三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1检测方案(液相色谱仪)

【仪电分析】三七中人参皂苷及三七皂苷的测定高效液相色谱法 三七属中药五加科，盛产于我国西部云南、广西、西藏等地，用于治疗高血压病、咽痛音哑、津伤口渴等。本实验参考《中国药典2015版第一部》第11页三七标准，采用高效液相色谱法分析三七药材中人参皂苷Rgi、人参皂苷Rbi及三七皂苷R1的含量。 一、方法原理 人参皂苷Rg1、人参皂苷Rbi及三七皂苷Ri的混合标样在流动相的洗脱下分离，用紫外检测器在 203nm 处测定，外标法定量。 二、主要仪器及试剂 a. 高效液相色谱仪： LC220， 配备紫外检测器； b. 万分之一天平； c.超声波清洗机； d. 索式提取器； e.乙腈：：色谱纯； f.对照品。 三、实验方法 3.1色谱参考条件 色谱柱：：Welch C18，150 mmx4.6mmx5pm； 进样量：： 10pL； 流动相：水+乙腈 时间(分钟) 流动相A(乙腈，%) 流动相B(水，%) 0-12 19 81 12-60 19→36 81→64 流速：1.0mL/min； 柱温：室温； 波长：203nm； 3.2对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rgi、人参皂苷Rbi及三七皂苷R1对照品适量。加甲醇制成每 1mL含 0.4mg 人参皂苷Rgi、0.4mg人参皂苷Rbi及 0.1mg三七皂苷Ri的混合溶液，待寺。 四、实验结果 4.1标准工作液色谱图 如图1所示，出峰顺序：三七皂苷Ri、人参皂苷Rg.人参皂苷Rbi -60 -50 40 -30 -10-- --10 12 15 13 21 序号 保留时间名称 峰面积% 峰面积 峰高 半高峰宽峰分离度理论塔板数峰拖尾因子 1 11.619 16.94 334999 22351 14.075 3.22 14023 1.00 2 12.907 47.76 944661 62812 14.124 21.19 17186 1.02 3 21.893 35.3 698075 41422 15.827 0.00 39379 0.99 100 126585 图1标准工作液色谱图 4.2重复性测试 取混合标样连续进样5次，考察其重复性，如图2所示。 混标3个组分中，人参皂苷Rgi、人参皂苷Rbi及三七皂苷Ri的 RSD 分别为0.7%，11.1%，0.6%。 样品1->浓度 样品1--面积 样品2->浓度 样品2--面积 样品3->浓度 样品3--面积 样品总浓度 样品总面积 0.0000 328948.00 0.0000 928534.00 0.0000 702711.50 0.000 1960193.500 0.0000 328777.16 0.0000 949780.56 0.0000 702480.56 0.000 1981038.250 0.0000 327494.03 0.0000 935352.56 0.0000 707907.75 0.000 1970754.375 0.0000 329911.16 0.0000 953812.38 0.0000 711171.00 0.000 1994894.500 0.0000 323991.72 0.0000 945481.69 0.0000 701102.81 0.000 1970576.250 均值=0.000 .406 均值=0.000 均 直=942592 8 均值=0.000 地 5074.688 均值=0.000 1975491.37 RSD=0.000 FSD=0.007 RSD=0.000 RSD=0.011 RSD=0.000 RSD=0.006 RSD=0.000 PSD=0.007    【仪电分析】三七中人参皂苷及三七皂苷的测定       高效液相色谱法三七属中药五加科，盛产于我国西部云南、广西、西藏等地，用于治疗高血压病、咽痛音哑、津伤口渴等。本实验参考《中国药典2015版 第一部》第11页 三七标准，采用高效液相色谱法分析三七药材中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1的含量。一、方法原理 人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1的混合标样在流动相的洗脱下分离，用紫外检测器在203nm处测定，外标法定量。二、主要仪器及试剂a. 高效液相色谱仪： LC220，配备紫外检测器；b. 万分之一天平；c. 超声波清洗机；d. 索式提取器；e. 乙腈：色谱纯；f. 对照品。三、实验方法 3.1 色谱参考条件色谱柱：Welch C18，150 mm×4.6 mm×5μm；进样量：10 μL；流动相：水+乙腈时间（分钟）流动相A（乙腈，%）流动相B（水，%）0-12198112-6019→3681→64流速：1.0 mL/min；柱温：室温；波长：203 nm；3.2 对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1对照品适量。加甲醇制成每1mL含0.4mg人参皂苷Rg1、0.4mg人参皂苷Rb1及0.1mg三七皂苷R1的混合溶液，待测。四、实验结果4.1 标准工作液色谱图如图1所示，出峰顺序：三七皂苷R1、人参皂苷Rg、人参皂苷Rb1 图1 标准工作液色谱图4.2 重复性测试   取混合标样连续进样5次，考察其重复性，如图2所示。混标3个组分中，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1的RSD 分别为0.7%，1.1%，0.6%。