苦地丁中紫堇灵检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册引领分析科技斗技北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010年版对应高效液相色谱方法图谱库(第一册 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 苦地丁分析 苦地丁的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为罂粟科植物紫堇Corydalis bungeana Turcz.的干燥全草。夏、秋二季花果期采收，除去杂质，晒干。 【功能与主治】清热解毒，散结消肿。用于时疫感冒，咽喉肿痛，疔疮肿痛，痈疽发背，疟腮丹毒。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷完合硅胶为填充剂；以甲醇-0.015mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.7) (取磷酸二氢钾1.58g和磷酸氢二钾0.76g， 加水1000mL溶解，混匀，用氢氧化钠试液调节pH值至6.7)(70：30)为流动相；检测波长为289nm。理论板数按紫堇灵峰计算应不低于6000。 对照品溶液的制备：：精密称取紫紫灵对照品适量，加甲醇制成每1mL含40pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理(功率250W， 频率33kHz) 30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 苦地丁药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中苦地丁的含量测定以紫堇灵为质量评价依据，苦地丁在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：流动相为甲醇-0.015 mol/L磷酸盐缓冲液系统时，流动相的比例对紫堇灵与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，有机相比例在70~65%(v/v)之间均可以获得满意的分离度，优化流动相比例为甲醇-0.015mol/L磷酸盐缓冲液(69：31)；柱温对紫堇灵与相邻色谱峰的分离基本无影响，温度越高紫紫灵保留时间越短，故选用30℃柱温。 经过考察，此条件同样适用于在ODS-4(4.6×250 mm，5um)中对苦地丁进行分析。 苦地丁 ( 样品来源：本品为罂粟科植物紫堇Corydalis bungeana Turcz.的干燥全草 。 产地：河北 ) 对照品：紫堇灵(上海同田生物技术有限公司，批号：09040922，含量：98.79%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取紫堇灵对照品适量，加甲醇制成每1mL含40pg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 u m) 流动相：甲醇-0.015 mol/L磷酸盐缓冲液(69：31) 柱温： 30℃检测波长：289nm 流速：1.0mL/min 进样量： 10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6x150 mm，5 p m) 引领分析科科在北京谱朋QQ：40061 65163 苦地丁 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3 (4.6x150mm，5 pm)流动相：甲醇-0.015mol/L磷酸盐缓冲液(69~73：31~27)柱温：30~40℃检测波长：289nm流速：：11.0 mL/min LC-10ADvp 高压泵 DGU-14A脱气机 SPD-M10Avp二极管阵列紫外可见光半微量检测器 CTO-10ASvp柱温箱 SIL-HTc 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 紫堇灵 25.590 409232 10279 9365 1.08 紫堇灵标准曲线 重现性数据如下 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 2 3 26.526 729809 25.396 137784 26.383 733888 26.336 733192 25.135 137686 25.308 136667 AverageRSD% 26.415 732296 25.279 137379 0.52 0.45 0.37 0.29 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-3 (4.6x150mm, 5um)流动相:甲醇-0.015 mol/L磷酸盐缓冲液(69:31)柱温: 30℃检测波长289nm流速1.0ml/min进样量10μL此条件同样适用于Inertsil ODS-4 (4.6 x 150 mm, 5μm)