桑叶中芦丁检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册引领分析科技在北京谱朋企业QQ：40061 65163 中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 桑叶分析 桑叶的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为桑科植物桑Morusalba L.的干燥叶。初霜后采收，除去杂质，晒干。 【功能与主治】疏散风热，清肺润燥，清肝明目。用于风热感冒，肺热燥咳，头晕头痛，目赤昏花。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A， 以0.5%磷酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱。检测波长为358 nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0~5 30 70 5~10 30→35 70→65 10~15 35→40 65→60 15~18 40→50 60→50 对照品溶液的制备：：耳取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备： 取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加甲醇50 mL， 加热回流30分钟， 滤过，滤渣再用甲醇50mL， 同法提取2次，合并滤液。减压回收溶剂，残渣用甲醇溶液，转移至25mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计，含无水芦丁(C27H30O16)不得少于0.10% 桑叶药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中桑叶的含量测定以芦丁为质量评价依据，芦丁在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在358 nm时芦丁吸收均较强，色谱图较好；在流动相组成为乙腈-水溶液系统梯度洗脱时，流动相的比例对芦丁与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，结合文献报道，优化流动相甲醇的梯度洗脱条件为：30%(0~5min)， 30%~40%(5~10min)， 40%~45%(10~15min )， 45%~50%(15~25min) 在此条件下，桑叶的分析时间较短，分离度较好，优于药典方法；考虑到分析时间，采用上述色谱柱，用优化的条件进行分析；柱温对芦丁与相邻色谱峰的分离度影响较小，考虑到分析时间，本次采用40℃对桑叶样品进行分析测定。 桑叶 样品来源：本品为桑科植物桑Morusalba L.的干燥叶。初霜后采收，除去杂质，晒干。产地：四川。 对照品：芦丁(上海同田生物技术有限公司，批号：08072223，含量：95.605%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加甲醇50mL，加热回流30分钟，滤过，滤渣再用甲醇50mL， 同法提取2次，合并滤液。减压回收溶剂，残渣用甲醇溶液，转移至25mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。 引领分析科科在北京谱朋QQ：40061 65163 桑叶 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150mm， 5 pm) 流动相：甲醇-0.5%磷酸溶液系统， 柱温：40℃ 检测波长：358 nm 流速：1.0mL/min 进样量：3uL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6×150 mm，5 pm). 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 CTO-20AC柱温箱CBM-20A系统控制器SIL-20AC 自动进样器 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0~5 30 70 5~10 30→40 70→60 10~15 40-45 60→55 15~25 45→50 55→50 标准样品 实际样品 Detector A358nm (1)桑叶中的芦j (1) 人 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 芦丁 17.733 941838 55092 24713 1.01 芦丁标准曲线 重现性数据如下 峰面积 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品保留时间 峰面秒 1 2 3 17.733 941838 17.577 101859 17.717 940465 17.630 102244 17.654 930703 17.655 100675 AvcrageRSD% 17.701 937668 17.621 101592 0.22 0.80 0.23 0.64 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 浓度mg/L 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱lnertsil ODS-3(4.6 x 150 mm. 5μm)流动相:甲醇-0.5%磷酸溶液系统，柱温: 40℃ 检测波长358 nm 流速1.0 ml/min进样量3μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-4( 4.6 x 150 mm, 5μm)