治疗性蛋白的PEG化是一种延长蛋白药物体内半衰期的策略。本数据中,介绍了通过混合N-羟基琥珀酰亚胺酯衍生物(IgG:PEG-NHS = 1:1 到 1:4)将PEG导入抗体,并使用一款分子尺寸排阻、适合蛋白分析的TSKgel G4000SWXL色谱柱进行PEG化分析的应用。
东曹LC 数据表No. Bio-015 TSKgel G4000SWxL 色谱柱(尺寸排阻色谱法)对 PEG 化鼠单抗(IgG1)的分析(PEG 分子量:20K) 治疗性蛋白的 PEG化是一种延长蛋白药物体内半衰期的策略。本数据中,介绍了通过混合N-羟基琥珀酰亚胺酯衍生物(IgG:PEG-NHS= 1:1 到1:4)将PEG导入抗体,并使用一款分子尺寸排阻、适合蛋白分析的 TSKgel G4000SWxL色谱柱进行 PEG 化分析的应用。 min 色谱条件 色谱柱 :TSKgel G4000SWxL(7.8mml.D.x30cm), 2 columns 流动相 : 20mmol/L Phosphate+0.3mol/L NaCI (pH7.0) 流速 :0.25mL/min 检测 : UV(280nm) 温度 :25C 进样体积 :20pL 样品浓度 :0.5g/L 液相色谱仪:Agilent 1120 Compact LC (gradient auto system) PEG化程序: PEG 化反应是在 20mmol/L 磷酸盐缓冲液 +0.3mol/L NaCI (pH7.0)溶液中、4度下进行的。 将PEG-NHS 酯 (SUNBRIGHT ME-200CS, 分子量:20000, NOF公司,日本)/甲醇的摩尔比分别为1、2、4的混合物加入浓度为 5g/L 的抗体溶液,孵化反应17个小时。 取上述100uL的反应溶液,加入900uL 的20mmol/L 磷酸盐缓冲液 +0.3mol/L NaCI (pH7.0)后进样分析测定。 2
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