化妆品中23种防腐剂的测定

 1. 实验部分1.1 实验仪器及耗材Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪；色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm, 4.6×250 mm; P/N: 380-01230-01）；23种防腐剂标准品：23种防腐剂（P/N: 380-03584）SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）； LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）； SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）； SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）； SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。  1.2 混合对照品溶液的配制取23种防腐剂对照品母液，加甲醇稀释至如下浓度，混匀，备用。 序号 标准品 CAS 浓度(μg/mL)（ug/） 1甲基异噻唑啉酮 2682-20-4 30 22-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇 52-51-7 750 34-羟基苯甲酸 99-96-7 100 4甲基氯异噻唑啉酮 26172-55-4 30 5苯甲醇 100-51-6 1500 6苯氧乙醇 122-99-6 1000 7苯甲酸 65-85-0 250 序号 标准品 CAS 浓度(μg/mL)（ug/） 84-羟基苯甲酸甲酯 99-76-3 50 9氯苯甘醚 104-29-0 150 10脱氢乙酸 520-45-6 150 115-溴-5-硝基-1,3-二噁烷 30007-47-7 1250 124-羟基苯甲酸乙酯 120-47-8 125 134-羟基苯甲酸异丙酯 4191-73-5 125 144-羟基苯甲酸丙酯 94-13-3 125 154-羟基苯甲酸苯酯 17696-62-7 150 164-羟基苯甲酸异丁酯 4247-02-3 150 174-羟基苯甲酸丁酯 94-26-8 150 184-羟基苯甲酸苄酯 94-18-8 150 19苯甲酸乙酯 93-89-0 300 204-羟基苯甲酸戊酯 6521-29-5 300 21苯甲酸异丙酯 939-48-0 350 22苯甲酸丙酯 2315-68-6 350 23苯甲酸苯基酯 93-99-2 400 1.3 分析条件色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm, 4.6×250 mm; P/N: 380-01230-01） 柱温：28 ℃ 检测波长：280/254/230 nm 流速：1.0 mL/min 进样量：10 μL 流动相：A：磷酸水溶液（量取85%-90%磷酸1.2 mL，加水至1000 mL，混匀，即得）B：乙腈梯度洗脱程序如下：时间（Min）0 5 29 41 52 57 62 70 A（%）90 90 50 58 35 5 90 90 B（%）10 10 50 42 65 95 10 10 2. 实验结果按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合对照品溶液色谱图如下：序号* 目标物名称 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 甲基异噻唑啉酮 4.963 668845 73048 7362 1.202 -- 2 2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇 9.814 407282 34008 14866 1.128 17.537 3 甲基氯异噻唑啉酮 15.225 328123 32451 49547 1.177 18.169 4 4-羟基苯甲酸 15.841 6447898 761369 70645 1.075 2.406 5 苯甲醇 20.356 1353873 146977 100492 1.094 18.231 6 苯氧乙醇 23.825 2165284 250671 154232 1.064 13.892 7 苯甲酸 24.801 1040761 124096 176130 1.089 4.075 8 4-羟基苯甲酸甲酯 25.883 3337463 396367 190490 1.046 4.570 9 氯苯甘醚 26.543 147059 19154 240316 1.063 2.909 10 脱氢乙酸 27.808 589030 58501 166557 1.065 5.170 11 5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷 28.615 618728 56830 147087 1.016 2.828 12 4-羟基苯甲酸乙酯 30.465 7307006 858876 258568 1.048 6.876 13 4-羟基苯甲酸异丙酯 34.230 6839042 781536 310452 1.054 15.511 14 4-羟基苯甲酸丙酯 