人参、红参、西洋参中指纹图谱鉴别检测方案(薄层色谱仪)

高效薄层色谱应用报告 C.11 人参、红参、西洋参高效薄层色谱指纹图谱鉴别 摘要： 人参、红参和西洋参采用高效硅胶预制薄层板点样，采用普通缸和自动展开仪 (ADC2)自动展开，获得较为一致的薄层色谱图。从薄层色谱指纹图谱分析，人参、红参、西洋参的皂苷类成分色谱指纹图谱在整体相似的基础上，又存在着成分种类和含量的显著差异，可以通过其指纹图谱明确对三者进行品种鉴别。 仪器： CAMAG ATS 4 全自动薄层色谱点样仪、20x10 cm 双槽展开缸、CAMAG ADC2全自动展开仪、CAMAG DigiStore 2 薄层色谱成像设备。 供试液制备： 取本品粉末1g，加甲醇40mL， 加热回流1h，滤过，滤液蒸至近干，残渣用10 mL 90%甲醇溶解，加至中性氧化铝柱(100~120目，10g，内径20mm)上，用50%甲醇100mL洗脱， 收集洗脱液，蒸干，残渣加水10 mL使溶解，过C18小柱，用30%甲醇、甲醇各15mL洗脱，收集甲醇洗脱液，蒸干，残渣用甲醇做成1mL的溶液，过微孔滤膜(0.45um)，取续滤液作为供试液。 ( CAMAG 应用 报 告 C. 1 1 中文版 - 更多应用报告请向卡玛公司索取 info@ ca mag-ch in a.com ) 标准溶液制备： 取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、伪人参皂苷 Rf 及拟人参皂苷F11， 加甲醇制成每1mL各含 1 mg 的混合溶液。 色谱条件 薄层板： 硅胶高效预制薄层板 (HPTLC-Merck)，20 x 10cm，用异丙醇预洗，室温下挥干，在110℃活化30 min 点样： ATS4条带状点样，条带：8mm， 间距：13mm， 边距：8mm，底边距：8mm，点样速度：80 nL/S。分别点样1uL。 展开剂： 三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15：40：22：10，10℃以下放置冰箱分层的下层溶液) 展开： 点样后立即用 ADC 2展开7.5cm(展开缸预平衡15 min， 自动控制32%的湿度10 min)， 或点样后立即用展开缸展开7.5 cm(预平衡15 min)。 检视： 喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点点色清晰(2min)， 置紫外光灯(366nm) 下检视(Fig 1~2)。 结果： 1 2 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Fig 1 人参、红参、西洋参薄层色谱鉴别(ADC2展开) 点样顺序：1人参皂苷Rbi； 2人参皂苷Re；3 人参皂苷Rg1； 4伪人参皂苷Rf； 5拟人参皂苷F11；6~8人参；9~10红参； 11~12西洋参 T：20℃，RH：28% 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Fig 2 人参、红参、西洋参薄层色谱鉴别(双槽层析缸展开) 点样顺序：1人参皂苷Rbi； 2人参皂苷Re； 3人参皂苷Rg1； 4伪人参皂苷Rf； 5拟人参皂苷F11；6~8人参；9~10红参； 11~12西洋参 讨论： 1)采用 ADC 2 展开与普通缸展开，得到基本一致的色谱图，但用ADC2展开的色谱图分离度较好，能将人参皂苷Rgi 和伪人参皂苷 Rf 分开，而在此色谱条件下，用普通缸展开很难分开，且 ADC 2 展开基本不受外界环境的湿度的影响，重现性好； 2)《中国药典》2005年版(一部)将人参、红参、西洋参分开收载，三者在功能主治方面不尽相同，但从所含皂苷类成分的比例上，它们都含有人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷 Rg1等成分，人参、红参含有伪人参皂苷Rf，而西洋参不含，同样，西洋参含有拟人参皂苷F11， 而人参、红参不含。在总皂苷的量上，西洋参比人参、红参高很多，而红参的皂苷元在量上也明显比人参多，所以人参、红参、西洋参的指纹图谱在整体一致的基础上，又存在一定的差异，可以通过其指纹图谱明确对三者进行品种鉴定 (Fig 1~2)。 3)控制环境温度在20℃以下，分离度好。 方法起草： 审核谢培山、颜玉贞试验刘和平起草刘和平编辑 田润涛 ( CAMAG 应用 报 告 C. 1 1 中文版 - 更多应用报告请向卡玛公司索取 info@ c amag-ch in a.com ) AMAG 应用报告 C.中文版-更多应用报告请向卡玛公司索取 info@camag-china.com