吸附破伤风疫苗&吸附无细胞百白破联合疫苗中铝检测方案(等离子体质谱)

SSL-CA14-758Excellence in Science Excellence in ScienceICPMS-060 上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋 咨询电话：021-34193996 http：//www.shimadzu.com.cnBuilding C801，No.180 Yizhou Road， Shanghai Hotline：021-34193996 |CP-MS测定疫苗铝佐剂中铝的含量 ICPMS-060 摘要：铝佐剂是应用广泛的一种疫苗佐剂，铝佐剂在使用中会存在一定的健康风险，《中国药典》(2015版第三部)中规定了疫苗铝佐剂中铝含量限值范围。利用硝酸溶解试样、电感耦合等离子体质谱法 (ICP-MS)测定了吸附破伤风和吸附百白破联合疫苗铝佐剂中铝的含量。分析结果表明，在0~10mg/L范围，线性相关系数为0.9999，方法检出限为 0.17 mg/L， 加标回收率107~116%之间，该方法可适用于疫苗铝佐剂中铝含量的快速测定。 关键词： ICP-OES 疫苗铝佐剂铝 乳铝佐剂作为疫苗广泛使用的疫苗佐剂，能够起到 部P89)，吸附无细胞百白破联合疫苗氢氧化铝含量为增加弱抗原免疫原性，提高免疫反应的速度，增加持久 1.0~1.5 mg/mL(中国药典2015版第三部P102)。《中性，调节抗体亲和力，特异性及亚单位分布等重要作 国药典》中疫苗铝含量按照通则31065(中国药典2015用。铝佐剂主要包括氢氧化铝和磷酸铝，氢氧化铝成本 片第四部P227)进行检测，使用过量 EDTA-2Na与铝低、使用方便，是生物制品生产中应用最广的一种佐 离子反应，再用锌滴定液滴定剩余 EDTA-2Na 来计算铝剂。由于铝佐剂在使用中会存在一定的健康风险， 《中 含量。通则3106测定过程较繁琐、效率低，本文采用国药典》中要求对铝佐剂疫苗需进行铝含量测定，规定 硝酸溶解试样，电感耦合等离子体发射光谱仪分析疫苗铝含量满足一定的限值要求，如吸附破伤风疫苗要求氢 铝佐剂中铝含量，方法简便快捷，可用于疫苗铝佐剂中氧化铝含量不高于3.0 mg/mL(中国药典2015版第三 铝含量快速检测。 实验部分 1.1对照品 铝标准溶液，浓度1000mg/L；标准溶液，1000mg/L。 1.2实验检材 市售吸附破伤风疫苗，吸附无细胞百白破破合疫苗。 1.3仪器 岛津ICPMS-2030 电感耦合等离子体质谱仪。 1.4试剂 硝酸，优级纯。 方法和结果 2.1对照品溶液配制 用2%硝酸将标准溶液稀释为0、1、2、5、10 mg/L的标准序列。 2.2样品的处理方法 准确量取100 uL疫苗样品于塑料离心管中，加入2mL 10% HNOs，使试样完全溶解，纯水定容至10mL， 同时做空白和加标试验。 2.3仪器条件 仪器分析条件见表 1。 表1 ICP-MS分析条件 参 数 参数设定 参 数 参数设定 高频功率： 1.20 kW 等离子体气流速： 8.0L/min 辅助气流速： 1.10 L/min 载 气 流 速 ： 0.70L/min 炬管类型： Mini炬管 雾 化器 类 型 同轴 雾 化室： 旋流 雾 化室温 度 ：： 5℃ 采样 深度： 5.0mm 高 频 频 率 ： 27.12MHz 结果与讨论 3.1标准曲线和谱峰轮廓图 以(Sc)为内标依次测定标准序列及样品，标准曲线线性和谱峰轮廓图见图1、图2，线性相关系数r=0.9999。 图1铝标准曲线线性图 图2铝谱峰轮廓图 3.2检出限 以方法空白溶液连续测定7次，计算方法检出限，限取样量100uL定容到10mL计算，得到该方法的检出限(MDL)为 0.17 mg/L。 3.3方法准确性 分别取两份破伤风和百白破疫苗，按照前处理程序处理后 ICP-MS测定，测定结果见表2，相对标准偏差 (RSD)为1.10%~1.83%，两批次吸附破伤风和吸附无细胞百白破疫苗中氢氧化铝含量检测结果满足中国药典限值要求。加标回收试验结果见表3，回收率为107~116%，回收率良好。 表2疫苗铝佐剂测定结果 样品 测定值 样品结果 平均值 RSD 药典氢氧化铝限值范围 Al(mg/L) Al(OH)3(mg/mL) (mg/mL) (%) (mg/mL) 破伤风疫苗 6.44 6.30 1.88 1.84 1.86 1.10 ≤3.0 百白破疫苗 4.29 1.25 1.27 1.83 1.0~1.5 4.45 1.30 表3样品加标测试结果 样品 样品测试结果 加标量 加标测试结果 回收率 (mg/L) (mg/L) (mg/L) (%) 破伤风疫苗 6.37 2 8.50 107 百白破疫苗 4.37 2 6.68 116 结论 使用岛津公司ICPMS-2030电感耦合等离子体质谱仪测定了疫苗铝佐剂中铝元素含量，加标回收率107~116%。该方法具有灵敏度高、精密度好、分析速度快、操作简单等特点，可满足疫苗中铝佐剂铝含量检测需求。 岛津企业管理(中国)有限公司分析中心Shimadzu(China)CO.，LTD. Analytical Applications Center 铝佐剂是应用广泛的一种疫苗佐剂，铝佐剂在使用中会存在一定的健康风险，《中国药典》（2015版第三部）中规定了疫苗铝佐剂中铝含量限值范围，如吸附破伤风疫苗要求氢氧化铝含量不高于3.0 mg/mL，吸附无细胞百白破联合疫苗氢氧化铝含量为1.0~1.5 mg/mL。利用硝酸溶解试样、电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定了吸附破伤风和吸附百白破联合疫苗铝佐剂中铝的含量。分析结果表明，在0~10 mg/L范围，线性相关系数为0.9999，方法检出限为0.17 mg/L，加标回收率107~116%之间，该方法可适用于疫苗铝佐剂中铝含量的快速测定。