药品中纯度检测方案(液相色谱仪)

ApplicationNews News岛津SHIMADZUhttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2021年3月400-650-0439 ApplicationNews 高效液相相谱仪NexeralM 双进样系统 同时进行药品纯度试验与定量试验分析 01-00129-CN 秋田知志、寺田英敏 使用益处 使用一台 HPLC 同时进行两种不同的分析，例如，药典中收载的纯度试验和定量试验，可提高分析工作的效率。 在USP<621>中规定的允许范围内改变分析条件，满足标准规定的系统适用性分析要求，由此缩短 USP中规定的 HPLC分析时间并节省溶剂。 前言 美国药典 (United States Pharmacopeia； USP) 和日本药典(Japanese Pharmacopoeia； JP) 等规定了各种项目的分析需要进行纯度试验和定量试验等，以确保药品的质量。即使规定使用HPLC 进行分析，但在很多时候，其中收载的分析条件因分析目的不同而进行多项试验，并要使用多个 HPLC条件分别进行分析。 在本文中，关于“USP43-NF38”中收载的布洛芬的纯度试验(类似物质)和定量试验的分析方法，分析条件变化及其允许范围见 USP General Chapter<621>Chromatography(在本文中称为 USP<621>)，分析速度根据其作了提升。此外，将介绍使用Nexera 双进样系统在两种快速分析条件下同时进行分析的示例。 可同时对两个系统进行分析的Nexera 双进样系统 Nexera 双进样系统有两个独立的流路，分别进样，并同时在不同的条件下对两个系统进行分析。图1所示为流路图。 在本文中，采用 Stream①进行布洛芬的纯度试验，采用Stream ②进行定量试验。 此外，图2所示为本研究中所使用系统的外观。可以按照与单流路LC系统相同的安装面积，同时对两个系统进行分析。 流路①纯度分析 图1Nexera 双进样系统的流路图 图2 Nexera 双进样系统(外观) 提高布洛芬纯度试验分析速度 使用流路①实施了“USP43-NF38”中收载的布洛芬纯度试验。 在 USP<621>规定的允许范围内改变分析条件后缩短了分析时间。 图3所示为对含有布洛芬和苯戊酮(内标物质)的样品进行系统适用性分析的色谱图，分析条件如表1所示，系统适用性试验结果如表2所示。经证实，在USP<621>允许的改变范围内，提高了布洛芬纯度试验分析效率，满足系统适用性试验分离的相关要求。 表1分析条件(纯度试验) 色谱柱 Shim-pack VeloxMC18 (150mm ×3 mml.D.， 2.7 um) 流速 1.8 mL/min 流动相 A： 10 mmol/L 磷酸水溶液(pH 2.5) B：乙腈 A/B=33：67 柱温 35℃ 进样量 1.0pL 样品瓶 岛津 LabTotal'M， LC 1.5 mL， 玻璃” 检测器及检测波长 SPD-M40， 214 nm *1 P/N： 227-32010-04；*2 P/N： 227-34001-01 图3纯度试验系统适用性样品色谱图 表2纯度试验的系统适用性项结果 系统适用性项目 标准 结果 相对保留时间 苯戊酮 (当布洛芬保留时间为1.0时) 0.8 0.9 分辨率 苯戊酮和布洛芬 ≥2.0 9.1 提高布洛芬定量试验分析速度 使用流路②实施了“USP43-NF38”中收载的布洛芬定量试验。 与纯度试验一样，在USP<621>规定的允许改变范围内改变分析条件，缩短了分析时间。 图4所示为对含有布洛芬及其分解物、4-异丁基苯乙酮(USP专论中表示为 Ibuprofen Related Compound C) 和苯戊酮(内标物质)的样品进行分析的色谱图，分析条件如表3所示，系统适用性试验结果如表4所示。经证实，定量试验的分析按照USP<621>提高了分析速度，满系系统适用性试验分离相关要求。 