中药材中农药残留检测方案(通用色谱配件)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 引领分析科技尽在北京谱明-企业QQ：40061 65163 GC-MS/MS 法测定中药材中74种农药残留含量 摘要：本文利用岛津 GCMS-TQ8040三重四极杆气质联用仪建立了 GC-MS/MS测定2015版《中国药典》通则2341中规定的74种农药残留的方法。在1~50ug/L 浓度范围内建立内标曲线，线性关系良好，相关系数r均大于0.995。该方法适用于2015版药典中对中药材中农药残留量的快速定量测定。 关键词： GC-MS/MS 中药材有机磷类农药有机氯类农药拟除虫菊酯类农药 自1953年第一部《中国药典》发行以来，中国药典已成为国家监管药品质量的法定技术依据。2014年3月，国家药典委员会发布了关于《中国药典》2015版通则(草案)公开征求意见通知。与2010版药典相比，2015版药典在收载品种数上有较大增幅，在整体构架上也有较大调整，主要表现在将2010版三部的附录凡例、制剂通则、分析方法指导原则等三合一，独立成卷作为第四部，制定了统一的技术要求。 关于中药材中农药残留，通则2431《农药残留量测定法》建立和完善了中药材中农药残留量的测定方法，包括气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法。其中气相色谱-串联质谱法涉及74种农药(不含2种氛代内标)，并规定了检出限范围0.005~0.025mg/kg。 本文采用了GC-MS/MS的MRM多反应监测模式，j，有效降低背景干扰，避免了单四极杆GCMS因为基质干扰导致的定性不准问题，提高了分析灵敏度，大部分待测组分的检出限低于1ug/L。该方法满足新版药典对中药材中农药残留含量测定的要求。 1实验部分 1.1仪器 GCMS-TQ80400三重四极杆气质联用仪 1.2分析条件 GC-MS/MS参数：10℃/min _300℃ (3.5min)色谱柱： InertCap-5ms NP/Sil，接口温度：280℃30mx0.25mmx0.25um离子源温度：200℃进样口温度：250℃碰撞气：氩气进样方式：不分流进样检测器电压：调谐电压+0.6kv进样时间： 1min农药组分MRM采集条件见表1载气控制方式：恒线速度载气线速度：47.2cm/sec柱温程序：50℃(1min) _25℃/min _125℃ 表1.农药组分保留时间及 MRM 参数 65 18.08 甲氧滴滴涕 Methoxychlor 72-43-5 227.1>169.1 227.1>212.1 (24) (14) 66 18.47 苯醚菊酯 Phenothrin 26002-80-2 183.1>168.1 183.1>153.1 (14) (14) 67 18.69. 18.87 氯氟氰菊酯-1，2 Cyhalothrin-1，2 68085-85-8 197.0>161.0(8) 197.0>141.0 (12) 68 19.02 氟丙菊酯 Acrinathrin 101007-06-1 289.1>93.0(14) 289.1>77.0 (26) 69 19.01 灭蚁灵 Mirex 2385-85-5 272.>237(15) 270>235(5) 70 19.71. 氯菊酯-1，2 Permethrin-1，2 52645-53-1 183.1>168.1 183.1>165.1 19.83 (14) (14) 20.24. 71 20.34. 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin-1，2，3，4 68359-37-5 226.1>206.1 226.1>199.1 20.40. -1，2，3，4 (14) (6) 20.45 20.57. 72 20.68. 氯氰菊酯 Cypermethrin-1，2， 52315-07-8 181.1>152.1 181.1>127.1 20.73. -1，2，3，4 3，4 (22) (22) 20.77 73 20.73. 氟氰戊菊酯-1， Flucythrinate-1，2 70124-77-5 199.1>157.1 199.1>107.1 20.93 2 (10) (22) 372.1>299.1 372.1>272.1 74 20.77 喹禾灵 Quizalofop-ethyl 76578-14-8 (14) (10) 419.1>167.1 75 21.47. 21.67 氰戊菊酯-1，2 Fenvalerate-1，2 51630-58-1 419.1>225.1(6) (12) 76 22.05. 22.27 溴氰菊酯-1，2 Deltamethrin-1，2 52918-63-5 252.9>93.0(20) 252.9>171.9(8) 1.3样品前处理 引领分析科技尽在北京谱明-企业QQ：40061 65163 2结果 2.1标准样品谱图 混标溶液(10ug/L)MRM 总离子流谱图如图1所示。部分农药组分(5 ug/L)MRM 质量色谱图如图2所示。 图1.混标溶液 MRM 总离子流谱图(10ug/L) 异狄氏剂 硫丹硫酸盐 灭蚁灵 图2.部分农药组分 MRM 图 (5 ug/L) 2.2标准曲线 使用基质空白配制农药混合标准系列，浓度分别为1、2、5、10、20、50pg/L。以浓度比为横坐标，峰面积比为纵坐标，制作内标曲线。因篇幅所限，部分农药组分内标曲线如下所示，各组分内标曲线相关系数见表2。 图3.部分组分标准曲线 2.3检出限及重复性 根据1ug/L 标准溶液数据，计算方法检出限(3倍噪声计算)，5ug/L 标准溶液重复测定6次，考察仪器重复性。各组分检出限及重复性见表 2。 表2.