黄芪中对硫磷检测方案(气质联用仪)

SSL-CA14-067Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-060 田岛津全球应用技术开发支持中心咨询电话：021-22013542上海市淮海西路570号红坊E楼http：//www.shimadzu.com.cn GC-MS/MS 法测定中药材黄芪中多农药残留 GCMSMS-060 摘要：本文建立了三重四极杆气质联用仪 GC-MS/MS 测定中药材中多农药残留的分析方法。参照药典中方法提取黄芪中残留农药，并进行净化，通过串联质谱的 MRM 方式，有效降低复杂基质干扰及农药组分重叠的相互干扰。在0.005~0.5 mg/L 的浓度范围内，农药的线性相关系数均在为0.999以上，对 0.01 mg/L 的标准溶液连续6针进样，峰面积的RSD%在5%以下。在 0.002 mg/kg 的加标浓度下，加标回收率为 74.46%~124.10%，多数农药的最低检出限为0.001 mg/L以下，完全满足日常监测对中药材黄芪中农药测定要求。 关键词： GC-MS/MS 黄芪农药残留 中药， 是在中国传统医术指导下应用的药物，在中国一直被认为是标本兼治，副作用最小的药物，包括中药材、中药饮片和中成药等。 黄芪，又名绵芪，多年生草本，产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地。药用迄今已有2000多年的历史，其有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用，被广泛用于中药配药处方中。 在栽培过程，中药材往往遭受到多种病虫的危害，直接影响中药材的产量和质量，造成重大经济损失。 实验部分 1.1仪器 三重四极杆气质联用仪： GCMS-TQ8040 1.2分析条件 色谱柱： Rxi-5MS， 30 mx0.25 mmx0.25 um 柱温程序：50℃(1 min)_25℃ /min_125℃_10℃/ min_300℃ (3.5 min) 进样口温度：250℃ 1997年国家中医药局组织有关单位对中药材植保问题开展调研，调研结果认为药用植物病虫害防治是中药材生产中最为薄弱的环节。病虫害种类多、危害重、损失大，由于药农对农药缺乏有关常识，滥用、误用农药问题突出。中药材中的农药残留问题，直接影响人体健康，阻碍中药走向国际市场。 本文利用岛津三重四极杆气质联用仪 GCMS-TQ8030实现了对黄芪中的多种微量农药残留的测定，方法灵敏度高、准确性好。 ( 载气控制方式：恒线速度(47.2 cm/sec) ) 载气：氦气 ( 碰撞气：氩气 ) 检测器电压：调谐电压+0.8 kv 接口温度：250℃ 离子源温度：200℃ 采集方式： MRM 1.3.1试样制备 将样品粉碎，准确称取5g，加入二氯甲烷20mL，浸泡1h，超生萃取 30 min 后 3000 rpm 离心30 min， 取上清浓缩至2mL， 备用。 1.3.2净化 将样品提取液转移到弗罗里土硅土柱上，20 mL正己烷/丙酮(85/15)洗脱，浓缩至1mL，过滤膜，进样分析。 结果讨论 2.17标准谱图 {x1，000，000) 图1农药混标 MRM 图 (50ug/L) 表1多农药MRM参数 No. 化合物名称 CAS 保留时间 定量离子 CE 定性离子 CE 定性离子 CE 1 敌敌畏 62-73-7 5.872 185.00>93.0014 185.00>109.00 14 185.00>63.00 22 2 alpha-六六六 319-84-6 10.604 218.90>182.908 218.90>144.9020 218.90>109.00 28 3 beta-六六六 319-85-7 11.129 218.90>182.90)：8 218.90>144.90 20 218.90>109.00 28 4 五氯硝基苯 82-68-8 11.171 294.80>236.80 16 294.80>264.80 12 294.80>142.90 30 5 gamma-六六六 58-89-9 11.276 218.90>182.90)8 218.90>144.90 20 218.90>109.00 28 6 特丁硫磷 13071-79-9 11.371 231.00>174.90 14 231.00>128.90 26 231.00>202.90 8 7 百菌清 1897-45-6 11.632 265.90>230.8014 265.90>168.0022 265.90>133.00 28 8 delta-六六六 319-86-8 11.856 218.90>182.90 10 218.90>144.90 20 218.90>109.00 28 9 乙烯菌核利 50471-44-8 12.527 285.00>212.0012 285.00>178.0014 285.00>241.00 ：4 10 甲基对硫磷 298-00-0 12.577 263.00>109.00 14 263.00>136.00 8 263.00>246.00 6 11 杀螟硫磷 122-14-5 13.068 277.00>260.00)(6 277.00>109.10 14 277.00>228.0014 12 毒死蜱 2921-88-2 13.371 313.90>257.90 14 313.90>285.90 8 313.90>193.90 28 13 对硫磷 56-38-2 13.528 291.10>109.00 14 291.10>137.00 