食品中脂肪检测方案(食用油品分析)

简 讯055/2010萃取仪 E-816 SOX 应用文章 055/2010 萃取仪 E-816 SOX 用萃取仪 E-816 SOX 直接萃取食品中的脂肪 用萃取仪 E-816 SOX 直接萃取食品中的脂肪 测定食品和饲料样品中的脂肪是质量保证和标签的常规程序。下文介绍了测定多种样品中的总脂肪的快速简单的方法。样品无需水解，而是直接用萃取仪 E-816SOX 直接进行索氏萃取。萃取后烘至恒重，用重量法测定总脂肪含量。脂肪含量符合参考物质的认证值和文献值。 介绍 总脂肪测定是食品和饲料工厂中非常重要的分析之一。在许多样品中，脂肪与基质之间的结合不强烈，因此就没有必要进行萃取之前的水解过程。本文介绍了当测定许多样品中的总脂肪含量时，无需水解即可测定。 实验 仪器：均质仪B-400， 萃取仪E-816 SOX， 烘箱 样品：煮香肠，巧克力(都是认证参考物质)，蛋黄酱和土豆片(均购自当地超市) 图1：煮香肠(1)，巧克力(2)，蛋黄酱(3)，土豆片(4) 将均质后的样品称量入纸滤筒中，并与硫酸钠混合。将含有样品的纸滤筒放入烘箱中，102℃下烘干60min。根据表1的参数用萃取仪 E-816 SOX进行索氏萃取。为减少溶剂消耗，在萃取腔中放入一根扩展棒，同时将含有样品的纸滤筒放入萃取腔中(见图2)。样品萃取3次，萃取物在102℃烘箱中烘至恒重，最后计算总脂肪含量。 表1：索氏萃取参数(E-816 SOX) 溶剂 石油醚 萃取 120min(加热100%) 淋洗 5min(加热100%) 干燥 20min(加热 100%) 溶剂体积 100mL 图：2： 100mL 石油醚： (1)带扩展棒的溶剂液位；(2)不带扩展棒的溶剂液位 结果 表2中是测定的脂肪含量。结果符合认证物质的值以及从当地购买的样品的标签值。测量结果具有低标准偏差。 表2：食品样品中的测量脂肪值，脂肪 g/100g(括号内是本次测量的相对标准偏差)， n=3 样品 认证值和标签值 实验结果 煮香肠 23.93 +/-0.09 23.88 (0.22%) 巧克力 31.64 +/-0.50 31.82(0.21%) 蛋黄酱 81.3 80.79 (0.32%) 土豆片 21.0 20.59(0.35%) 结论 对于脂肪与基体结合不强的样品，无需水解进行萃取测定总脂肪含量的方法快速且能有重复性好的结果。这些结果符合认证参考物质值，相对标准偏差以及文献值和当地购买的样品的标签值。 ( 参考文章 ) 萃取仪 E-816 SOX操作手册更多详情，请参考应用文章055/2010 1 前言 本文介绍了对于脂肪和基体结合不强的样品，简单快速测定总脂肪的方法。样品无需水解，而是直接用萃取仪E-816SOX直接进行索氏萃取。萃取后烘至恒重，用重量法测定总脂肪含量。 2仪器 萃取仪E-816SOX 均质仪B-400 分析天平(±0.1mg) 烘箱/真空烘箱 扩展棒(Buchi货号：051957) BUCHI 3化学试剂和材料 石油醚40-60℃， 分析纯， Scharlau， EGT (ET 0093) - 无水硫酸钠，纯度≥99.0%， Fluka， 71962 沸石，默克， 1.07913.0100 纸滤筒，25x100， Macherey-Nagel， MN 645 4样品 煮香肠：认证物质， LVU 2007 (www.lvus.de)，脂肪含量23.93+/-0.09 g/100g 巧克力：认证物质， LVU 13-08 (www.lvus.de)，脂肪含量31.64+/-0.50 g/100g 蛋黄酱：购自当地超市，脂肪含量：81.3 g/100g(文献值：78-86.6%[1].) 土豆片：购自当地超市，脂肪含量：21 g/100g 5 过程 测定脂肪包括以下步骤： -均质样品 -称量和烘干样品 -索氏萃取样品 烘干和称量萃取物 -计算脂肪含量 5.1 均质样品 -煮香肠：用均质仪B-400均质煮香肠2s 巧克力：在烘箱中融化巧克力，在45℃下保持60min， 用小勺搅拌 1min 蛋黄酱：用小勺在烧杯内搅匀蛋黄酱 土豆片：在袋子里将土豆片弄成小片 5.2称量和烘干样品 将纸滤筒放入纸滤筒套中 称入15g硫酸钠到纸滤筒中 将均质后的样品称量入纸滤筒中，根据大概的脂肪含量决定样品质量1，注意样品准确的质量，用小勺混匀。用一小块纸巾清洁小勺，最后将其也放入纸滤筒中。 在烘箱中102℃下烘干样品69min 在干燥器中冷却样品至室温 5.33索氏萃取样品 准备烧杯 -索氏萃取必须一直使用干燥和干净的烧杯 -在每个烧杯中放入2-3粒沸石，在102℃烘箱内烘30min BUCHI 在干燥器内冷却至室温至少1h -萃取前记录质量 索氏萃取 在萃取腔中两足点到溶剂出口的位置上放入扩展棒 将含有样品的纸滤筒放入萃取腔中，调节液位感应器。由于不能看见纸滤筒中的样品高度，因此大约估计液位感应器的位置，大约在扩展棒顶部下1-2cm处的位置比较好(见图1) -关闭防护门，降低萃取架，通过冷凝管小心加入溶剂。 图1：带纸滤筒和扩展棒的萃取腔，液位感应器位置 -根据表1中的参数萃取样品，萃取3次样品。 根据大概的脂肪含量决定样品质量 80-100%：0.7-1g 20-50%：1.5-3.5g <10%：7-10g10-20%：3.5-7g 50-80%：：11-1.5g “索氏萃取型号的烧杯比热萃取型号的烧杯要小，1h冷却时间足够；热萃取的烧杯至少冷却2h 表1：索氏萃取参数 参数 值 溶剂 石油醚 萃取 120min(加热100%) 20个循环 淋洗 5min(加热100%) 干燥 20min 溶剂体积 100mL 5.4烘干和称量萃取物 -在102℃的烘箱内烘干含有萃取物的烧杯至恒重 在干燥器内冷却烧杯至室温至少1h，记录烧杯质量。