依替膦酸钠片中含量测定检测方案(毛细管电泳仪)

。452。中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2009， 40(6) 依替膦酸钠片的毛细管电泳-间接UV法测定 安普丽，蒋 晔*，李海霞 (河北医科大学药学院分析化学教研室，河北石家庄050017) 摘要：建立了高效毛细管电泳-间接紫外吸收检测法测定依替膦酸钠。采用未涂层熔融石英毛细管柱，以7 mmol/L苯甲酸钠-7mmol/L 磷酸二氢钾(pH 8.0)为运行缓冲液，分离电压20kV，检测波长224 nm。依替膦酸钠在62.5~1 000 ug/ml 浓度范围内线性关系良好，检测限为7.82 ug/ml，回收率为98.1%~100.8%， RSD≤1.5%. 关键词：依替膦酸钠；毛细管区带电泳；间接紫外吸收检测；测定 中图分类号：TQ460.7*2；0657.8 文献标志码：A 文章编号：1001-8255(2009)06-0452-03 Determination of Etidronate Disodium by Capillary Electrophoresiswith Indirect UV Detection AN Pu-li， JIANG Ye*， LI Hai-xia (Dept. ofAnalytical Chemistry， Institute of Pharmacy， Hebei Medical University， Shijiazhuang 050017) ABSTRACT： A capillary electrophoresis method with indirect UV detection was established for the determinationof etidronate disodium. An uncoated fused-silica capillary column was used， with the running buffer of 7 mmol/L sodiumbenzoate-7 mmol/L potassium dihydrogen phosphate (pH8.0)， at the applied voltage of 20 kV and detection wavelengthof 224 nm. The calibration curve was linear in the range of 62.5-1 000 ug/ml， with the detection limit of 7.82 ug/ml. Therecoveries of etidronate disodium were 98.1%-100.8%， with the RSDs no more than 1.5%. Key Words： etidronate disodium； capillary zone electrophoresis； indirect UV detection； determination 依替膦酸钠 (etidronate disodium， 1)为二膦酸类药物，主要用于防治骨质疏松症和异位骨化，如佩吉特 (Paget) 病、变形性骨炎、肾结石、恶性高钙血症等。分析采用重量法、络合滴定法21、酸碱电位滴定法[3.4]等。其制剂的质控采用钼蓝比色法5]，有关物质(磷酸盐、亚磷酸)和还原性辅料均干扰测定，专属性差16-8]。配以蒸发光散射检测器9，10]的色谱法专属性好，但需在流动相中加入离子对试剂。毛细管电泳法是分析离子化合物的一种有效手段，但1无吸收基团，无法直接采用UV ( 收稿日期：2009-01-13 ) ( 基金项目：河北省自然基金资 助项 目(C 2 007000792) ) ( 作者简介： 安 普丽(198 3 - ) ，女，硕士研究生，专业方向 ： 药物分析。 ) ( 通信联系人：蒋晔 ( 1961-)， 男 ，教授，硕士生导师，从事药物质 量 研究。 ) ( Tel： 0311-86265623 ) ( E-mail： jiangye@hebmu.edu.cn ) 和荧光检测器检测。本研究以无紫外吸收的1置换有紫外吸收的背景电解质(苯甲酸钠溶液)，获得负吸收峰，建立了高效毛细管电泳-间接UV检测法测定1片。本法简便、快速，可为该药的质控提供参考。 1仪器与试药 CL1020型毛细管电泳仪和紫外检测器(北京彩陆科学仪器有限公司，中国科学院研究院应用化学所)， CT22色谱信号采集器(南京千谱软件公司)。 1对照品(纯度99.5%，河北医科大学生物医学工程中心提供)，1片(成都化学制药厂，规格200 mg/片，批号021115、021116、021117)。苯甲酸钠、磷酸二氢钾、柠檬酸对氨基苯磺酸钠均为分析纯，水为超纯水。 2方法与结果 2.1 电泳条件 毛细管柱(50 umx35cm)，运行缓冲液 7 mmol/L 苯甲酸钠-7 mmol/L 磷酸二氢钾 (pH8.0)；工作电压20kV，电流30~31 uA；进样电压10kV，进样时间5s；柱温室温；检测波长224 nm。 开机后用0.1 mol/L 氢氧化钠溶液、水和运行缓冲液分别冲洗 10 min， 每次进样前分别冲洗3 min。所有溶液在使用前均用0.45 um 微孔滤膜过滤 溶液配制 对照品贮备液：精密称取1对照品约50mg，置 50ml量瓶中，加水溶解并定容，摇匀， 得1 mg/ml 的对照品贮备液。 供试品溶液：精密称取1片细粉适量(约相当于1100 mg)， 置100 ml量瓶中，加水适量，超声溶解并定容，摇匀，用0.45 um微孔滤膜过滤。