黄柏中小檗碱检测方案

CAMMAG 黄柏中小檗碱的含量测定 川黄柏树 川黄柏 原 理 黄柏 (Cortex Phellodendri) 收载于《中国药典》1995年版一部274页，为芸香科植物黄檗或黄树皮的干燥树皮，主含小檗碱，并含巴马丁、药根碱、黄柏碱等。本实验是以薄层扫描法测定小檗碱含量。 样品、试剂及仪器 样品： 黄柏药材中国药品生物制品检定所提供对照品： 盐酸小檗碱 (Berberine hydrochloride) 中国药品生物制品检定所提供 试剂： 苯，乙酸乙酯，甲醇，异丙醇，盐酸， 氨水等(均为分析纯))；硅胶预制板(60F254) (Merck) 仪器： CAMAG 全自动点样仪 (Automatic TLC Sampler II) CAMAG 双槽展开箱 (Twin Trough Chamber) CAMAG 薄层扫描仪 (SCANNER3)+Cats软件V4.04CAMAG 薄层色谱摄像仪 (REPROSTAR II) 供试品溶液的制备 取本品粉末约 0.2g， 精密称定，置100ml量瓶中，加入盐酸-甲醇(1：100)约95ml， 60℃水浴中加热15分钟，取出，60℃超声处理30分钟，室温放置过夜，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取10ml，水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至2ml，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每 1ml含 0.04mg的溶液，作为对照品溶液。 色谱条件 薄层板： 硅胶60F254预制板 (Merck) 点样： CAMAG 全自动点样仪 (Automatic TLC Sampler III)点状点样点样顺序： S S2aaaaaaSi S2bbbbbb 展开： 以苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(12：6：3：3：0.5)为展开剂，另槽加入等体积的氨水，预平衡15分钟后，上行展开 8cm 测定 光源： 汞灯 扫描用计算机软件： CAMAG Cats 4.04 扫描方式：反射法荧光扫描，激发波长：A=366nm扫描速度：20mm/秒扫描时间：3分钟(16个扫描道)积分时间：1分钟(计算机自动积分) 计 算： 直线回归，外标法两点校正 测定结果 黄柏中小檗碱的含量测定 日期：1997年3月21日，文件随机编号(ID)：7CD03150A091624 1 样品取样量(g) 样品点样量(ul) 测定值(ng) RSD(%) n 含量(%) 0.1942 1 57.423 1.3 6 0.59 02156 1 65578 15 6 061 讨论 1. 展开时的温度宜控制在20~30℃范围内，温度太高或太低均使整个色谱的Rf值偏高。 2. 相对湿度控制在47%以下为好。 3. 氨水应保证质量，否则因氨蒸气不够而降低分离度。 4. 实验过程中用 CAMAG 全自动点样仪 (Automatic TLC Sampler II) 配合CAMAG 薄层扫描仪 (SCANNER3)进行定量测定，减少了人为的误差，并使工作效率大为提高，符合 GLP的要求。 广州市药物检测研究所 试验责任人：谢培山 试验者：钱浩泉 第页共页