中药菊花是菊科植物菊Cheysanthemum morifolium Ramat的干燥头状花絮。9~11月花盛开时分批采收,阴干或焙干,或熏、蒸后晒干。菊花味苦、甘,性微寒,有散风清热,平肝明目,清热解毒的功效,用于风热感冒,头痛晕眩,目赤肿痛,眼目昏花,疮痈肿毒。仪电分析参照《中华人民共和国药典》2020版中菊花测定要求,使用带紫外检测器的LC220高效液相色谱仪对菊花中绿原酸、木犀草甘和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸三种有效成分进行测定。
【仪电分析】菊花中三种有效成分的测定一高效液相色谱法 中药菊花是菊科植物菊 Cheysanthemum morifolium Ramat 的干燥头状花絮。9~11月花盛开时分批采收,阴干或焙干,或熏、蒸后晒干。菊花味苦、甘,性微寒,有散风清热,平肝明目,清热解毒的功效,用于风热感冒,头痛晕眩,,目赤肿痛,眼目昏花,疮痈肿毒。仪电分析参照《中华人民共和国药典》2020版中菊花测定要求,使用带紫外检测器的 LC220高效液相色谱仪对菊花中绿原酸、木犀草甘和3,5-0-双咖啡酰基奎宁酸三种有效成分进行测定。 一、方法原理 菊花有效成分为绿原酸、木犀草甘和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸,其在348nm 处有较强的紫外吸收。衍生后的样品通过色谱柱后各组分得到分离,用紫外检测器检测,用保留时间定性,峰面积外标法定量。 二、主要仪器和试剂 a. LC220 高效液相色谱仪,带紫外检测器; b. 万分之一天平; C. 超声波水浴; d. 甲醇,色谱纯; e. 乙腈,色谱纯; f. 磷酸,色谱纯。 三、实验方法 3.1对照品溶液的制备 取绿原酸对照品、木犀草苷对照品、3,5-0-双咖啡酰基奎宁酸对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加70%甲醇制成每1mL含绿原酸35 ug, 木犀草苷 25 ug,3,5-0-二咖啡酰基奎宁酸80 ug的混合溶液,,1即得(10℃以下保存)。 3.2供试品溶液的制备 取本品粉末(过一号筛)约0.25 g, 精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加人70%甲醇25ml,l,密塞,称定重量,超声处理(功率300W,频率45 kHz)40分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。 3.3高效液相色谱仪参考条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A, 以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为348 nm。理论板数按3,5-0-二咖啡酰基奎宁酸峰计算应不低于8000。梯度洗脱程序如下表1(因菊花样品中一有机杂质较多,所以40→70 min 为冲洗梯度,,以防影响后面样品出峰): 表1高效液相色谱梯度洗脱程序 时间/min 0~11 11~30 30~40 40~50 50~55 55~70 流动相A% 10→18 18→20 20 20→60 60→10 10 流动相B% 90→82 82→80 80 80→40 40→90 90 四、实验结果 4.1对照品高效液相色谱图 [mV] 图1对照品高效液相色谱图 4.2供试品高效液相色谱图 图2供试品高效液相色谱图 4.3重复性 谱图相叠后重复性很好,目标峰的 RSD 分别为 0.71%、0.69%、0.75%。 图3供试品重复性测试图谱叠放 【仪电分析】菊花中三种有效成分的测定—高效液相色谱法中药菊花是菊科植物菊Cheysanthemum morifolium Ramat的干燥头状花絮。9~11月花盛开时分批采收,阴干或焙干,或熏、蒸后晒干。菊花味苦、甘,性微寒,有散风清热,平肝明目,清热解毒的功效,用于风热感冒,头痛晕眩,目赤肿痛,眼目昏花,疮痈肿毒。仪电分析参照《中华人民共和国药典》2020版中菊花测定要求,使用带紫外检测器的LC220高效液相色谱仪对菊花中绿原酸、木犀草甘和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸三种有效成分进行测定。一、方法原理菊花有效成分为绿原酸、木犀草甘和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸,其在348nm处有较强的紫外吸收。衍生后的样品通过色谱柱后各组分得到分离,用紫外检测器检测,用保留时间定性,峰面积外标法定量。二、主要仪器和试剂 a. LC220高效液相色谱仪,带紫外检测器;b. 万分之一天平;c. 超声波水浴;d. 甲醇,色谱纯;e. 乙腈,色谱纯;f. 磷酸,色谱纯。三、实验方法3.1 对照品溶液的制备取绿原酸对照品、木犀草苷对照品、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加70%甲醇制成每1 mL含绿原酸35 μg,木犀草苷25 μg,3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸80 μg的混合溶液,即得(10℃以下保存)。3.2 供试品溶液的制备取本品粉末(过一号筛)约0.25 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加人70%甲醇25ml,密塞,称定重量,超声处理(功率300 W,频率45 kHz)40分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。3.3 高效液相色谱仪参考条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为348 nm。理论板数按3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸峰计算应不低于8000。梯度洗脱程序如下表1(因菊花样品中一有机杂质较多,所以40→70 min为冲洗梯度,以防影响后面样品出峰):表1 高效液相色谱梯度洗脱程序四、实验结果4.1 对照品高效液相色谱图图1对照品高效液相色谱图4.2 供试品高效液相色谱图图2 供试品高效液相色谱图4.3 重复性谱图相叠后重复性很好,目标峰的RSD分别为0.71%、0.69%、0.75%。图3 供试品重复性测试图谱叠放
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上海仪电分析仪器有限公司为您提供《菊花中绿原酸、木犀草甘和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸检测方案(液相色谱仪)》,该方案主要用于中药材和饮片中含量测定检测,参考标准--,《菊花中绿原酸、木犀草甘和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸检测方案(液相色谱仪)》用到的仪器有上海仪电分析-LC220液相色谱仪(LC)