必须要保证烧杯在干燥器内的冷却时间在萃取前后是同等的。温度差异会影响最终结果。 5.5计算脂肪含量 用公式(1)计算脂肪百分比。 %Fat样品中的脂肪百分比mtotal烧杯质量+萃取物(g)mbeaker烧杯质量(g)msample样品质量(g) 6结果 表2-5中是不同样品中的脂肪含量结果 表2：煮香肠中的脂肪含量结果，指定脂肪含量：23.93±0.09g/100g msample mbeaker mtotal %脂肪 样品1 3.8305 98.7026 99.6164 23.86 样品2 4.0796 99.3331 100.3059 23.85 样品3 4.0328 101.0426 102.0081 23.94 平均值 23.88 sd 0.05 rsd[%] 0.22 表3：巧克力中的脂肪含量结果，指定脂肪含量：31.64±0.50g/100g msample mbeaker mtotal %脂肪 样品1 1.9944 98.2235 98.8567 31.75 样品2 2.1119 97.9708 98.6431 31.83 样品3 1.9562 100.9726 101.5163 31.88 平均值 31.82 sd 0.07 rsd[%] 0.21 表4：蛋黄酱中的脂肪含量结果，预期脂肪含量：81.3% msample mbeaker mtotal %脂肪 样品1 1.0777 97.0795 97.9487 80.65 样品2 1.0504 100.1662 101.0131 80.63 样品3 1.0876 98.1723 99.0542 81.09 平均值 80.79 sd 0.26 rsd[%] 0.32 表5：土豆片中的脂肪含量结果，预期脂肪含量：21% msample mbeaker mtotal %脂肪 样品1 2.2486 98.7134 99.1766 20.60 样品2 2.1777 99.2890 99.7358 20.52 样品3 2.3898 102.4970 102.9908 20.68 平均值 20.59 sd 0.07 rsd[%] 0.35 7 故障诊断 7.1 与石英砂一起干燥 石英砂在脂肪测定中是常用的干燥剂。有些样品与石英砂混合后同样要在102℃下干燥60min。这样得到的结果与跟硫酸钠混合的样品得到的结果总是偏低。例如，肉类样品的脂肪萃取结果是23.81% (rsd=0.23%)，超出了参考物质的范围(23.93±0.09%)。 因此不推荐用石英砂代替硫酸钠作为干燥剂。 7.2 直接索氏萃取大豆和玉米 通常来说萃取(不水解)像大豆和玉米这样的样品是比较理想的。然而上述提及的 样品不经过水解直接萃取的话，获得的结果非常低，这样就不可能不经过水解就得到正确的结果。 7.2.1大豆 大豆的脂肪含量(文献值)：16.3-21.3%[1]。从本地超市购买的大豆样品的脂肪含量用索氏萃取方法测定，根据表1中标准参数，没有达到预期的脂肪含量值。大豆的索氏萃取的结果为：：14.49%(rsd=4.59%). 为了验证该大豆的脂肪含量，在萃取前进行水解。根据步琦的测定饲料样品的应用文章[2]进行实验过程。大豆样品的脂肪含量为22.14% (rsd=0.18%). 因此对于大豆样品不推荐不进行水解就直接萃取测定。 7.2.2玉米 玉米的脂肪含量(文献值)为1.56-3.90%[1]。从本地超市购买的玉米样品的脂肪含量用索氏萃取方法测定，根据表1中标准参数，没有达到预期的脂肪含量值。玉米的索氏萃取的结果为：0.72% (rsd=0.64%)。 为了验证该玉米的脂肪含量，在萃取前进行水解。根据步琦的测定饲料样品的应用文章[2]进行实验过程。大豆样品的脂肪含量为1.09% (rsd=5.21%)。即使在萃取前进行水解，也没有验证文献值。这可能是由于样品没有进行充分研磨所致[3]。 在萃取没有水解的玉米样品时，在样品内发生了沸腾延迟现象，部分样品漂浮起来。因此对于玉米样品不推荐不进行水解就直接萃取测定。 8 结论 在用索氏萃取仪E-816SOX索氏萃取前不经过水解测定总脂肪可以提供重复性贞的结果，并且符合参考物质的认证值和样品的标签值。 ( 9 参考文章 ) ( [1] Souci Fachmann Kraut，CRC Press，6 t h edition， ISBN： 3-88763-076-9 ) [2] Buchi Application Note： AN E-416-E-816 SOX-003 Feed ( [3] Kuthria， D. L.； Noel， K.； Vinjamoori， D. “ Impact of Sample Preparation on t h e ) ( Determination o f Crude Fat Content in Corn”JAOCS，Vol . 81， no . 11 (2004) ) [4]萃取仪E-816 SOX 操作手册 [5] 均质仪 B-400 操作手册 Quality in your hands Quality in your handswww.buchi.com Application Note ersion A， Copyright C Buchi Labortechnik AG/