保健食品中蚁酸含量检测方案(气相色谱仪)

SSL-CA22-112Excellence in Science Excellence in ScienceGC-206 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn 顶空-气相色谱法测定保健食品中蚁酸含量 GC-206 摘要：本文使用岛津顶空自动进样器 HS-10结合气相色谱仪 GC-2010 Pro，建立了保健食品中蚁酸含量的检测方法。在 0.02-0.6mg范围内，蚁酸衍生物标准曲线线性良好，相关系数为0.9998。取6个标准样品，蚁酸绝对量0.02 mg，经顶空加热衍生，连续6次进样，峰面积RSD 值小于3%。加标回收率实验，加标浓度分别为0.2和0.6 mg/g， 回收率在 93%-105%之间，完全满足检测的要求。 关键词：顶空-气相色谱法 保健食品 蚁酸 黑蚂蚁为蚁科昆虫黑蚁的全虫，富含蛋白质、糖类、有机酸和矿物质，具有极高的营养价值和独特的医疗保健功能。目前市售有许多以黑蚂蚁为原料制成的保健酒、保健食品等。在这些保健食品中最引人注意的成分是蚁酸，由于蚁酸具有靶向性抗风湿因子，有祛风除湿、抗炎镇痛的作用，故蚁酸含量是该类产品的一个重要质量控制指标。 2021年3月，山西省地方标准 T/SXITS 0004-2021《保健食品中蚁酸的测定气相色谱法》发布实施。该标准的实施，为以蚂蚁为原料制成的保健食品中蚁酸含量的测定提供了检测依据。 蚁酸又称甲酸，目前检测方法主要有离子色谱法、高效液相色谱法和气相色谱法等。 本文参考该标准，采用岛津顶空自动进样器HS-10结合气相色谱仪 GC-2010 Pro，建立了保健食品中蚁酸含量的检测方法。该方法线性、重复性、检出限等均满足标准的要求，可为保健食品中蚁酸含量的测定提供参考。 实验部分 1.1仪器 气相色谱仪： GC-2010 Pro 顶空自动进样器 HS-10 1.2分析条件 1.2.1HS-10条件 恒温炉温度：85℃ 样品瓶恒温时间：30 min 样品流路温度：100℃ 传输线温度：120℃ 进样量：1mL 1.2.2 GC条件 色谱柱： SH-Rtx-wax，6(0 m×0.25 mm×0.5 um 分流比：20：1 柱温程序：50℃(4min)_20℃/min_200℃(4 min) 检测器： FID检测器 载气：氮气 检测器温度：250℃ 载气控制模式：恒线速度 氢气流量：40mL/min 线速度：21.4 cm/sec 空气流量：400 mL/min 进样口温度：210℃ 尾吹气流量： 30 mL/min 进样方式：分流进样 样品前处理 ( 准确称取0.1g样品置于顶空瓶，加入5.0mL异丙醇，加入0.3mL硫酸，85℃平衡30 min，经气相色谱仪测定。 ) 注：实际分析时，若被测组分含量较高，可用异丙醇将样品稀释后再测定，以满足检测要求。 结果与讨论 3.1结果与讨论 取含甲酸 0.2 mg标准溶液，顶空加热衍生，经气相色谱仪测定，得到该标准溶液色谱图如下。 图1 甲酸衍生物色谱图(含甲酸0.2mg) 表1化合物信息 No. 化合物名称 英文名称 CAS号 检测目标物 保留时间 (min) 1 蚁酸(甲酸) Formic acid 64-18-6 甲酸异丙酯 7.132 3.2标准曲线及检出限 取 1000 mg/L甲酸标准储备液，用异丙醇稀释，配制成200 mg/L 的甲酸标准工作液。 准确移取浓度为 200 mg/L的甲酸标准工作液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0和3.0mL(含甲酸0.02、0.04、0.1、0.2、0.4和0.6mg)，分别置于顶空瓶中，以异丙醇补至5.0mL，加入0.3mL硫酸，85℃平衡30 min， 经气相色谱仪测定。得到甲酸衍生物标准曲线见下图。以0.02mg标准溶液，3倍信噪比计算仪器检出限，标准曲线信息及检出限结果见表2。 图2标准曲线 表2标准曲线信息及仪器检出限 No. 名称 线性方程 相关系数R 检出限(ug) 1 甲酸异丙酯 Y=1042100X-2747.84 0.9998 0.2 3.3重复性测试 取6个标准样品，，甲酸绝对量 0.02 mg，经顶空加热衍生，连续6次进样测定，考察重复性。结果见表3。 表3 重复性结果((n=6) No 名称 峰面积 RSD 1 2 3 4 5 6 (%) 1 甲酸异丙酯 18901 19044 18091 18147 18154 18332 2.3 3.4回收率测试 取空白样品0.1g进行加标实验，加标浓度分别为 0.2 mg/g 和0.6 mg/g， 平行处理3份。回收率结果见表 4。 表4 回收率结果(n=3) No. 加标浓度 回收率1 回收率2 回收率3 平均回收率 (mg/g) (%) (%) (%) (%) 1 0.2 95.0 105.0 90.0 96.7 2 0.6 93.3 95.0 95.0 94.4 3.5.样品检测 对市售某品牌保健酒样品进行测定(该样品中甲酸含量较高，需稀释测定)。经测试，该样品中甲酸含量为170.4 mg/g。 该样品经稀释后测试的色谱图见3. 图3 某品牌保健酒样品色谱图 结论 本文使用岛津顶空自动进样器HS-10结合气相色谱仪GC-2010 Pro，建立了保健食品中蚁酸含量的检测方法。在0.02~0.6mg范围内，蚁酸衍生物标准曲线线性良好，相关系数为0.9998。取6个标准样品，蚁酸绝对量0.02mg，经顶空加热衍生，连续6次进样，峰面积 RSD 值小于3%。加标回收率实验，加标浓度分别为 0.2 mg/g和0.6mg/g，回收率在 93%-105%之间。本方法可为保健食品中蚁酸含量的检测提供参考。 岛津应用云 本文使用岛津顶空自动进样器HS-10结合气相色谱仪GC-2010 Pro，建立了保健食品中蚁酸含量的检测方法。在0.02~0.6 mg范围内，蚁酸衍生物标准曲线线性良好，相关系数为0.9998。取6个标准样品，蚁酸绝对量0.02 mg，经顶空加热衍生，连续6次进样，峰面积RSD值小于3%。加标回收率实验，加标浓度分别为0.2 mg/g和0.6 mg/g，回收率在93%-105%之间。本方法可为保健食品中蚁酸含量的检测提供参考。