相关系数及检出限 No. 化合物名称 相关 LOD RSD% No. 化合物名称 相关 LOD RSD% 系数 (ug/L) (n=6) 系数 (ug/L) (n=6) 1 敌敌畏 0.9996 0.03 7.30 39 氧化氯丹 0.9999 0.7 4.15 2 四氯硝基苯 0.9991 0.02 6.95 40 环氧七氯B异 0.9993 0.18 6.16 构体 3 二苯胺 0.9995 0.14 3.70 41 环氧七氯A异 0.9979 0.91 6.63 构体 4 氟乐灵 0.9996 0.03 6.81 42 腐霉利 0.9998 0.06 8.69 5 杀虫脒 0.9996 0.27 7.50 43 三唑醇 0.9980 0.52 6.43 6 alpha-六六六 0.9995 0.02 7.03 44 哌草丹 0.9987 0.09 4.38 7 六氯苯 0.9997 0.02 8.33 45 乙基溴硫磷 0.9985 0.01 7.40 8 五氯甲氧基苯 0.9998 0.02 4.76 46 反式氯丹 0.9991 0.03 2.79 9 氯硝胺 0.9987 0.35 8.98 47 o，p'-滴滴伊 0.9971 0.05 3.58 10 氘代莠去津 (内标) 一 5.49 48 氟节胺 0.9981 0.02 9.76 11 五氯硝基苯 0.9988 0.22 9.09 49 顺式氯丹 0.9989 0.14 5.05 12 beta-六六六 0.9992 0.01 8.30 50 α-硫丹 0.9957 0.95 6.52 13 特丁硫磷 0.9992 0.18 5.57 51 p，p'-滴滴伊 0.9997 0.01 4.56 14 gamma-六六 0.9989 0.01 8.38 52 狄氏剂 0.9991 0.45 6.33 六 15 七氟菊酯 0.9996 0.01 8.12 53 o，p'-滴滴滴 0.9980 0.01 3.36 16 百菌清 0.9953 0.36 8.93 54 溴虫腈 0.9963 0.42 8.96 17 delta-六六六 0.9993 0.07 6.67 55 异狄氏剂 0.9998 1.06 7.39 18 五氯苯胺 0.9996 0.01 8.65 56 除草醚 0.9978 0.06 7.52 19 甲基毒死蜱 0.9990 0.75 7.92 57 β-硫丹 0.9966 0.97 7.92 20 乙烯菌核利 0.9995 0.06 7.32 58 p，p'-滴滴滴 0.9986 0.01 4.85 21 甲基对硫磷 0.9997 0.13 6.37 59 o，p'-滴滴涕 0.9982 0.01 7.25 22 七氯 0.9988 0.03 8.42 60 硫丹硫酸盐 0.9959 0.24 6.29 23 皮蝇磷 0.9988 0.02 4.04 61 p，p'-滴滴涕 0.9995 0.01 8.52 24 八氯二丙醚 0.9989 0.03 10.48 62 联苯菊酯 0.9992 0.05 3.39 25 杀螟硫磷 0.9995 0.11 8.29 63 溴螨酯 0.9989 0.01 2.68 甲基五氯苯基 26 硫醚 0.9995 0.01 9.34 64 甲氰菊酯 0.9961 0.35 3.61 27 苯氟磺胺 0.9951 0.10 6.82 65 甲氧滴滴涕 0.9993 0.95 7.38 28 艾氏剂 0.9995 0.11 9.64 66 苯醚菊酯 0.9977 0.36 4.69 29 毒死蜱 0.9986 0.08 8.88 67 氯氟氰菊酯 0.9955 0.37 8.39 30 氯酞酸甲酯 0.9994 0.02 5.80 68 氟丙菊酯 0.9951 0.49 6.74 氛代倍硫磷 31 (内标) 4.88 69 灭蚁灵 0.9987 0.01 9.55 32 对硫磷 0.9988 0.13 6.85 70 氯菊酯 0.9983 0.69 3.92 33 三唑酮 0.9969 0.69 10.81 71 氟氯氰菊酯 0.9999 0.72 6.74 34 仲丁灵 0.9970 0.07 10.76 72 氯氰菊酯 0.9986 0.76 6.7 35 三氯杀螨醇 0.9996 0.05 8.68 73 氟氰戊菊酯 0.9962 0.89 5.49 36 溴硫磷 0.9988 0.04 4.69 74 喹禾灵 0.9982 0.04 5.67 37 二甲戊灵 0.9992 0.02 8.65 75 氰戊菊酯 0.9980 0.36 8.03 38 氟虫腈 0.9994 0.05 3.49 76 溴氰菊酯 0.9988 0.57 8.11 2.3加标回收率 对空白样品进行 5ng/kg 加标回收测试，所得色谱图如图4所示，回收率见表3. 图4.5ng/kg 加标样品的MRM图 表3.5ng/kg 加标回收率 引领分析科技尽在北京谱明-企业QQ：40061 65163 3结论 采用岛津公司 GCMS-TQ8040三重四极杆气质联用仪分析2015版 《中国药典》通则2341中规定的农药组分，方法操作简单，在1~50pg/L 浓度范围内，大部分农药线性良好，相关系数大于 0.995，加标回收率在60~120%之间，可以应对2015版《中国药典》中对中药材中农药残留量的测定要求。 分析条件GC-MS/MS参数：色谱柱：InertCap-5ms NP/Sil，30m×0.25mm×0.25μm进样口温度：250℃进样方式：不分流进样进样时间：1min载气控制方式：恒线速度载气线速度：47.2cm/sec柱温程序：50℃（1min）_25℃/min _125℃_10℃/min _300（3.5min）接口温度：280℃离子源温度：200℃碰撞气：氩气检测器电压：调谐电压+0.6kv