维生素E-TPGS中分子量检测方案(生物质谱)

LAAN-A-TM054 ApplicationnNNo.B77News 用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行日：2018年3月400-650-0439 ApplicationNews MALDI-TOF质量分析法 聚乙二醇修饰药品的分析一使用台式线性 MALDI-TOF MSMALDI-8020 进行聚合物分析 聚合物是由称为单体的次级单元重复连接而成的分子，由于其物理和化学性质，在医学、药学、工学、材料科学等各个领域发挥着重要的作用。聚合物的分析可以使用 SEC/GPC 分析、NMR/FT-IR分光法等各种分析方法，其中， MALDI-TOFMS由于可以快速得到聚合物的分子量分布、多分散性以及端基结构信息，因此，广泛应用于制造业和质量管理实验室。 聚合物将有望作为载体分子应用于治疗领域，控制并运输药物制剂至靶标。键合到聚乙二醇1000 (PEG 1000)一琥珀酸上的维生素E(维生素E-TPGS，图1)被证明可提高药剂溶解性、渗透性以及稳定性。 图1维生素 E-TPGS 的结构 在这里我们介绍了一种联合台式线性MALDI-TOF 质谱仪MALDI-8020 和聚合物数据分析软件Polymerix (SierraAnalytics)的维生素 E-TPGS聚合物的完整解决方案。 Simona Salivo， Tom K. Abban， Matthew E. Openshaw， Ei-ichi Matsuo 材料及方法 维生素 E-TPGS 购自西格玛奥德里奇公司。样品溶液(2mg/mL，乙腈/水=1/1)与 MALDI基质溶液(a-氰基-4-羟基肉桂酸 (CHCA， 10 mg/mL，乙腈/水=1/1)混合后使用。使用氯化钠溶液(1mM，乙腈/水=1/1)作为阳离子化试剂对 MALDI 靶板进行预涂。将样品和基质的混合溶液(1pL)滴到上述氯化钠的预涂靶板上。MALDI-MS分析按照表1所示的参数进行。 表1MALDI-MS 质谱采集参数 Tuning linear Polarity positive Massrange 100-3000 da Laser rep. rate 200 Hz Accumulation rate (shots/profile) 50 Profiles 200 图2维生素E-TPGS 聚合物分析的工作流程 l结果 图3为维生素 E-TPGS 聚合物的钠加合离子的 MALDI-MS图谱。主要聚合物离子系列位于m/z 1，100-1，900范围内，除此之外，还可以看到另外两种微小的离子峰系列(m/z 800-1，200和1，700-2，200，图3(上))。 图3(下)显示两个信号峰间隔44 Da，与重复单元(C2H40)的理论分子量一致。由此可知，两个谱峰相当于长度仅差一个 PEG 单元的两个聚合物链。另外，上述两个单同位素谱峰均具有良好的分辨率({}中的r值)。 430.33 c一 图3维生素E-TPGS 聚合物的钠加合离子质谱图(上)和将蓝色覆盖部分局部放大的质谱图(下) 另外，图5显示了使用 Polymerix 软件分析均聚物系列(图6)的末端基团的结构式和化学式。 在维生素 E-TPGS的钠加合离子质谱图(图3)中检测的两个离子 m/z 430.33 和557.45分别与维生素E(自由基离子)以及在维生素E一琥珀酸中加合了 PEG 单元的(CHz)部分的离子所示的结构式一致(如图4a)和b)所示)。 图4a)维生素E(自由基离子)的结构式及化学式 b)键合了部分 PEG 单元的维生素E琥琥珀酸的结构式及化学式 图5计算得到的均聚物末端基团的结构式及化学式 使用提供的末端基团进行三个系列 (Series 1~3)的解析后发现，计算值与实测值之差(Excess Mass)非常小，所提供的聚合物结构与实际数据充分分致(图6). 均聚物解析中的赋值图如图7所示。匹配的3个系列(Series 1~3)在质谱图上分别用不同的颜色标注。 图6使用 Polymerix 软件进行均聚物解析时的系列定义表 图7使用 Polymerix 软件分析生成的均聚物的赋值图 *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 如有变动，恕不另行通知。 ) 利用岛津台式MALDI-TOF质谱MALDI-8020结合聚合物数据分析软件Polymerix（Sierra Analytics）可以快速分析维生素E-TPGS聚合物的分子量及端基结构信息，分辨率良好，检测分析得到的单体分子量与理论一致，计算得到的分子量与实测值差值很小。