自来水中头孢类抗生素检测方案(液相色谱仪)

自来水中的头孢类抗生素的测定 1.原理 自来水中的头孢类药物通过固相萃取柱富集，用甲醇洗脱，浓缩后经C18 柱分离。根据保留时间定性，外标法定量。 2.试剂及标准溶液配制 2.1试剂 2.1.1 乙腈(HPLC级) 2.1.2去离子水， 0.45um滤膜过滤 2.1.3乙酸钠(分析纯) 2.1.4乙酸(分析纯) 2.1.5头孢克洛标准物质：纯度均大于95% 2.1.6头孢拉定标准物质：纯度均大于90% 2.2标准溶液配制 2.2.1 头孢克洛储备液的配制：准确称取头取克洛标准品 0.025g于25mL容量瓶中，用去离子水溶溶并定容，配制成1000pg/mL储备液。 2.2.2头孢拉定储备液的配制：准确称取头孢拉定标准品 0.025g于25mL容量瓶中，用去离子水溶解并定容，配制成1000pg/mL储备液。 2.2.5头孢克洛与头孢拉定混合标准溶液的配制：分别准确移取适当体积上述二种标准储备液，配制成浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10pg/mL的二种标样的混合标准溶液。 3.仪器及工作条件 3.1仪器 3.1.1 LC5510 高效液相色谱仪(北东西分析仪器有限公司)。 3.1.2 DM-100在线脱气机(北东西分析仪器有限公司)。 东西分析 3.1.3氮吹仪 3.1.4滤膜：0.45 pm。 3.1.5分析天平：感量为 0.0001 g 3.2色谱条件 色谱普： C18柱，5pm ×250 mmx4.6mm。 流动相：乙腈+10mmol/L醋酸钠水溶液=5+95 流速：1.0mL/min。 检测波长：254nm。 柱温：室温。 进样量：20 pL. 4.分析步骤及分析结果 4.1试样处理 取200mL水样，经0.45pm 滤膜过滤。HLB 固相萃取柱依次用5mL甲醇、5mL去离子水活化。将样品以1滴/秒的速度通过固相萃取柱，待全部通过后再用5mL 去离子水进行淋洗，抽干。最后用 5mL甲醇洗脱。将洗脱液在40℃下用氮吹仪吹至近干，用1mL流动相溶解，待测。 4.2测定 4.2.1 标准曲线的绘制 将标准系列工作液依次按上述色谱条件上机测定记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 度g/mi 图1 头孢克洛标准曲线 图2头孢拉定标准曲线 浓度(ug/mL) 0.5 1.0 2.0 5.0 10 线性方程 Y=5533.29X+0.00 相关系数 0.99993 4.2.2样品的测定 将样品溶液按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积，计算含量。 EWAI 图1头孢克洛头孢拉定混合标样(5ug/mL)谱图 图22自来水加标谱图 -- -- 取200mL水样，经0.45μm滤膜过滤。HLB固相萃取柱依次用5mL甲醇、5mL去离子水活化。将样品以1滴/秒的速度通过固相萃取柱，待全部通过后再用5mL去离子水进行淋洗，抽干。最后用5mL甲醇洗脱。将洗脱液在40℃下用氮吹仪吹至近干，用1mL流动相溶解，待测。