中药艾叶中脱氧肾上腺素和柚皮素检测方案(毛细管电泳仪)

维普资讯 http：//www.cqvip.comn第25卷第8期2006年8月分析试验室Chinese Journal of Analysis LaboratoryVol.25.No.82006-8 维普资讯http：//www.cqvip.comn分析试验室Chinese Journal of Analysis Laboratory第25卷第8期2006年8月Vol.25.No.82006-8 毛细管电泳法测定中药艾叶中的脱氧肾上腺素和柚皮素 刘海兴*1，刘凤芹2，崔 敏，邹瑞玲，万丽梅' (1.潍坊学院化学化工系，潍坊261061；2.秦皇岛外国语职业学院基础部，秦皇岛 066301) 摘 要：采用毛细管区带电泳法测定了艾叶中的辛弗林和柚皮素。在 30 mmol/LNa，B.0，缓冲溶液(pH10.00)的条件下，实现了被测组分的有效分离。为中药艾叶的质量控制提供了新的方法。 关键词：毛细管电泳；艾叶；脱氧肾上腺素；柚皮素 中图分类号：0657.8 文献标识码：A 文章编号：1000-0720(2006)08-062-03 艾叶具有散寒止痛、温经止血、理气安胎及抗菌、抗病毒的功能。临床上用于治疗消化道肿瘤、肺癌、甲状腺肿瘤以及少腹冷痛、经寒不调、宫冷不孕、吐血等。其中柚皮素具有抗菌、抗炎、抗癌、解痉和利胆作用。目前艾叶中柚皮素的测定未见报道。同时发现其中含有辛弗林。脱氧肾上腺素具有升高血压、抗休克、提高新陈代谢等作用，临床上用于治疗支气管哮喘及手术和麻醉时低血压、虚脱及休克等。毛细管电泳是近些年发展起来的分离分析新技术，以其快速、高效、微量、灵敏度高等特点，在化学、生命科学和药学等领域均有广泛的应用，尤其适合于药物化学成分的分析[2~5]。本文建立了毛细管电泳测定艾叶中脱氧肾上腺素和柚皮素的新方法。 1实验部分 1.1 仪器与试剂 CL1030 高效毛细管电泳仪(北京彩陆仪器有限公司)。HW2000色谱工作站(南京千谱软件公司)。毛细管(内径75 um， 总长60cm，有效长度51 cm， 来自河北永年锐沣色谱器件有限公司)。精密 pH计(上海雷磁仪器厂)。 脱氧肾上腺素、柚皮素购自陕西慧科植物开发有限公司，艾叶购于山东潍坊远东医药有限公司。实验中所用试剂均为分析纯，水为双蒸馏水。 1.2实验方法 实验前，毛细管依次用0.5 mol/L HCl、水、 0.5 mol/L NaOH 溶液、水各冲洗8 min，然后再用缓冲溶液冲洗8 min。在每两次运行之间，毛细管仅用缓冲溶液冲洗 4 min。3次运行之后，毛细管再次用上面的方法清洗。 运行电压为20 kV，紫外检测波长为254 nm(文献报道两种被分析物一般在275 nm 左右处有较强的吸收，但实验发现在常用254 nm 处，两种物质也有较强的吸收，故本实验在254 nm 处进行测定)，实验温度为18℃，重力进样时间为8s(7.5 cm 高度差)。 1.3 样品制备 将艾叶样品研成粉末。准确称取0.3207 g，加入5 mL 95%乙醇， 冷浸24h，过滤并洗涤得5.4mL液体即为艾叶样品溶液。 2 结果与讨论 2.1 缓冲溶液的浓度对脱氧肾上腺素和柚皮素迁移行为的影响 配制了不同浓度的硼砂溶液，在20kV电压下运行脱氧肾上腺素和柚皮素标准溶液，考察硼砂浓度对辛弗林和柚皮素迁移行为的影响。图1表示了两种物质迁移时间与缓冲溶液浓度的关系。由图1可知，随着硼砂浓度的增加，脱氧肾上腺素迁移时间变化不大，而柚皮素的迁移时间略有增加。同时辛弗林与电渗流峰出现位置完全相同。考虑到电渗的稳定性和焦尔热的大小，选择30mmol/L 硼砂溶液作为进一步研究的基础。 图1 硼砂溶液浓度对脱氧肾上腺素和柚皮素迁移时间的影响 Fig.1 Effect of borate concentration on the migration timea-辛弗林；b-柚皮素 2.2 缓冲溶液的pH值对脱氧肾上腺素和柚皮素迁移行为的影响 30 mmol/L Naz B.0，缓冲溶液的 pH由1 mol/LNaOH溶液来调节。试验了缓冲溶液的 pH值对脱氧肾上腺素和柚皮素迁移时间的影响(图2)。由图2可知，随着缓冲溶液 pH 值的增大，脱氧肾上腺素与电渗流峰逐渐拉开。在 pH为10.00时已经非常明显，而且两种物质的峰形也较好，出峰时间也不是太长，与样品中其它成分也获得了有效的分离。所以选择了 pH 为10.00的缓冲溶液进行定量分析。 图2 缓冲溶液的 pH值对脱氧肾上腺素和柚皮素迁移时间的影响 Fig.2 Effect of pH values on the migration timea-乙醇；b-辛弗林；c-柚皮素 2.3 标准曲线 配成不同浓度的脱氧肾上腺素和柚皮素的标准溶液。