6 291.10>81.00 24 14 三唑酮 43121-43-3 13.587 208.10>181.0010 208.10>127.0014 208.10>111.0022 15 三氯杀螨醇 0-00-0 13.671 250.00>139.00 14 250.00>215.00 8 250.00>111.00 28 16 氟虫腈 120068-37-3 14.113 366.90>212.90 30 366.90>254.9022 366.90>331.90 14 17 alpha-硫丹 959-98-8 14.887 338.90>160.0018 338.90>266.90 8 338.90>195.90 20 18 p，p-DDE 72-55-9 15.301 246.00>176.00 30 246.00>211.00 )22 246.00>220.00 24 19 beta-硫丹 33213-65-9 16.009 338.90>160.0018 338.90>266.90 8 338.90>195.90 020 20 p，p-DDD 72-54-8 16.096 235.00>165.0024 235.00>199.0014 235.00>99.00 30 21 o，p-DDT 789-02-6 16.13 235.00>165.0024 235.00>199.00 16 235.00>149.0040 22 p，p-DDT 50-29-3 16.795 235.00>165.0024 235.00>199.0016 235.00>149.00 40 23 联苯菊酯 82657-04-3 17.688 181.10>166.1012 181.10>153.10 8 181.10>179.10 )12 24 氯氟氰菊酯-1 68085-85-8 18.5 197.00>161.008 197.00>141.00 12 197.00>91.00 26 25 氯氟氰菊酯-2 68085-85-8 18.669 197.00>161.008 197.00>141.00 12 197.00>91.00 26 26 氯菊酯-1 52645-53-1 19.464 183.10>168.1014 183.10>165.1014 183.10>153.10 )14 27 氯菊酯-2 52645-53-1 19.594 183.10>168.1014 183.10>165.1014 183.10>153.10 14 28 氟氯氰菊酯-1 1 68359-37-5 20.003 226.10>206.1014 226.10>199.10 6 226.10>151.10 28 29 氟氯氰菊酯-2 68359-37-5 20.103 226.10>206.10 14 226.10>199.10 6 226.10>151.10 28 30 氟氯氰菊酯-3 68359-37-5 20.161 226.10>206.1014 226.10>199.10 6 226.10>151.10 28 31 氟氯氰菊酯-4 68359-37-5 20.21 226.10>206.10 14 226.10>199.10 6 226.10>151.10 28 32 氯氰菊酯-1 52315-07-8 20.327 163.10>127.10 )6 163.10>91.00 14 163.10>109.10 22 33 氯氰菊酯-2 52315-07-8 20.431 163.10>127.10 6 163.10>91.00 14 163.10>109.10 22 34 氯氰菊酯-3 52315-07-8 20.48 163.10>127.10 6 163.10>91.00 14 163.10>109.10 22 35 氟氰菊酯-1 70124-77-5 20.494 199.10>157.10 10 199.10>107.10 22 199.10>171.10 8 36 氯氰菊酯-4 52315-07-8 20.529 163.10>127.10 )6 163.10>91.00 14 163.10>109.10 22 37 氟氰菊酯-2 70124-77-5 20.688 199.10>157.1010 199.10>107.10 22 199.10>171.10 8 38 氰戊菊酯-1 51630-58-1 21.205 419.10>225.10 )6 419.10>167.10 12 419.10>125.10 26 39 氰戊菊酯-2 51630-58-1 21.407 419.10>225.10 )6 419.10>167.10 12 419.10>125.10 26 40 溴氰菊酯-1 52918-63-5 21.756 252.90>93.00 20 252.90>171.90 8 252.90>77.00 26 41 溴氰菊酯-2 52919-63-5 21.962 252.90>93.00 20 252.90>171.90 8 252.90>77.00 26 2.2标准曲线 使用黄芪提取基质配制农药混合标准系列，浓度分别为5、10、50、100、500 ug/L。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线。因篇幅所限，部分农药组分标准曲线如下所示，各组分标准曲线相关系数见表2。 Area 2000000 0 Conc. 0 Conc. Conc. 甲基对硫磷 毒死蜱 联苯菊酯 2.3重复性 选取 10 pg/L 农药标准溶液平行6针进样，6次测定峰面积RSD%结果见表2。 