单克隆抗体中有效成分含量分析检测方案(液相色谱柱)

东曹LC 数据表No.Bio-009 > TSKgel CM-STAT 色谱柱(阳离子交换色谱法)对鼠腹水纯化而来的单克隆抗体(IgG1)异构体的高分辨率分析 从老鼠腹水中纯化而来的单克隆抗体往往含有一些异构体。即使在 SDS-PAGE 电泳分析中只显示一条带，但当使用等电聚焦电泳时却可以观察到多条带的存在。 TSKgel CM-STAT是一款适合于分析抗体异构体的高分辨率、非多孔、弱阳离子交换色谱柱。在本数据中介绍了使用 TSKgel CM-STAT 色谱柱进行鼠腹水由来的单克隆抗体异构体分析的应用。同时， 我们将通过 TSKgel CM-STAT 色谱柱分离获得的不同组分进一步使用等电聚焦电泳进行了鉴定。结果表明， TSKgel CM-STAT 色谱柱确实适合于异构体的分析，并且可以适用于毫克级别的微量、高分离度的样品制备。 色谱条件 色谱柱 ：TSKgel CM-STAT (4.6mml.D.x10cm) 流动相 ： A ；20mmol/L MES (pH6.0 液相色谱仪：Agilent 1120 Compact LC (gradient auto system) 吸光度[mABU] 色谱条件 ：TSKgel CM-STAT (4.6mml.D.x10cm) ：A； 20mmol/LMES(pH6.0) B； 20mmol/L MES+0. 1mol/LNaCI (pH6.0) 0min 20%B 30min 50%B 30.1min 100%B 35min 100% B 35.1min 20%B 45min 20%B ：1.0mL/min ： UV(280nm) ：25C ：20pL ：2.32g/L ： Mouse monoclonal antibody (from mouse acites，lgG1) ：BioAssist eZ-Auto/C ：人工手动收集 1 2 4 5 6 7 8 9 10 11 等电聚焦电泳