在上面确定的分析条件下运行各种标准 溶液，每种溶液分别运行3次。以谱图中峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。得到的线性回归方程(峰面积 y/(pV·s)，质量浓度p/(mg/mL)为： 脱氧肾上腺素：y=18.74+476746.71p(r=0.998)，线性范围为：1~0.0625 mg/mL。 柚皮素： y=-18260.98+1377750p(r=0.999)，线性范围为：1.75~0.0273 mg/mL。 2.4 定量分析 在30 mmol/L Na，B.0，缓冲溶液(pH10.00)条件下，运行艾叶样品溶液。典型的艾叶样品溶液电泳谱图如图3所示。溶液运行5次，取平均值。将实验测得的峰面积代人线性方程中，算出浓度，再换算成样品中脱氧肾上腺素和柚皮素的质量分数。脱氧肾上腺素：0.0526 mg/g， RSD=5.6%(n=5)；柚皮素：0.7451 mg/g， RSD=4.9%(n=5)。首次从艾叶中发现脱氧肾上腺素，并测出了其质量分数。 图3 艾叶样品溶液电泳谱图 Fig.3 Electrophorogram of folium artemisiae argyi samplesolution 1-脱氧肾上腺素；2-柚皮素 2.5 回收率 运行3次艾叶样品溶液，测得脱氧肾上腺素和柚皮素的平均回收率分别为98.8%和108.4%。 ( 参考文献 ) ( 邱洁芬，胡遵荣、实用中医药杂志，2003，19(8)：446 ) ( Dexian Wang， G e ngliang Yang， H E nglhardt et al. Ch r om-atographia. 2001， 53(3/4)： 1 85 ) ( [3] LIU Hai-xing， SHI Yu-hua， WANG D e -xian et al. J ofPharmaceutical and Biomedical Analysis， 2003， 32：479 ) [4]LIU Hai-xing， YANG Geng-liang， WANG De-xian et al.5ZHAO Jing-xiang， YANG Geng-liang， LIU Hai-xing et al.Chinese J of Chemistry， 2001， 19(7)： 675Phytochemical analysis， 2002， 13： 222 Determination of synephrine and naringenin in folium artemisiae argyi by capillary electrophoresis LIU Hai-xing*1， LIU Feng-qin’， CUI Min'， ZoU Rui-ling’ and WAN Li-mei(1. Department of chemistry， Wei- fang University， Weifang 261061；2. Department of basic courses， Qinhuangdao Foreign-Language Professional Col-lege， Qinhuangdao 066301)， Fenxi Shiyanshi， 2006， 25(8)： 62~64 Abstract： In this paper， a contents of synephrine and naringenin were determined in Folium Artemisiae Argyi by CEmethod. The optimized experiment condition was 30 mmol/L Borate buffer (pH 10.00)， with the running voltage of 20kV and the UV detector wavelength of 254 nm. The contents of synephrine and naringenin were 0.0526 mg/g， (RSD=5.6%)(n=5) and 0.7451 mg/g， (RSD=4.9%)(n=5). The average recoveries of synephrine and naringeninwere 98.8% and 108.4%(n=3). Keywords： Capillary electrophoresis； Folium artemisial argyi； Synephrine； Naringenin —(