葛根中葛根素检测方案(液相色谱仪)

【仪电分析】《药典》葛根中葛根素-高效液相色谱法 葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata (Willd.) Ohwi 的干燥根。习称野葛。秋、冬二季采挖，趁鲜切成厚片或小块；干燥。味甘、辛，性凉。归脾、胃、肺经。解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。用于外感发热头疼，项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，眩晕头痛，中风偏瘫，胸痹心痛，酒毒伤中。仪电分析参照《药典》中葛根的液相分析方法，采用配备紫外检测器的 LC220高效液相色谱仪对葛根中葛根素实现了科学准确的定量分析。 一、方法原理 以药典中葛根为参考，葛根素为目标物，葛根素的检测波长为250nm。以葛根素标准溶液定性，处理后的样品过色谱柱后各组分得到分离，峰面积外标法定量。 二、主要仪器和试剂 a. LC220 高效液相色谱仪，配紫外检测器； b. AS2000 液相自动进样器； c.蒸发回流装置； d.万分之一天平； e. 葛根素分析标准品； f.甲醇：色谱纯； g.酒精：优级纯； h.实验室常用玻璃仪器。 三、实验方法 3.1色谱条件 流动相：：甲醇：水=25：75；色谱柱：C18，250mm*4.6mm， 5um；柱温：30℃；进样量：10pL； 波长：250nm。 3.2对照品溶液制备 取葛根素对照品适量，精密称定，加30%乙醇制成每 1mL 含80ug的溶液，即得。 3.3供试品溶液制备 取葛根素 0.025g，置具塞锥形瓶中，加入30%乙醇50mL，称定重量，加热回流 30min，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 四、实验结果 4.1葛根素标准样品 [mV] 4.2标准样品测定重复性(葛根素6针重复性： RSD=0.49%) 标题 组分1->时间 组分1->浓度 组分1->面积 020年07月0： 13.9194 0.0000 3747354.0000 020年07月0： 13.9306 0.0000 3773272.2500 020年07月0： 13.8181 0.0000 3766230.2500 020年07月0： 13.8028 0.0000 3736795.2500 020年07月0： 13.6986 0.0000 3731158.2500 020年07月0： 13.7486 0.0000 3772270.5000 7 8 9 10 11 4.3标准曲线 4.4样品谱图 [mV] 4.5样品测试重复性(样品6针重复性： RSD=0.73%) 标题 组分1->时间 组分1->浓度 组分1->面积 2020年0° 13.9403 0.0000 2584953.2500 2020年0° 13.8736 0.0000 2599433.7500 2020年0° 13.8653 0.0000 2607087.0000 2020年0 13.9819 0.0000 2621826.2500 2020年0° 13.7653 0.0000 2628996.7500 2020年0° 13.7028 0.0000 2634686.5000 7 RSD=0.0076 RSD=0.0000 RSD=0.0073 平均值=13.8549 平均值=0.0000 均值=2612830.750 极大值=13.9819 极大值=0.0000 大值=2634686.500 极小值=13.7028 极小值=0.0000 ：小值=2584953.250 极差值=0.2791 极差值=0.0000 及差值=49733.2500 8 9 10 11 【仪电分析】《药典》葛根中葛根素-高效液相色谱法葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata（Willd.）Ohwi的干燥根。习称野葛。秋、冬二季采挖，趁鲜切成厚片或小块；干燥。味甘、辛，性凉。归脾、胃、肺经。解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。用于外感发热头疼，项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，眩晕头痛，中风偏瘫，胸痹心痛，酒毒伤中。仪电分析参照《药典》中葛根的液相分析方法，采用配备紫外检测器的LC220高效液相色谱仪对葛根中葛根素实现了科学准确的定量分析。一、方法原理以药典中葛根为参考，葛根素为目标物，葛根素的检测波长为250nm。以葛根素标准溶液定性，处理后的样品过色谱柱后各组分得到分离，峰面积外标法定量。二、主要仪器和试剂a. LC220高效液相色谱仪，配紫外检测器；b. AS2000液相自动进样器；c. 蒸发回流装置；d. 万分之一天平；e. 葛根素分析标准品；f. 甲醇：色谱纯；g. 酒精：优级纯；h. 实验室常用玻璃仪器。三、实验方法3.1 色谱条件流动相：甲醇:水=25:75；色谱柱：C18，250mm*4.6mm，5μm；柱温：30℃；进样量：10μL；波长：250nm。3.2 对照品溶液制备取葛根素对照品适量，精密称定，加30%乙醇制成每1mL含80μg的溶液，即得。3.3 供试品溶液制备取葛根素0.025g，置具塞锥形瓶中，加入30%乙醇50mL，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。四、实验结果4.1 葛根素标准样品4.2 标准样品测定重复性（葛根素6针重复性：RSD=0.49%）4.3 标准曲线4.4 样品谱图4.5 样品测试重复性（样品6针重复性：RSD=0.73%）