接骨木中芦丁检测方案(液相色谱仪)

【仪电分析】接骨木中芦丁含量分析-高效液相色谱法 接骨木 (Sambucus wlliamsii Hance) 为忍冬科接骨木属植物，又名续骨木、大接骨丹、公道老、扦扦活、马尿骚等。接骨木化学成分复杂，其中芦丁是一种天然的黄酮类成分，是其主要的药用成分之一，具有抗氧化性、抗菌作用、免疫作用、治疗心脑血管疾病等保健功能。仪电分析参照《药典》接骨木中芦丁的液相分析方法，采用配备紫外检测器的 LC220高效液相色谱仪，对接骨木中有效成分芦丁进行测定。 一、方法原理 以主要的有效物质芦丁为目标物，芦丁的检测波长为 257nm。以芦丁标准准液定性，配制系列浓度绘制标准曲线，处理后的样品过色谱柱后各组分得到分离，峰面积外标法定量。 二、主要仪器和试剂 a. LC220高效液相色谱仪，配紫外检测器； b. AS2000 液相自动进样器； c.蒸发回流装置； d.万分之一天平； e.芦丁分析标准品； f.甲醇，色谱纯； g.醋酸，分析纯； h.实验室常用玻璃仪器。 三、实验方法 3.1色谱条件 流动相：：甲醇：0.1%醋酸=40：60； 色谱柱： C18，250mm*4.6mm 5um； 柱温：35℃； 进样量：10pL； 波长：257nm； 流速： 1mL/min。 3.2标准溶液制备 取芦丁标准品适量，精密称定，用甲醇制成每1mL 含 200ug的溶液，即得。 取上述对照品溶液，用甲醇稀释成20、50、80、100、200ug/mL的系列浓度，即得。 3.3供试品溶液制备 取芦丁样品粉末 0.1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加入甲醇50mL，称定重量，加热回流2h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 四、实验结果 4.1标样谱图 芦丁标准溶液图谱如图1所示。 [mV] 图1芦丁标准溶液测试图谱 4.2重复性测试 对同一芦丁标准溶液重复测定7针， RSD%=0.26%，重复性表现良好。 计算已存档：均值与RSD... 标题 组分1->浓度 组分1->面积 样品重复性1 0.0000 1626341.0000 样品重复性 0.0000 1637119.3750 样品重复性] 0.0000 1635775.0000 扫样品重复性 0.0000 1637720.5000 3样品重复性 0.0000 1636452.8750 样品重复性 0.0000 1634579.1250 样品重复性 0.0000 1629983.8750 8 RSD=0.0000 9 10 11 12 图2芦丁标准对照品重复性测试结果 4.3标准曲线 芦丁标准曲线结果如图3，相关系数0.9999，线性表现良好。 图3芦丁标准曲线 4.4样品谱图 [mV] 图4接骨木样品测试图谱 5.结果计算 【仪电分析】接骨木中芦丁含量分析-高效液相色谱法接骨木（Sambucus wlliamsii Hance）为忍冬科接骨木属植物，又名续骨木、大接骨丹、公道老、扦扦活、马尿骚等。接骨木化学成分复杂，其中芦丁是一种天然的黄酮类成分，是其主要的药用成分之一，具有抗氧化性、抗菌作用、免疫作用、治疗心脑血管疾病等保健功能。仪电分析参照《药典》接骨木中芦丁的液相分析方法，采用配备紫外检测器的LC220高效液相色谱仪，对接骨木中有效成分芦丁进行测定。一、方法原理以主要的有效物质芦丁为目标物，芦丁的检测波长为257nm。以芦丁标准溶液定性，配制系列浓度绘制标准曲线，处理后的样品过色谱柱后各组分得到分离，峰面积外标法定量。二、主要仪器和试剂a. LC220高效液相色谱仪，配紫外检测器；b. AS2000液相自动进样器；c. 蒸发回流装置；d. 万分之一天平；e. 芦丁分析标准品；f. 甲醇，色谱纯；g. 醋酸，分析纯；h. 实验室常用玻璃仪器。三、实验方法3.1 色谱条件流动相：甲醇：0.1%醋酸=40:60；色谱柱：C18，250mm*4.6mm 5μm；柱温：35℃；进样量：10μL；波长：257nm；流速：1mL/min。3.2 标准溶液制备取芦丁标准品适量，精密称定，用甲醇制成每1mL含200μg的溶液，即得。取上述对照品溶液，用甲醇稀释成20、50、80、100、200μg/mL的系列浓度，即得。3.3 供试品溶液制备取芦丁样品粉末0.1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加入甲醇50mL，称定重量，加热回流2h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。四、实验结果4.1 标样谱图芦丁标准溶液图谱如图1所示。图1 芦丁标准溶液测试图谱4.2 重复性测试对同一芦丁标准溶液重复测定7针，RSD%=0.26%，重复性表现良好。图2 芦丁标准对照品重复性测试结果4.3 标准曲线芦丁标准曲线结果如图3，相关系数0.9999，线性表现良好。图3 芦丁标准曲线4.4 样品谱图图4 芦丁样品测试图谱4.5 结果计算