炔火焰配套使用 氟化高密度聚乙烯结构能够处理酸、碱和有机溶剂 配有带惰性铂/铱毛细管和 PEEK 文丘里管的可调式雾化器，可耐腐蚀 燃烧器 ( . 专为高固体运行而设计，可最大程度减少积碳和燃 烧器堵塞 ) ( 通用设计，适用于一氧化二氮-乙炔和空气-乙炔 ) PTFE 防腐蚀保护 原子化器安装和调试 原子化器安装机制适用于具有耐腐蚀结构的火焰、氢化物和石墨炉原子吸收系统 ( 燃烧器可完全旋转90度，无需移除火焰挡板或熄灭火焰 ) 材料和试剂 痕量金属级乙酸 l(痕量金属乙酸，冰乙酸 (99.4%)， 购自 Fisher Scientific， USA)和去离子水(电阻18.2MQ，来自 Barnstead， Dubuque， IA， USA) 用于样品和标样前处理。通过稀释多元素储备标样(K、Na 和 Zn， 1000 mg/L， 购自 Inorganic Ventures， Lakewood， NJ USA) 配制标样。储备QC(6020，20 mg/L， 购自 Inorganic Ventures， Lakewood， NJ，USA) 用于校准验证。所有样品、校准标样和 QC均用5%v/v乙酸进行稀释。 样品前处理 校准溶液和 QC溶液的配制如表1所示。白蛋白样品和稀释倍数详情见表2。 表1.校准溶液和QC 溶液 标样名称 元素 浓度(mg/L) 空白 K、Na、Zn 0 标样1 K、Na、Zn 标样2 K、Na、Zn QC1 Na、K QC2 Zn 表2.1样品前处理 样品编号 元素 稀释 LA 05D Na 5000倍 LA 05D K 10倍 LH Na 5000倍 LH Zn 2倍 AHF Na 5000倍 所列出的样品为25%白蛋白(一位客户提供)，用于Agilent 240 FS 分析。本研究所用的样品稀释倍数基于客户提供的K、Na 和Zn 浓度的预估值。 条件 本研究所用的分析条件如表3所示。 表3.原子吸收分析条件 波长(nm) 589.6 766.5 213.9 所用气体 空气/乙炔 空气/乙炔 空气/乙炔 带通(nm) 燃气流速(L/min) 2 2 模式 发射 发射 吸收 D2校正 无 有 重复分析次数 3 3 结果与讨论 表4详细列出了客户提供的样品浓度的原始预估值以及使用 Agilent 240 FS 原子吸收光谱仪获得的样品浓度结果。 表4. 客户提供的预估值和 Agilent 240 FS 光谱仪获得的样品结果 样品编号 元素 浓度(mg/L) 浓度(mg/L) %RSD LA 05D Na 2500-3500 3090 LA 05D K 3-5 4.15 LH Na 3000-4000 3570 LH Zn 0.2-0.5 0.267 AHF Na 2500-3500 3080 几个样品经过加标后，用于验证白蛋白基质检测时的仪器性能。样品 LA 05D 加入0.3 mg/L Na。样品 AHF 加入0.2 mg/LNa。样品 LH加入 0.5 mg/L Zn。加标回收率的结果如下表5所示。重复分析样品 LH中的 Na 和样品 LA05D中的K， 以进一步证明 Agilent 240 FS 的稳定性。 表5. 加标结果和重复分析结果(稀释样品) LA 05D 5000x Na 0.619 LA 05D 5000x Na 的 0.3 ppm Na 0.939 加标样品 加标回收率(%) 106.7 LA 05D 10x K 0.415 LA 05D 10xK重复样品 0.409 LH 5000x Na 0.715 LH 5000x Na 重复样品 0.719 LH 2xZn 0.134 LH 2x Zn 的 0.5 ppm Zn 加标样品 0.635 加标回收率(%) 100.3 AHF 5000x Na 0.615 AHF 5000x Na 的 0.2 ppm Na 加标 0.828 样品 加标回收率(%) 106.4 曲线拟合线性原点 在校准之后和运行结束时对 QC 样品进行分析。QC样品的结果如下表所示。 特征浓度： 0.0050 mg/L 相关系数： 0.9984 表6.QC结果(mg/L) 样品编号 Na K Zn 校准后的QC样品 0.509 0.503 0.199 %回收率 101.8 100.5 99.4 运行结束时的 QC样品 0.517 0.51 0.201 %回收率 103.4 100.8 100.6 校准曲线详情如下图所示，该曲线是线性拟合曲线。 曲线拟合线性原点 特征浓度： 0.0048 mg/L 相关系数： 1.000 0.0000 0.2000 0.4000 0.6000 0.8000 1.0000Overlau Zn mg/L ( 参考文献 ) L. H. J. Lajunen， and P. Peramaki， Spectrochemical Analysis byAtomic Absorption and Emission. Royal Society of Chemistry；Cambridge； 2004 US Department of Health and Human Services， National Institutesof Health website. Available at： www.nih.gov. Accessed 10th July2006 曲线拟合线性原点 特征浓度： 0.0300 mg/L 相关系数 1.000 对低浓度标样 (0.5 mg/L) 进行七次重复分析，并将七次重复分析的标准偏差乘以三来确定方法检测限。方法检测限在表7中列出。 表7.方法检测限 Na 0.008 K 0.009 Zn 0.001 结论 ( 结果表明，对于白蛋白中K、Na 和Zn 的测定， Agilent240 FS 原子吸收系统提供了一种简单有效的解决方案。 该方法已被证明是准确而可重现的。 ) ( QC样品处于真值的±10%以内。加标回收率和重复样 品测定显示的回收率为90%-110%。重复样品之间的回 收率在5%以内。 ) ( 软件提供的菜单设置用于Na、K和 Zn 的分析。所有样品结果均处于预期范围内。 ) 更多信息 有关我们的产品与服务的详细信息，请访问我们的网站 www.agilent.com ◎安捷伦科技(中国)有限公司，20152015年8月21日，中国出版SI-00409CHCN仅限研究使用。不可用于诊断目的。 Agilent Technologies 查找当地的安捷伦客户中心：www.agilent.com/chem/contactus-cn 免费专线： 800-820-3278，400-820-3278(手机用户) 联系我们： LSCA-China_800@agilent.com 在线询价： www.agilent.com/chem/erfq-cn www.agilent.com 安捷伦对本资料可能存在的错误或由于提供、展示或使用本资料所造成的间接损失不承担任何责任。 本资料中的信息、说明和指标如有变更，恕不另行通知。 前言白蛋白是一种可溶性较高的蛋白质，在体内具有多种功能。尽管白蛋白可作为药物、金属、脂肪酸、激素和酶的转运蛋白，而它的主要作用是维持 血浆渗透压。钠是细胞外液中的一种主要阳离子，参与多种生理功能。钾 是人体内已发现的主要细胞内阳离子。细胞内液和细胞外液中的离子浓度通过主动转运机制维持。锌是体细胞生长和酶发挥功能必不可少的元素，在血浆和白蛋白中以痕量浓度存在。结论结果表明，对于白蛋白中 K、Na 和 Zn 的测定，Agilent 240 FS 原子吸收系统提供了一种简单有效的解决方案。该方法已被证明是准确而可重现的。QC 样品处于真值的 ±10% 以内。加标回收率和重复样品测定显示的回收率为 90%-110%。重复样品之间的回收率在 5% 以内。软件提供的菜单设置用于 Na、K 和 Zn 的分析。所有样品结果均处于预期范围内。