化妆品中9种四环素类抗生素的测定

 1. 实验部分1.1 实验仪器及耗材Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪；色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm, 4.6×250 mm; P/N: 380-01230-01）；SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）； LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）； SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）； SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）； SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。  1.2 混合对照品溶液的配制取9种四环素类抗生素对照品母液适量，加甲醇稀释制成每l L各含50 mg的混合溶液，即得。 1.3 分析条件色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm, 4.6×250 mm; P/N: 380-01230-01） 柱温：25 ℃ 检测波长：270/350 nm 流速：1.0 mL/min 进样量：10 μL 流动相：A：0.01 M草酸溶液B：甲醇-乙腈（1：3）时间（Min）0 3 6 12 12.1 22 A（%）78 63 63 40 78 78 B（%）22 37 37 60 22 22 2. 实验结果按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合对照品溶液色谱图如下：序号* 目标物名称 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 二甲胺四环素 3.960 500700 71124 6593 0.718 -- 2 土霉素 6.656 973549 123163 14190 1.085 12.879 3 四环素 7.463 1175537 207475 30667 1.099 4.097 4 去甲基金霉素 8.378 1238679 235702 49129 1.152 5.691 5 金霉素 9.287 972749 170315 47569 1.070 5.649 6 美他环素 9.727 1172642 192458 46628 1.117 2.513 7 多西环素 10.217 970761 146504 45356 1.108 2.635 8 差向脱水四环素 10.538 3257436 459547 42433 1.201 1.619 9 脱水四环素 12.385 3791923 391828 34257 1.198 7.822 *以上色谱参数是在270 nm下的数值重现性（n=3）对照品溶液重现性（270 nm）目标物保留时间（min, n=3）峰面积（Area, n=3）数据1数据2数据3RSD（%）数据1数据2数据3RSD（%）二甲胺四环素 3.960 3.962 3.960 0.03 500563 501318 500700 0.08 土霉素 6.634 6.651 6.656 0.17 977668 979684 973549 0.32 四环素 7.446 7.46 7.463 0.12 1179302 1180591 1175537 0.22 去甲基金霉素 8.363 8.377 8.378 0.10 1238205 1241108 1238679 0.13 金霉素 9.266 9.284 9.287 0.12 972935 974169 972749 0.08 美他环素 9.704 9.724 9.727 0.13 1172852 1175371 1172642 0.13 多西环素 10.189 10.213 10.217 0.15 970195 972442 970761 0.12 差向脱水四环素 10.506 10.533 10.538 0.16 3256050 3262973 3257436 0.11 脱水四环素 12.337 12.375 12.385 0.20 3795030 3796712 3791923 0.06 3. 结论本文建立了9种四环素类抗生素的HPLC分析方法。结果表明，参照化妆品国标GB/T 24800.1-2009中色谱条件并对其优化，采用色谱柱ShimNex CS C18分析9种四环素类抗生素，9个化合物的峰形良好，分离度大于1.5，满足日常检测需求。此方法可为化妆品中9种四环素类抗生素HPLC分析提供参考。