34.829 6868786 739751 291051 1.052 2.378 15 4-羟基苯甲酸苯酯 38.855 7452381 497102 147264 1.038 12.140 16 4-羟基苯甲酸异丁酯 40.450 7486821 411953 110057 1.041 3.574 17 4-羟基苯甲酸丁酯 41.230 7662693 386907 96503 1.031 1.531 18 4-羟基苯甲酸苄酯 42.228 6811643 308113 81763 1.038 1.780 19 苯甲酸乙酯 43.661 1102246 42031 62224 1.026 2.221 20 4-羟基苯甲酸戊酯 52.660 14028043 949593 276200 1.028 16.347 21 苯甲酸异丙酯 54.291 1097081 73069 284212 1.016 4.037 22 苯甲酸丙酯 55.090 1073198 75182 322361 1.016 2.009 23 苯甲酸苯基酯 57.578 4589092 445570 650371 1.017 7.384 *以上色谱参数是在254 nm下的数值重现性（n=3）对照品溶液重现性（254 nm）目标物保留时间（min, n=3）峰面积（Area, n=3）数据1数据2数据3RSD（%）数据1数据2数据3RSD（%）甲基异噻唑啉酮 4.966 4.963 4.961 0.05 678802 668845 669534 0.83 2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇 9.824 9.814 9.811 0.07 406203 407282 407218 0.15 甲基氯异噻唑啉酮 15.243 15.225 15.224 0.07 332771 328123 328041 0.82 4-羟基苯甲酸 15.853 15.841 15.837 0.05 6541362 6447898 6448543 0.83 苯甲醇 20.365 20.356 20.349 0.04 1373303 1353873 1353585 0.83 苯氧乙醇 23.833 23.825 23.818 0.03 2195980 2165284 2165499 0.81 苯甲酸 24.808 24.801 24.794 0.03 1055387 1040761 1040195 0.82 4-羟基苯甲酸甲酯 25.889 25.883 25.876 0.03 3385685 3337463 3337266 0.83 氯苯甘醚 26.549 26.543 26.535 0.03 148809 147059 146312 0.87 脱氢乙酸 27.815 27.808 27.801 0.03 598096 589030 589325 0.87 5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷 28.620 28.615 28.608 0.02 627616 618728 618964 0.81 4-羟基苯甲酸乙酯 30.469 30.465 30.457 0.02 7410815 7307006 7306843 0.82 4-羟基苯甲酸异丙酯 34.231 34.230 34.22 0.02 6935820 6839042 6837280 0.82 4-羟基苯甲酸丙酯 34.83 34.829 34.819 0.02 6965060 6868786 6868571 0.81 4-羟基苯甲酸苯酯 38.853 38.855 38.84 0.02 7557426 7452381 7450271 0.82 4-羟基苯甲酸异丁酯 40.447 40.450 40.432 0.02 7587133 7486821 7482000 0.79 4-羟基苯甲酸丁酯 41.225 41.230 41.210 0.03 7772228 7662693 7661657 0.83 4-羟基苯甲酸苄酯 42.22 42.228 42.204 0.03 6907062 6811643 6809087 0.82 苯甲酸乙酯 43.656 43.661 43.639 0.03 1115788 1102246 1100281 0.76 4-羟基苯甲酸戊酯 52.639 52.660 52.629 0.03 14217082 14028043 14014277 0.80 苯甲酸异丙酯 54.272 54.291 54.263 0.03 1110401 1097081 1095009 0.76 苯甲酸丙酯 55.071 55.09 55.062 0.03 1087131 1073198 1071427 0.80 苯甲酸苯基酯 57.558 57.578 57.550 0.03 4643810 4589092 4578800 0.76 3. 结论本文建立了23种防腐剂的HPLC分析方法。结果表明，参照化妆品安全技术规范（2015版，新增）中23种防腐剂（甲基异噻唑啉酮等23种组分）的色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18分析甲基氯异噻唑啉酮等23种组分，23个化合物峰形良好，各组分之间分离度大于1.5，满足日常检测需求。此方法可为化妆品中甲基氯异噻唑啉酮等23种防腐剂的HPLC分析提供参考。