美洛昔康中定量分析检测方案(液相色谱仪)

LAAN-A-LC256 ApplicationNNo.L550News用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行日：2019年9月400-650-0439 高效液相色谱法 使用 NexeraTM XR依据美国药典对美洛昔康进行分析 美洛昔康具有可阻断前列腺素合成的活性的作用，用于关节炎等的消炎、镇痛。美国药典(USP)中将使用紫外可见光检测器的 HPLC 法定为美洛昔康的试验方法。 本文使用 exera XR 依据 USP对美洛昔康进行分析，并使用ACTO (分析条件转移与优化)功能对 ProminenceTM 系列仪器进行了分析方法兼容性试验。 T. Yoshioka |系统适用性试验 美洛昔康含量测定的分析条件如表1所示，系统适用性试验的溶液配制方法如表2所示，系统适用性溶液(含量测定)色谱图见图1。美洛昔康杂质A对美洛昔康的相对保留时间为0.6，接近参考值0.7。系统适用性试验(含量测定)结果如表3所示。结果表明，所有项目均满足系统适用性要求。 Column ： Shim-packM GIST C18 (USP code：L1) ：(150mmL. *4.6 mml.D.，5 um) Mode ： Isocratic Mobile phase ： Methanol/solutionA=21/29 Flow rate ： 1 mL/min Column temp. ：45℃ Injection volume ： 10 uL Detection ： PDA detector (360 nm) 表2溶液配制方法(含量测定) Solution A： Mixture of a 0.1% (w/v) solution of ammonium acetate adjusted with10% ammonia solution to a pH of 9.1 Diluent： ( Methanol and 1 N sodi u m hydroxide (250：1) ) System suitability solution： 0.08 mg/mL each of meloxicam and meloxicam related compound A.Prepared by dissolving in 50% of the flask volume of diluent anddiluting with water to volume. Standard solution： 0.2 mg/mL of meloxicam. Prepared by dissolving in 50% of the flaskvolume of diluent and diluting with water to volume. 表3系统用性试验结果(含量测定) Test items Criteria Result Judgement Resolution between meloxicam related compound A and ≥3.0 9.37 Passed meloxicam Tailing factor (meloxicam) ≤ 2.0 1.14 Passed Relative standard deviation of peak area (n=6) ≤2.0% 0.046% Passed 1) Isopropyl-4-hydroxyl-2-methyl-2H-1， 2-benzothiazune-3-carboxylate-1，1-dioxide ( 2) 2 - A mino-5-methyl-thiazole ) 图1系统适用性(含量测定)色谱图 上段：系统适用性试验溶液下段：标准溶液 美洛昔康有关物质的分析条件如表4所示，系统适用性试验的溶液配制方法如表5所示，系统适用性溶液(有关物质)色谱图见图2。美洛昔康杂质B²与美洛昔康杂质A对美洛昔康的相对保留时间分别为0.5、1.3，接近参考值0.4、1.4。系统适用性试验(有关物质)结果如表6所示，结果表明，所有项目均满足系统适用性要求。 表4分析条件(有关物质) Column ： Shim-pack GIST C18 (USP code：L1) ： (150 mmL.*4.6 mml.D.， 5 um) Mode ： High pressure gradient Mobile phase ：A) SolutionA B) Methanol Time program ： 40%B (0 min)=> 40%B (2min)=> 70%B (10min) =>70%B (15 min)=> 40%B (15.01 min)=>40%B (18 min) Flow rate ： 1mL/min Column temp. ： 45℃ Injection volume： 5 pL Detection ： PDA detector (350 nm ，260 nm) 表5溶液配制方法(有关物质) Solution A： 0.1% (w/v) solution of monobasic potassium phosphate adjustedwith 1 N sodium hydroxide to a pH of 6.0 Diluent： Methanol and 1 N sodium hydroxide (50：3) System suitability solution：0.08 mg/mL each of meloxicam、 meloxicam related compound A、and meloxicam B. Prepared by dissolving in 10% of the flask volumeof diluent and diluting with methanol to volume.Standard stock solution：0.6 mg/mL of meloxicam. Prepared by dissolving in 25% of the flaskvolume of diluent and diluting with methanol to volume. Standard solution： 0.012 mg/mL of meloxicam in methanol from standard stock solution. 表6系统适用性试验结果(有关物质) lest items Criteria Result Judgement Resolution between meloxicam and meloxicam related compound A at 350 nm (system suitability solution) ≥3.0 7.18 Passed Resolution between meloxicam and meloxicam related compound B at 260 nm (system ≥3.0 17.6 Passed suitability solution) Relative standard deviation of peak area (n=6) (Standard ≤10% 0.30%(350 nm) Passed solution) 图2系统适用性(有关物质)色谱图上段：系统适用性试验溶液 下段：标准溶液 使用ACTO功能对 Prominence系列的兼容性试验 在梯度分析中，由于不同系列仪器间梯度延迟体积不同，色谱图会出现差异。图3所示为使用 Nexera XR(混合器容量180uL) 与 Prominence(混合器容量0.5、1.6、2.7mL)进行系统适用性试验的色谱图(260nm)对比。由于系统的不同，目标物保留时间也会发生变化。使用LabsolutionsTM 的 ACTO (AnalyticalCondition Transfer and Optimization)功能调节梯度开始时间点，无需更换流路和混合器等部件就可以顺利地完成方法转换。图4所示为 Prominence与使用 ACTO功能的 Nexera XR间兼容性试验结果。结果表明，使用 ACTO功能，不同机型间兼容性良好。这里显示的浓度换算为酸奶原液的浓度。 上段： Nexera XR (梯度开始时间调节后) 下段： Prominence(混合器容量1.7mL) 结论 本实验使用 Nexera XR 依据 USP 对美洛昔康进行了分析，结果表明，系统适用性试验结果符合要求。利用 ACTO 功能对梯度延迟体积较大的系统进行调节，实现快速便捷的分析方法转换。 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ( http：//www.shimadzu.com.cn ) ( *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ) ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 美洛昔康具有可阻断前列腺素合成的活性的作用，用于关节炎等的消炎、镇痛。美国药典（USP）中将使用紫外可见光检测器的HPLC法定为美洛昔康的试验方法。本文使用exera XR依据USP对美洛昔康进行分析，并使用ACTO（分析条件转移与优化）功能对ProminenceTM系列仪器进行了分析方法兼容性试验。