五味子和南五味子中指纹图谱鉴别检测方案(薄层色谱仪)

高效薄层色谱应用报告 C.13 五味子和南五味子的薄层色谱指纹图谱鉴别 五味子 南五味子 摘要： 五味子和南五味子用普通硅胶预制薄层板点样，普通缸和自动展开仪(ADC2)自动展开，获得较为一致的薄层色谱图。从薄层色谱指纹图谱分析，五味子和南五味子所含主要成分的比例存在显著性差异，可以明确对两者进行品种鉴定。 仪器与试药： CAMAG ATS 4 全自动薄层色谱点样仪、双槽展开缸、CAMAG ADC2全自动展开仪、CAMAG DigiStore 2薄层色谱成像设备。 供试液制备： 取本品粉末1g，加二氯甲烷20 mL， 加热回流30 min， 滤过，滤液蒸干，残渣用二氯甲烷做成1mL的溶液，过微孔滤膜(0.45 um)，取续滤液作为供试液。 标准溶液制备： 取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品，加二氯甲烷制成每1mL各含1mg的溶液。。 色谱条件 薄层板： 硅胶 GF254预制薄层板(TLC-UV254-MN) ，20 x 10cm， 用异丙醇预洗，室温下挥干，在110℃活化 30 min 高效薄层色谱应用报告 点样： ATS 4条带状点样，条带：8mm， 间距： 13mm，边距：8mm，底边距：8mm，点样速度：80nL/S。分别点样3 uL。 展开剂： 石油醚(30~60℃))--甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上层溶液 展开： 1)点样后立即用ADC 2 展开7.5cm(展开缸预平衡15 min， 自动控制32%的湿度10 min) 2)点样后立即用展开缸展开 7.5 cm (预平衡15 min)。检视： 置紫外光灯(254nm)下检视(Fig1~2)。 结果： Fig 1 五味子薄层色谱鉴别 (ADC2展开) Fig 2 五味子薄层色谱鉴别(双槽层析缸展开) 点样顺序：S五味子子甲+五味子甲素+五味子乙素(自下至上)；1~2五味子对照药材；3~6五味子；7~8南五味子 ( C AMAG 应用 报 告 C.1 3 中文版- 更多 应用报告请向卡 玛 公司索取 info@ca m ag-china . com ) 讨论： 1)采用ADC2展开与普通缸展开，得到基本一致的色谱图，但用ADC2 基本不受外界环境的湿度的影响，重现性好； 2)《中国药典》2005年版(一部)收载的五味子属药材有五味子和南五味子，两者在功能主治和用法用量上基本一致，但从所含成分的比例上，它们却有很大的差异，主要体现在木脂素类成分比例上，以五味子醇甲和五味子乙素为代表的成分，北五味子含量高而南五味子含量极低或几乎不含；五味子子甲和五味子甲素成分，北五味子含量极低或不含而南五味子则含量较高，两者所含主要成分的比例具有显著性差异，可以明确对两者进行品种鉴定 (Fig1~2)。 注意事项： 1)展开剂放置冰箱10℃下分层，取上层溶液作为展开剂，可以避免产生展开剂脱混造成的水印(第二前沿)； 2)在此色谱条件下，用普通薄层板比高效薄层板的分离度更好。 方法起草： 审谢培山、颜玉贞 试 撰编 刘和平、卢平华 刘和平 田润涛 AMAG 应用报告 C.文版-更多应用报告请向卡玛公司索取 info@camag-china.com