精密量取续滤液10 ml，置25ml量瓶中，加水定容，摇匀，得400 ug/ml 的供试品溶液。 2.3 系统适用性及专属性试验 辅料、1对照品(375 ug/ml) 和供试品溶液的电泳图见图1.Lo可见，制剂中辅料均不干扰测定。理论板数以1峰计不低于12000，拖尾因子为1.2。 A：辅料，B：1对照品溶液， C：供试品溶液1-1 图11毛细管电泳图谱 2.4 线性试验 精密量取1对照品贮备液适量，分别稀释成1浓度为1000、500、250、125、62.5 ug/ml 的系列浓度溶液，依法进样，记录色谱图。以1峰面积A为纵坐标，浓度c为横坐标，进行线性回归，得回归方程： A=41.46c+310.0(r=0.999 2)。结果表明1在62.5~1000 ug/ml 浓度范围内线性关系良好。 检测限为7.8 ug/ml。 2.5精密度与稳定性试验 取同批供试品溶液，连续进样5次，计算得峰面积的 RSD 小于0.8%。 取同批供试品溶液，分别于配制后0、2、4、8、12、24h进样，计算得峰面积的 RSD 小于1.0%。结果表明1供试品溶液在24h 内稳定。 2.6回收率试验 按处方，分别精密称取1对照品与辅料适量，配成相当于标示量80%、100%、120%的低、中、高浓度溶液，，依法进样，记录色谱图，计算得平均回收率为98.1%~100.8%， RSD均小于1.5%(n=5). 2.7 样品测定 照“2.2”项下方法分别配制3批供试品溶液。另精密量取1对照品贮备液适量，用水稀释制成浓度分别为300和500 ug/ml 的对照品溶液。分别取供试品和对照品溶液进样，以外标两点法测定样品含量。结果3批1片的含量(标示量%)分别为98.9、100.2、99.5， RSD(%)分别为2.5、2.1、2.8。 3 讨论 本研究考察了以不同浓度的邻苯二甲酸氢钾、苯甲酸钠、柠檬酸、对氨基苯磺酸钠作为背景电解质时，方法的灵敏度及对1峰形的影响。结果显示，以7 mmol/L 苯甲酸钠溶液作为检测试剂、检测波长224 nm， 方法灵敏度较高，峰形较好。 1为四元弱酸盐，，不同pH下电离形式不同。本研究设定工作电压20kV，考察了磷酸盐缓冲液浓度(5、7、10、20、50 mmol/L)及不同 pH(6.5、7.0、7.5、8.0、9.0、10.0)对1迁移行为及峰形的影响。结果表明：随着缓冲液浓度的增加，迁移时间增加，峰形变差。pH<8.0，电渗流随pH增加而增强，迁移时间缩短，峰形较好； pH>8.0， 峰形变差，甚至分叉。综合考虑，最终选定磷酸盐缓冲液浓度为 7 mmol/L， pH8.0。 ( 参考文献： ) ( [1] 开玉仁，刘金荣.EHDP含 量 测定的研究[ J ].山东医药工 业，1997，16(2)：17. ) 富马酸福莫特罗有关物质的LC-MS/MS 测定 刘延奎，王 颖，姚西玲 (鲁南制药集团股份有限公司，山东临沂276003) 摘要：建立了 LC-MS/MS 法测定富马酸福莫特罗中的有关物质。采用 C18色谱柱，电喷雾离子源，正离子检测方式，初步推测了富马酸福莫特罗中含量大于0.1%的杂质的化学结构为：2-羟基-5-[1-羟基-2-[2-(4-甲氧基苯)乙氨基]乙基]甲酰苯胺。 关键词：富马酸福莫特罗；有关物质；液相色谱-串联质谱；测定 中图分类号：TQ460.7*2；0657.7*2 文献标志码：A 文章编号：1001-8255(2009)06-0454-03 Determination of Related Substance of Formoterol Fumarate by LC-MS/MS LIU Yan-kui， WANG Ying， YAO Xi-ling (Lunan Pharmaceutical Share Co.，Ltd.， Linyi 276003) ABSTRACT： A LC-MS/MS method was established for the determination of the major related substance informoterol fumarate. A Cig column was used and ESI was applied and operated in positive ion mode. It was speculatedthat the related substance was 2-hydroxy-5-[1-hydroxy-2-[[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amino]ethyl] formanitide. Thecontent was over 0.1%. Key Words： formoterol fumarate； related substance； LC-MS/MS； determination 富马酸福莫特罗 (formoterol， 1)，化学名为2-羟基-5-[(1R*)-1-羟基-2-[[(1R*)-2-(4-甲氧基苯 ( 收稿日期：20 0 9-01- 1 2 ) ( 作者简介：刘延奎 (1 971- ) ， 男， 高 级 工程师 ， 从事新药的研发。 Tel：0539-8336067 ) ( E-mail： lyklyk126@126.com ) ( -666666666666666666666666666666仪6666666-6仪66 ) ( [ 2 ] 徐继红，陈卫民. 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