血浆中脂溶性维生素ADEK1的检测

1.1仪器、试剂与材料 1.1.1主要仪器设备 液相色谱串联质谱仪(AB SCIEX Triple Quad TM4500)，大气压化学电离(APCI)； 正压装置(Agela Cleanert M96)； 氮吹浓缩仪(Agela Cleanert V96)。1.1.2试剂材料 Cleanert ODS C8 96孔板：S080502-W 屈臣氏蒸馏水，甲醇、甲酸、乙醇均为色谱级。 1.1.3样品基质 5%BSA代替基质，人体血浆质控样本。 3.2样品前处理方法 预处理：200 µL血浆加入400 µL乙醇内标溶液 （0.1%BHT）涡旋， 10000g/5min 离心取上清， 再加入200µL纯水，待净化； 活化：96孔板依次使用 1mL甲醇、1mL水活化； 上样：加载预处理后的血浆至活化后孔板； 淋洗：使用1mL水淋洗孔板； 洗脱：用1 mL乙醇洗脱1次； 浓缩：37℃氮吹干，100µL甲醇复溶，上机。1.3仪器检测条件 1.3.1色谱条件 色谱柱： Kinetex C18（3.0×50 mm, 2.6 μm, 100 Å）；P/N: 00B-4462-Y0 流动相A相：0.1%甲酸水溶液； 流动相B相：0.1%甲酸甲醇溶液； 流 速：0.6 mL/min； 柱 温：40 ℃； 进样量：20 μL1.3.2质谱条件 离子源类型：大气压化学电离（APCI） 扫描方式：多反应监测正负离子模式（MRM） 喷雾针电压：5500 V 离子源温度：500 ℃ 加热器（GS1）：60 psi 辅助加热气（GS2）：60 psi 气帘气（CUR）：40 psi 碰撞气（CAD）：10 psi 为获得较好的稳定性和灵敏度，各化合物监测 离子对的去簇电压（DP）和碰撞电压（CE）， 目标化合物定量离子对以及内标监测离子对等 参数均需经过系统优化。