板蓝根注射液中（R,S）-告依春、鸟苷、尿苷和腺苷检测方案(液相色谱仪)

文档编号： LC-K2025-01-210604 板蓝根注射液合格与否，一测便知! 兽用中药注射液具有安全性好、理化性质稳定、临床验证及应用治愈率高等优点，是治疗家畜疾病的兽药新制剂。 近年来， “鱼腥草注射液”、“炎毒清注射液”、“双黄连注射液”等多个品种的兽用中药注射剂因发生严重不良事件被暂停销售使用，因此，全面开展中药注射剂安全性评价，规范兽用中药注射剂的研制、生产、使用秩序，在国内兽药行业引起广泛关注。 板蓝根注射液为《中国兽药典(2020年版)》收录的中药制剂及成方制剂之一，具有清热解毒的功效，广泛用于家畜流感、仔猪白痢、肺炎及某些发热性疾疾。 实验部分： 板蓝根注射液中(R，S)-告依春、鸟苷、尿苷和腺苷的测定高效液相色谱法 【仪器与试剂】： 仪器与设备：悟空K2025高效液相色谱仪；；分析天平(精确到0.0001g)；容量瓶(100mL，带刻度)等； ★Wooking lab色谱工作站内置了《中国兽药典(2020年版)》高效液相色谱方法库，海量的分析方法可一键快速调用，无需耗费过多人力成本进行方法查阅编辑，为分析工作者的工作提供了便利。 试剂与材料：符合 GB/T6682的一级水；甲醇(色谱级)； 0.22um微孔尼龙滤膜；(R，S)-告依春(C5H7NOS)；鸟苷(C10H13N5O5)；尿苷(C9H12N2O6)；腺苷(C10H13N5O4)； 【实验方法】： 样品前处理： 精密量取本本 5mL， 置于50mL容量瓶中，加5%甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。 标准溶液配制 混合对照品溶液(2ug/mL)：分别称取(R，S)-告依春、鸟苷、尿苷和腺苷各 0.2mg，用5%甲醇定容至100mL； 【色谱条件】： a) 色谱柱： C184.6×250mm， 5um 或者相当的色谱柱； b)流动相：流动相A：甲醇；流动相B：水，梯度表如下： 时间/min A% B% 0 3 97 3 3 97 20 10 90 40 70 30 50 70 30 50.01 3 97 60 3 97 c)柱温：30℃； d)进样量：20uL； e)流速：0.5mL/min； f) 波长：245nm 结果与讨论： 1.按照上述色谱条件进行采集，对照品和供试品色谱图如下： 图1 对照品色谱图 图2供试品色谱图 将供试品连续进样7针，供试品中(R，S)-告依春、鸟苷、尿苷和腺苷四种物质的保留时间和峰面积重复性数据分析如表1，保留时间的 RSD 分别为 0.080%、0.146%、0.151%和0.033%；峰面积的RSD 分别为 0.304%、0.360%、0.554%和0.790%，重现性良好。重复性色谱图如图3. 表1.供试品进样7针重复性数据统计 目标物 指标 1 2 3 4 5 6 7 平均值 RSD% (R，S)- 保留 23.018 23.018 23.035 23.025 23.04 23.06 23.062 23.037 0.080 告依春 时间 峰面积 72.102 71.832 72.053 71.574 71.825 71.769 72.199 71.908 0.304 鸟苷 保留时间 18.030 18.030 18.068 18.043 18.072 18.088 18.093 18.061 0.146 峰面积 14.282 14.231 14.284 14.345 14.228 14.301 14.363 14.291 0.360 尿苷 保留时间 10.148 10.148 10.177 10.162 10.178 10.185 10.178 10.168 0.151 峰面积 18.123 18.409 18.321 18.431 18.321 18.380 18.328 18.330 0.554 腺苷 保留时间 28.128 28.128 28.133 28.128 28.143 28.147 28.148 28.136 0.033 峰面积 22.795 22.590 22.615 22.628 22.940 22.989 22.979 22.791 0.790 图3供试品进样7针叠加色谱图 讨论： 结果表明，使用 Wooking K2025 高效液相色谱仪对板蓝根注射液中(R，S)-告依春、鸟苷、尿苷和腺苷进行测定，对照品及供试品的保留时间 RSD 均小于 0.5%(n=7)，峰面积的 RSD 均小于1%(n=7)， 满足《中国兽药典(2020年版)》的要求，此方法可为板蓝根注射液中(R，S)-告依春、鸟苷、尿苷和腺苷的测定提供参考。 兽用中药注射液具有安全性好、理化性质稳定、临床验证及应用治愈率高等优点，是治疗家畜疾病的兽药新制剂。 近年来，“鱼腥草注射液”、“炎毒清注射液”、“双黄连注射液”等多个品种的兽用中药注射剂因发生严重不良事件被暂停销售使用，因此，全面开展中药注射剂安全性评价，规范兽用中药注射剂的研制、生产、使用秩序，在国内兽药行业引起广泛关注。 板蓝根注射液为《中国兽药典（2020年版）》收录的中药制剂及成方制剂之一，具有清热解毒的功效，广泛用于家畜流感、仔猪白痢、肺炎及某些发热性疾患。