化妆品中酸性橙11等14种着色剂的测定

 1. 实验部分1.1 实验仪器及耗材Shimadzu LC-2040高效液相色谱仪；色谱柱：ShimNex UP C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01231-49）；SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。 1.2 对照品溶液的制备1.2.1 单标溶液的配制：取各着色剂标准物质适量于棕色容量瓶中，碱性紫14、碱性蓝26、酸性紫9、食品橙3、酸性橙11、溶剂黄29，加甲醇定容至刻度，配成浓度分别为1.0 mg/mL的单标溶液；颜料红4、溶剂黄33、溶剂紫13、溶剂绿3、颜料红83、溶剂红3，加四氢呋喃定容至刻度，配成浓度分别为1.0 mg/mL的单标溶液；颜料红63、颜料红64，加二甲基亚砜定容至刻度，配成浓度分别为1.0 mg/mL的单标溶液。 1.2.2 混合标准溶液的配制：分别取上述各单标溶液适量，用甲醇四氢呋喃混合溶液（甲醇：四氢呋喃=3：2）稀释得混合标准系列溶液，使得碱性紫14、碱性蓝26、颜料红4、溶剂黄33、溶剂紫13、酸性紫9、食品橙3浓度为10 μg/mL，酸性橙11、溶剂黄29、溶剂绿3、颜料红63浓度为20 μg/mL，1.3 分析条件颜料红64、颜料红83、溶剂红3 浓度为50 μg/mL，混合标准系列溶液应临用现配。色谱柱：ShimNex UP C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01231-49）柱温：40℃检测波长：250 nm；400 nm；485 nm；530 nm；620 nm 流速：0.8 mL/min 进样量：5 μL 流动相：A：甲醇；B：乙腈；C：0.02 mol/L 乙酸铵溶液（pH=6.0）梯度条件：时间（min）0 7 15 17 26 37 38 53 A（%）15 35 40 15 0 0 15 15 B（%）15 25 20 45 100 100 15 15 C（%）70 40 40 40 0 0 70 70 2. 实验结果按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液色谱图如下：混合标准溶液（250nm）说明：溶剂黄29 和未知杂质没有分开，是因为混标不纯含有未知杂质导致，并非是峰形不好或与其它已知成分分离度不好。序号 目标物 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 颜料红83 14.479 2438614 229741 51915 1.152 --2 溶剂黄29 27.811 413625 62915 652970 0.742 --3 溶剂紫13 31.420 532315 78515 561767 1.062 --4 溶剂绿3 36.140 381043 34810 275861 1.009 --混合标准品溶液（400nm）序号 目标物 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 食品橙3 22.173 476376 72295 253124 1.043 --2 溶剂黄33 22.790 132512 20539 276907 1.049 --3 溶剂红3 26.998 689093 148325 735773 1.061 --混合标准溶液（485nm）序号 目标物 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 酸性橙11 5.650 610394 133747 39051 1.041 --2 颜料红63 12.046 121075 17195 67310 1.071 --3 颜料红64 16.404 275948 22719 41382 1.081 --4 颜料红4 29.187 173825 37412 867432 1.065 --混合标准溶液（530nm）序号 目标物 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 碱性紫14 8.675 554000 83427 38845 0.972 --2 酸性紫9 15.782 244348 18714 34461 1.022 --混合标准溶液（620nm）序号 目标物 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 碱性蓝26 25.570 289119 55684 551563 1.117 --重现性对照品溶液重现性目标物保留时间（min, n=3）峰面积（Area, n=3）数据1 数据2 数据3 RSD （%）数据1 数据2 数据3 RSD （%）酸性橙11 5.650 5.654 5.608 0.45 610394 612177 613110 0.23 碱性紫14 8.675 8.661 8.696 0.20 554000 556622 553431 0.31 颜料红63 12.046 12.047 11.969 0.37 121075 121658 121663 0.28 颜料红83 14.479 14.555 14.433 0.43 2438614 2391573 2387797 1.18 酸性紫9 15.782 15.718 15.921 0.66 244348 240036 245405 1.17 颜料红64 16.404 16.503 16.307 0.60 275948 271709 273420 0.78 食品橙3 22.173 22.261 22.145 0.27 476376 483759 485024 0.97 溶剂黄33 22.790 22.884 22.784 0.25 132512 132661 132425 0.09 碱性蓝26 25.570 25.659 25.612 0.17 289119 285486 284639 0.83 溶剂红3 26.998 27.050 26.990 0.12 689093 695254 694991 0.50 溶剂黄29 27.811 27.866 27.799 0.13 413625 413291 414452 0.14 颜料红4 29.187 29.252 29.178 0.14 173825 175865 173472 0.74 溶剂紫13 31.420 31.520 31.416 0.19 532315 531189 536411 0.52 溶剂绿3 36.140 36.346 36.174 0.30 381043 390538 386771 1.24 3. 结论本文建立了化妆品中酸性橙11等14种着色剂的HPLC测定方法。采用色谱柱ShimNex UP C18分析酸性橙11等14种着色剂，结果显示，14个化合物色谱峰峰形对称，相邻峰基线分离，满足要求。此方法可为化妆品中酸性橙11等14种着色剂的检测提供参考。