牛奶中三聚氰胺的含量测定 高效液相色谱法

一、 摘要本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定牛奶中三聚氰胺的含量。色谱条件：C18 4.6×250mm，5μm，流速为1.0mL/min，柱温为40℃，进样量为20μL，检测波长为240nm。实验结果：三聚氰胺在测定浓度范围内具有良好的线性关系（R2=0.9998）；三聚氰胺的仪器检出限为0.064μg/mL，仪器定量限为0.212μg/mL。按照标准规定称样量，满足《GB/T 22388-2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中高效液相色谱法的检出限2mg/kg的要求。二、 背景三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是一种化工原料，为白色晶体，无明显异味，禁止添加到食品中。一般牛奶中蛋白质的检测方法是通过检测牛奶里面的氮含量来推算蛋白质，由于三聚氰胺的氮含量高达66%，价格便宜，常被不法分子非法添加到牛奶或乳制品中。但是，长期摄入过量的三聚氰胺会引发膀胱炎症、上皮增生、结石等，甚至导致膀胱癌。2011年4月6日，《关于三聚氰胺在食品中的限量值的公告》：三聚氰胺不是食品原料，也不是食品添加剂，禁止人为添加到食品中。对在食品中人为添加三聚氰胺的，依法追究法律责任。婴儿配方食品中三聚氰胺的限量值为1mg/kg，其他食品中三聚氰胺的限量值为2.5mg/kg，高于上述限量的食品一律不得销售。LC-K2025-01-210603 ： GB/T 22388-2008 K2025 C184.6 x 250mm 5pm 1.0mL/min4020pL 240nm R=0.99980.064pg/mL0.212pg/mL GB/T 22388-2008 2mg/kg 66% 2011 4 6 1mg/kg 2.5mg/kg 3 3.1 GB/T6682 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 25%~28% 3.10 50mL 50mL 2 3.11 2% 20g 1L 3.12 20g/L 2 g 100mL 5mL 100mL 3.13 5% 5mL 95mL 3.14 A 2.10g 2.16g 980mL pH 3.0 1L 3.15 CAS 108-78-01 99.0% 3.16 10mg 0.1mg 10mL 3.10 1mg/mL 4 3.17 1mL 3.1610mL 100ug/mL 3.18 3.17 1pg/mL 2pg/mL 5pg/mL 20pg/mL 40pg/mL 80pg/mL 3.19 3.20 0.22um 3.21 ≥99.999% 4 4.1 K2025 P2 K2025 AS K2025 CO K2025 UVD Wookinglab 4.2 0.0001g 4.3 4.4 pH 4.5 4000r/min 4.6 4.7 4.8 4.9 10mL 50mL 4.10 10mL11000mL 5 5.1 2g 0.01g 50mL 3mL 3.12 15mL 3.11 5mL 3.3 10min 10min 25mL 4000r/min 10min 5mL 10mL 5mL 3mL 5mL 3.19 1 /s 3.19 3mL 3mL 6mL 3.13 1 /s 50 1mL 1min 0.22um HPLC 5.2 a C18 4.6× 250mm 55pm b A 3.14 =85：15 C 40 d 10pL e 1.0mL/min f 240nm 6 6.1 5.2 5pg/mL / 14.042 168.822 12.037 23488 一 0.95 1 23488 0.95 7 2 2 时间[min 1 2 7 2 7 1 2 3 4 5 6 7 RSD% 14.042 14.043 14.052 14.040 14.043 14.008 14.032 14.037 0.101 168.822 168.421 168.156 168.488 168.490 168.648 168.364 168.484 0.125 2 RSD 0.101% RSD 0.125% 6.2 3 3 (p S/N LOD LOQ g/mL) (mAU) (mAU) (ug/mL) (ug/mL) 0.867 2.535 0.062 40.9 0.064 0.212 6.3 6.3.1 3.18 HPLC 4 5R² 0.9998 方程式 v=32.84483*x+7.26180 相 关 系 数(R ) 0.99994335 确定系数(R) 0.99988670 最大方 差 9.867336 4 5 6.3.2 m---- f---- 0.4mg/kg GB/T 22388-20082mg/kg 96.3% K2025 23488 0.95 R 0.9998 RSD 0.101% RSD 0.125% 0.064pg/mL 0.212ug/mL 96.3% Wooking K2025 GB/T 22388-2008 HPLC K2025 K2025 P2 K2025 AS K2025 CO K2025 UVD Wookinglab