自来水中氯霉素检测方案(液相色谱仪)

自来水中的氯霉素的测定 1.原理 自来水中的氯霉素通过固相萃取柱富集，用甲醇洗脱，浓缩后经C18 柱分离。根据保留时间定性，外标法定量。 2.试剂及标准溶液配制 2.1试剂 2.1.1 乙腈(HPLC级) 2.1.2去离子水，0.45um滤膜过滤 2.1.3 氯霉素标准物质：纯度均大于95% 2.2标准溶液配制 2.2.1 氯霉素储备液的配制：准确称取氯霉素标准品 0.025g于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成1000pg/mL储备液。 2.2.2氯霉素标准溶液的配制：准确移取100pg/mL氯霉素标液0.05、0.25、0.5、 2.5、5.0mL于50mL容量瓶中，甲醇定容摇匀配制成浓度分别为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0pg/mL的标准溶液。 3. 仪器及工作条件 3.1仪器 3.1.1 LC5510 高效液相色谱仪(北东西分析仪器有限公司)。 3.1.2 DM-100在线脱气机(北东西分析仪器有限公司)。 3.1.3氮吹仪 3.1.4滤膜：0.45 pm. 3.1.5分析天平：感量为0.0001 g 3.2色谱条件 色谱普： C18柱，5pm×250 mmx4.6mm。 东西分析 流动相：乙乙+水=35+65 流速：1.0mL/min。 检测波长：280nm。 柱温：35℃. 进量：20pL。 4.分析步骤及分析结果 4.1试样处理 取200mL水样， 经0.45um滤膜过滤。HLB固相萃取柱依次用5mL甲醇、5mL去离子水活化。将样品以1滴/S的速度通过固相萃取柱，待全部通过后再用5mL去离子水进行淋洗，抽干。最后用5mL甲醇洗脱。将洗脱液在40℃下用氮吹仪吹至近干，用1mL甲醇溶解，待测。 4.2测定 4.2.1标准曲线的绘制 将标准系列工作液依次按上述色谱条件牛机测定，记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 [峰面积(pV*S)] 图1 氯霉素标准曲线 浓度(ug/mL) 0.1 0.5 1.0 5.0 10.0 线性方程 Y=8354.18X+137.93 相关系数 0.99999 4.2.2样品的测定 将样品溶液按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积，计算含量。 图1氯霉素(1.0ug/mL)标样谱图 图2加标2.5pg/L自来水谱图 -- -- 氯霉素属于广谱类抗生素药物，能抑制尤其是革兰氏阴性菌细菌蛋白质的合成，对各种立克氏体、原虫及部分病毒也有一定的抑制作用。目前氯霉素类药物在水产及畜禽养殖中仍应用广泛。添加氯霉素的水产养殖水和抗生素制药厂偷排的废水是环境中氯霉素的来源。因此氯霉素的环境污染，尤其是水域中的污染是值得重视的问题。本文利用高效液相色谱法测定自来水中的氯霉素含量。