2.44回收率试验 选取市售黄芪进行回收率试验。加标浓度为 0.002 mg/kg， 加标回收率在74.46%~124.10%之间，结果见表2。 2.5样品测定结果 选取市售中药材黄芪，依照前处理方法处理并进样分析，结果显示测试农药均未检出，色谱图见图2，定量结果如表2所示。 图2样品 MRM图 表2各组分相关系数、检出限、重复性(n=6)、回收率及测试结果 No. 化合物名称 相关系数 LOD(ug/L) RSD% 回收率(%) 测试结果 1 敌敌畏 0.9999 0.057 1.463 97.808 N.D 2 alpha-六六六 0.9999 0.038 1.154 91.946 N.D 3 beta-六六六 0.9999 0.052 1.454 91.719 N.D 4 五氯硝基苯 0.9999 0.012 1.678 105.387 N.D 5 gamma-六六六 0.9999 0.053 1.709 95.270 N.D 6 特丁硫磷 0.9999 0.042 2.076 105.499 N.D 7 百菌清 0.9999 0.084 2.616 88.976 N.D 8 delta-六六六 0.9999 0.049 2.252 89.387 N.D 9 乙烯菌核利 0.9999 0.098 2.950 92.425 N.D 10 甲基对硫磷 0.9993 0.260 4.762 110.157 N.D 11 杀螟硫磷 0.9993 0.011 3.696 104.298 N.D 12 毒死蜱 0.9999 0.038 2.260 87.910 N.D 13 对硫磷 0.9990 0.028 2.719 122.534 N.D 14 三唑酮 0.9999 0.418 4.237 101.173 N.D 15 三氯杀螨醇 0.9999 0.076 1.767 86.311 N.D 16 氟虫腈 0.9998 0.082 2.503 124.105 N.D 17 alpha-硫丹 0.9995 0.079 3.589 97.567 N.D 18 p，p-DDE 0.9999 0.020 1.510 86.773 N.D 19 beta-硫丹 0.9999 0.878 1.954 76.519 N.D 20 P，p-DDD 0.9990 0.030 1.321 99.207 N.D 21 o，p-DDT 0.9999 0.053 1.755 111.830 N.D 22 p，p-DDT 0.9990 0.025 2.011 74.462 N.D 23 联苯菊酯 0.9992 0.055 0.845 105.677 N.D 24 氯氟氰菊酯-1 0.9995 0.365 4.387 93.815 N.D 25 氯氟氰菊酯-2 0.9999 0.126 4.036 116.764 N.D 26 氯菊酯-1 0.9999 0.740 3.736 110.635 N.D 27 氯菊酯-2 0.9999 0.642 4.349 93.249 N.D 28 氟氯氰菊酯-1 0.9999 0.045 3.571 100.999 N.D 29 氟氯氰菊酯-2 0.9999 0.044 1.269 101.738 N.D 30 氟氯氰菊酯-3 0.9999 0.049 1.408 104.880 N.D 31 氟氯氰菊酯-4 0.9999 0.078 4.891 102.516 N.D 32 氯氰菊酯-1 0.9999 0.031 3.744 101.067 N.D 33 氯氰菊酯-2 0.9999 0.032 4.771 100.814 N.D 34 氯氰菊酯-3 0.9999 0.054 5.019 104.511 N.D 35 氟氰菊酯-1 0.9999 0.617 5.045 118.055 N.D 36 氯氰菊酯-4 0.9996 0.051 2.675 103.894 N.D 37 氟氰菊酯-2 0.9998 0.691 2.203 115.850 N.D 38 氰戊菊酯-1 0.9999 0.048 3.863 114.964 N.D 39 氰戊菊酯-2 0.9999 0.095 3.978 102.240 N.D 40 溴氰菊酯-1 0.9998 0.481 2.550 113.103 N.D 41 溴氰菊酯-2 0.9994 0.523 4.385 111.812 N.D 结论 参照岛津应对2010版中国药典农药残留检测方法，采用岛津公司三重四极杆气相色谱质谱联用仪(GCMS-TQ8040)，针对新版药典农药残留检测项目，建立了测定中药材黄芪中多种农药残留量的方法。该方法操作简单，在 5.0~500.0 ug/L标准曲线范围内线性良好，仪器检出限为 0.011~0.878 ug/L (3倍信噪比计算)，加标回收率为74.46%~124.10%。本方法适合黄芪中多农药残留量的检测。 本文建立了三重四极杆气质联用仪GC-MS/MS测定中药材中多农药残留的分析方法。参照《中国药典（2015 年版）》中方法提取黄芪中残留农药，并进行净化，通过串联质谱的MRM方式，有效降低复杂基质干扰及农药组分重叠的相互串扰。在0.005~0.5mg/L的浓度范围内，农药的线性相关系数均在为0.999以上，对0.01 mg/L的标准溶液连续6针进样，峰面积的RSD%在5%以下。在0.002 mg/kg的加标浓度下，加标回收率为74.46%~124.10%，多数农药的最低检出限为0.001mg/L以下，完全满足日常监测对中药材黄芪及同类型药材中农药测定要求。