党参中氟乐灵检测方案(气质联用仪)

SSL-CA14-176Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-081 咨询电话：021-22013542上海市淮海每路570号红坊E楼http：//www.shimadzu.com.cn GPC-GC-MS/MS 法测定中药材中农药残留含量 GCMSMS-081 摘要：本文利用岛津 GPC-GCMS-TQ8040 三重四极杆气质联用仪建立了 GPC-GC-MS/MS 测定2015版《中国药典》通则2341中规定的74种农药残留的方法。在1~50 ug/L浓度范围内建立内标曲线，线性关系良好，相关系数r均大于 0.995。该方法适用于2015版药典中对中药材中农药残留量的快速定量测定。 关键词： GPC-GC-MS/MS 中药材有机磷类农药有机氯类农药拟除虫菊酯类农药 《中国药典》不仅是保证药品质量、保障人民群众用药安全、有效、稳定、质量可控的技术法典，也是药品研究、生产、经营、使用和监管的法定依据。与2010版药典相比，2015版药典在收载品种数上有较大增幅，在整体构架上也有较大调整，主要表现在将2010版三部的附录凡例、制剂通则、分析方法指导原则等三合一，独立成卷作为第四部，制定了统一的技术要求。 串联质谱法涉及74种农药(不含2种气代内标)，并规定了检出限范围5~25 ng/g。 新版药典不但对中药收录的品种有所增加，而且从整体上进一步提升了对药品质量控制的要求。关于中药材中农药残留，通则2431《农药残留量测定法》中规定了中药材中农药残留量的测定方法，包括气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法。其中气相色谱- 相较于药典方法中采用的 GC-MS/MS，本文采用了GPC-GC-MS/MS 对党参基质的样品进行了检测。采用GPC作为前端净化设备，对于中药这种基质复杂的样品，可有效的净化基质中包含的色素、脂肪等物质，减少干扰。此外 GPC+PTV 进样可增大进样量，提高检测灵敏度。检测结果表明，大部分待测组分的检出限低于1 ug/L，RSD 低于10%。该方法满足新版药典对中药材中农药残留含量测定的要求。 实验部分 1.1仪器 进样方式：不分流进样 仪器：GPC-GCMS-TQ8040 三重四极杆气质联用仪 1.2分析条件 进样口温度：120℃(5min)_100℃ /min 250℃ (33.7min) GC-MS/MS 参数： 离子源温度：200℃ ( 色谱柱： In e rtCap-5MS/NP， 3 0 mx0.25 mmx0.25 1um ) 接口温度：300℃ 采集模式： EI-MRM ( 柱温程序：82℃ ( 5 min)_8℃ /min _300℃(7.75 min)载气控制压力：120kpa(0 min) 100 kpa/min 180 ) 检测器电压：调谐电压+0.6 kv ( 农药组分 MRM 采集条件见表1 ) ( kpa(4.4 min)_ - 49.8 kpa/min_ 1 20 kpa(33.8 min) ) 表1 农药组分保留时间及MRM参数 GCMSMS-081 GCMSMS-081 64 29.01 甲氰菊酯 Fenpropathrin 39515-41-8 265.1>210.1 265.1>172.1 (12) (14) 65 28.97 甲氧滴滴涕 Methoxychlor 72-43-5 227.1>169.1 227.1>212.1 (24) (14) 66 29.47 苯醚菊酯 Phenothrin 26002-80-2 183.1>168.1 183.1>153.1 (14) (14) 67 29.87. 氯氟氰菊酯 Cyhalothrin-1，2 68085-85 -8 197.0>161.0 197.0>141.0 30.12 -1，2 (8) (12) 68 30.32 氟丙菊酯 Acrinathrin 101007-06-1 289.1>93.0 289.1>77.0 (14) (26) 69 30.11 灭蚁灵 Mirex 2385-85-5 272.