人血中水溶性维生素的检测

1、前处理过程 固相萃取产品：水溶性维生素专用板 标准品配置过程：标准样品配置方法：预备 1 mg/mL 的各个水溶性维生素标准储备 水溶液 。对于维生素 B2、 B7 和 B9，加入 200μL 1 N NaOH 进行溶解。将维生素 C 溶解在低 pH 的醋酸盐缓冲液中以提高其稳定性。使 用这些单独的储液制成混合储液，具体操作为加入 1.25 mL 维生素C 储液以及其他储液各 0.025 mL，然后用水 稀释至 25 mL。将此混合储液( 50 ppm 维生素C，1 ppm 其他分析物)进一步稀释，得到表 2 所列出的 11 种校准 标准品。（维生素 C 不稳定，需要当天使用当天配置） 样品制备过程：用移液枪准确吸取 100μL 血清样本于 2ml 离心管中，加入 600μL 甲醇、10ul 抗氧化剂涡旋混 合 1min，8000r/min 离心 5min，取上清液待净化。 取水溶性维生素专用板，加入待净化上清液，用正压装 置将板中的样品压下，流速控制在 2~3 秒/滴，待液滴 流尽后继续保持 1min。 浓缩：在 37℃条件下，氮气吹干，用初始比例的流动 相复溶，待检测。2、检测条件2.1 色谱条件 色谱柱： Venusil MP C18（3.0*50 mm, 3μm, 100 Å） 流动相A：10mM 乙酸铵 0.75%甲酸 水 (%) 流动相B：10 mM 乙酸铵 0.75%甲酸甲醇 (%) 流 速：600 μL/min； 柱 温：30 ℃； 进样量：10 μL； 2.2质谱条件 LC-MS/MS：Sciex 4000+ 扫描模式：电喷雾电离正模式采集模式：多反应监测（MRM）