表3分析条件(定量试验) 色谱柱 Shim-packMGIST C18-HP (75mm × 3mmI.D.， 3pm)* 流速 1.0 mL/min A： 1%w/v氯乙酸水溶液 流动相 (用氢氧化铵调至 pH 3.0) B：乙腈 A/B=1：1 柱温 35℃ 进样量 1.0pL 样品瓶 岛津LabTotalM， LC 1.5 mL，玻璃 检测器及检测波长 SPD-40， 254 nm *3 P/N：227-30040-03 图4定量试验系统适用性样品色谱图 表4定量试验的系统适用性项结果 系统适用性项目 标准 结果 相对保留时间 苯戊酮 (当布洛芬保留时间为1.0时) 1.4 1.3 4-异丁基苯乙酮 (当苯戊酮保留时间为1.0时) 1.2 1.2 分辨率 布洛芬和苯戊酮 2.5 5.8 苯戊酮和4-异丁基苯乙酮 ≥2.5 5.8 对称因子 布洛芬 ≤2.5 2.0 苯戊酮 2.5 1.0 苯戊酮和4-异丁基苯乙酮 ≤2.5 1.0 同时进行纯度试验与定量试验 对于加速的纯度试验和定量试验，使用 Nexera 双进样系统同时进行了6次连续分析。 图5所示为纯度试验的色谱图，表5所示为保留时间和峰面积的相对标准偏差。在纯度试验中，重现性未设定系统适用性的标准，但获得了良好的重重性。 同样地，图6所示为定量试验的色谱图，表6所示为关于系统适用性的保留时间和峰面积的相对标准偏差。满足系统适用性标准，获得了良好的重现性。 图5同时分析时的色谱图(纯度试验) 表5同时分析时的重现性(纯度试验) 项目 相对标示偏差(%)n=6 布洛芬 保留时间 0.10 峰面积 0.18 苯戊酮 保留时间 0.08 峰面积 0.18 图6同时分析时的色谱图(定量试验) 表6同时分析时的重现性(定量试验) 系统适用性项目 相对标准偏差(%)n=6 标准 结果 布洛芬 保留时间 ≤2.0 0.09 峰面积 ≤2.0 0.05 苯戊酮 保留时间 ≤2.0 0.07 峰面积 ≤2.0 0.07 4-异丁基苯乙酮 保留时间 ≤2.0 0.07 峰面积 ≤2.0 0.07 |结论 对于“USP43-NF38”中收载的布洛芬纯度试验(类似物质)和定量试验的两种分析方法，根据 USP<621>改变分析条件，可在满足各系统适用性的情况下进行快速分析。 此外，使用 Nexera 双进样系统同时进行布洛芬的纯度试验及定量试验，在加速的分析条件下，获得了良好的分离和重现性结果，同时也可以显著减少分析工作所需的时间。 本文介绍了药典相关分析的同时列举了相关的分析示例，NexeraM双进样系统易于应用于食品和环境等领域中通过 HPLC分析多种目标组分的情况，从而可提高常规分析工作的效率。 Nexera、Shim-pack、Shim-pack Velox 以及 SHIMADZU LabTotal 是株式会社岛津制作所在日本及其他国家的商标。 古 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ( *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ) ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 美国药典（United States Pharmacopeia；USP）和日本药典（Japanese Pharmacopoeia；JP）等规定了各种项目的分析需要进行纯度试验和定量试验等，以确保药品的质量。即使规定使用HPLC进行分析，但在很多时候，其中收载的分析条件因分析目的不同而进行多项试验，并要使用多个HPLC条件分别进行分析。在本文中，关于“USP43-NF38”中收载的布洛芬的纯度试验（类似物质）和定量试验的分析方法，分析条件变化及其允许范围见USP General Chapter<621>Chromatography（在本文中称为USP<621>），分析速度根据其作了提升。此外，将介绍使用Nexera双进样系统在两种快速分析条件下同时进行分析的示例。