>237 270>235 (15) (5) 70 31.08. 氯菊酯-1，2 Permethrin-1.2 52645-53-1 183.1>168.1 183.1>165.1 31.24 (14) (14) 31.82. 71 31.94. 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin-1，2，3，4 68359-37-5 226.1>206.1 226.1>199.1 32.05. -1，2，3，4 (14) (6) 32.08 32.24. 72 32.35. 氯氰菊酯 Cypermethrin-1，2，3， 52315-07-8 181.1>152.1 181.1>127.1 32.47. -1，2，3，4 4 (22) (22) 32.50 32.52. 氟氰戊菊酯 199.1>157.1 199.1>107.1 73 32.77 -1，2 Flucythrinate-1，2 70124-77-5 (10) (22) 372.1>299.1 372.1>272.1 74 32.47 喹禾灵 Quizalofop-ethyl 76578-14-8 (14) (10) 75 33.56. 氰戊菊酯-1，2 Fenvalerate-1.2 51630-58-1 419.1>225.1 419.1>167.1 33.86 (6) (12) 76 34.39. 溴氰菊酯-1，2 Deltamethrin-1.2 52918-63-5 252.9>93.0 252.9>171.9 34.75 (20) (8) 1.3样品前处理 结果与讨论 2.1标准样品谱图 混标溶液 MRM 图如图1所示。 (x1，000，000) 图1标样的MRM图(50pg/L) 2.2标准曲线 使用基质空白配制农药混合标准系列，浓度分别为1、2、5、10、20、50 ug/L。以浓度比为横坐标，峰面积比为纵坐标，制作内标曲线。因篇幅所限，部分农药组分内标曲线如图2所示，各组分内标曲线相关系数见表2。 图2部分组分标准曲线 2.3检出限及重复性 根据1 ug/L 标准溶液数据，计算方法检出限(3倍噪声计算)， 5 ug/L 标准溶液重复测定6次，测定仪器重复性。因篇幅所限，部分农药组分 MRM 图(1 ug/L)如图3所示。各组分相关系数、检出限及重复性见表2。 图3部分农药组分MRM图(1pg/L) 表2；相关系数及检出限 No. 化合物名称 相关 LOD RSD% No. 化合物名称 相关系数 LOD RSD% 系数 (ug/L) (n=6) (ug/L) (n=6) 敌敌畏 0.9996 0.01 3.73 39 氧化氯丹 0.9952 0.14 9.53 2 四氯硝基苯 0.9999 0.01 6.97 40 环氧七氯B 异构体 0.9992 0.03 7.99 3 二苯胺 0.9984 0.03 3.88 41 环氧七氯 A异构体 0.9957 0.65 9.80 4 氟乐灵 0.9990 0.01 3.72 42 腐霉利 0.9998 0.02 7.67 5 杀虫脒 0.9994 0.10 2.31 43 三唑醇 0.9989 0.42 8.42 6 alpha-六六六 0.9995 0.01 4.60 44 哌草丹 0.9998 0.01 5.50 7 六氯苯 0.9986 0.01 6.53 45 乙基溴硫磷 0.9998 0.01 6.66 8 五氯甲氧基苯 0.9991 0.01 2.77 46 反式氯丹 0.9994 0.01 8.40 9 氯硝胺 0.9996 0.03 7.75 47 o，p'-滴滴伊 0.9999 0.01 4.97 10 气代莠去津 (内标) 1.86 48 氟节胺 0.9989 0.01 3.71 11 五氯硝基苯 0.9998 0.04 8.21 49 顺式氯丹 0.9997 0.01 6.56 12 beta-六六六 0.9995 0.01 5.43 50 a硫丹 0.9981 0.25 8.91 13 特丁硫磷 0.9997 0.07 3.62 51 p，p'-滴滴伊 0.9999 0.01 5.96 14 gamma-六六六 0.9998 0.01 6.75 52 狄氏剂 0.9985 0.43 7.78 15 七氟菊酯 0.9995 0.01 2.68 53 o，p'-滴滴滴 0.9999 0.02 6.37 16 百菌清 0.9993 0.01 5.52 54 溴虫腈 0.9993 0.46 7.76 17 delta-六六六 0.9999 0.01 5.60 55 异狄氏剂 0.9995 0.03 7.70 18 五氯苯胺 0.9999 0.12 6.28 56 除草醚 0.9998 0.03 8.72 19 甲基毒死蜱 0.9999 0.01 3.35 57 β-硫丹 0.9999 0.15 8.62 20 乙烯菌核利 0.9997 0.03 7.63 58 p.p'-滴滴滴 0.9999 0.01 5.27 21 甲基对硫磷 0.9993 0.01 4.40 59 o，p'-滴滴涕 0.9969 0.01 4.81 22 七氯 0.9998 0.01 4.23 60 硫丹硫酸盐 0.9970 0.14 9.75 23 皮蝇磷 0.9998 0.01 4.83 61 p，p'-滴滴涕 0.9995 0.16 6.05 24 八氯二丙醚 0.9994 0.01 3.51 62 联苯菊酯 0.9998 0.05 3.47 25 29 毒死蜱 0.9996 0.01 4.33 67 氯氟氰菊酯 0.9980 0.03 8.96 30 氯酞酸甲酯 0.9997 0.01 6.36 68 氟丙菊酯 0.9973 0.08 7.14 31 氘代倍硫磷 (内标) 一 1.79 69 灭蚁灵 0.9976 0.01 6.17 32 对硫磷 0.9991 0.02 7.80 70 氯菊酯 0.9999 0.74 7.10 33 三唑酮 0.9997 0.13 8.60 71 氟氯氰菊酯 0.9993 0.07 4.38 34 仲丁灵 0.9996 0.02 9.93 72 氯氰菊酯 0.9997 0.02 5.99 35 三氯杀螨醇 0.9994 0.02 7.23 73 氟氰戊菊酯 0.9976 0.33 5.64 36 溴硫磷 0.9997 0.01 8.20 74 喹禾灵 0.9997 0.01 1.65 37 二甲戊乐灵 0.9997 0.02 7.49 75 氰戊菊酯 0.9981 0.11 4.72 38 氟虫腈 0.9984 0.10 9.64 76 溴氰菊酯 0.9992 0.34 8.68 2.4加标回收率 对空白样品进行 5 ng/g 加标回收测试，所得色谱图如图4所示，回收率见表3。 图4]4 5ng/kg加标样品的MRM图 表3 5ng/g加标回收率 结论 采用岛津公司 GPC-GCMS-TQ8040三重四极杆气质联用仪分析2015版‘《中国药典》通则2341中规定的农药组分，方法操作简单，在1~50 pg/L浓度范围内，大部分农药线性良好，相关系数大于0.995，多数组分加标回收率在60%~120%之间，可以应对2015版《中国药典》中对中药材中农药残留量的测定要求。 岛津全球应用技术开发支持中心 2015版药典不但对中药收录的品种有所增加，而且从整体上进一步提升了对药品质量控制的要求。相较于药典方法中采用的GC-MS/MS，作者采用了GPC-GC-MS/MS对党参基质的样品进行了检测。GPC作为前端在线净化设备，对于中药材这类基质复杂的样品，可有效的净化基质中包含的色素、脂肪等物质，减少干扰；同时GPC+PTV进样可增大进样量，提高检测灵敏度。对于痕量物质的定性和定量，GCMSMS的多反应监测模式（MRM）能有效降低背景干扰，具有更高的选择性和分析灵敏度。岛津新型GPC-GCMSMS系统将两者完美结合，检测结果表明，大部分待测组分的检出限低于1µg/L。在5ng/g加标水平下，多数组分加标回收率在60%~120%之间。可以应对2015版《中国药典》中对中药材中农药残留量的测定要求。