银杏叶中银杏内酯检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 银杏叶-萜类内酯分析 银杏叶的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L. 的干燥叶。秋季叶尚绿时采收，及时干燥。 【功能与主治】活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂。用于瘀血阻络，胸痹心痛，中风偏瘫，肺虚咳喘，高脂血症。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇一四氢呋喃-水(25：10：65)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：取银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品、白果内酯对照品适量，精密称定，加50%甲醇分别制成每1mL各含银杏内酯A0.18 mg、银杏内酯B0.08 mg、银杏内酯C0.10 mg、白果内酯0.20mg 的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品中粉约1.5g， 精密称密，置索氏提取器中，加石油醚(30~60℃)在70℃水浴上回流提取1小时，弃去石油醚(30~60℃)液，药渣和滤纸筒挥尽石油醚，置于60℃烘箱中烘干，再加甲醇回流提取6小时，提取液蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL量瓶中，超声处理(功率300W， 频率50kHz)30分钟， 取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液5 mL，加入酸性氧化铝柱(200~300目， 3 g， 内径为1cm， 用甲醇湿法装柱)上，用甲醇25 mL洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至于，残渣用甲醇5 mL分次转移至10mL量瓶中，加水约4.5 mL， 超声处理(功率300 W，频率50kHz)30分钟， 取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液10 uL、20pL，供试品溶液10~20uL，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯的含量，即得。 本品按干燥品计算，含萜类内酯以银杏内酯A(C2H，40，)，银杏内酯B(C2(Hz40)， 银杏内酯c(C2H240)和白果内酯(C，HgO；)的总量计，不得少于0.25%。 银杏叶-萜类内酯 样品来源：本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L. 的干燥叶。秋季叶尚绿时采收，及时干燥。产地：北京。 对照品：银杏内酯A(上海同田生物技术有限公司，批号：08051011，含量：99%)银杏内酯B(上海同田生物技术有限公司，批号：08082911，含量：99%)银杏内酯C(上海同田生物技术有限公司，批号：08102106，含量：99%)白果内酯(上海同田生物技术有限公司，批号：08082711，含量：99%) 对照品溶液的制备：取银杏内酯A对照品、银杏内杏B对照品、银杏内酯C 对照品、白果内酯对照品适量，精密称定，加50%甲醇分别制成每1 mL 各含200ug的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品中粉1.4979g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(30~60℃)在70℃水浴上回流提取1小时，弃去石油醚(30~60℃)液，药渣和滤纸筒挥尽石油醚，置于60℃烘箱中烘干，再加甲醇回流提取6小时，提取液蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL量瓶中，超声处理(功率300W，频率50kHz)30分钟，取出，放冷，加甲醇至至 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163 度，摇匀，静置，精密量取上清液5 mL， 加入酸性氧化铝柱(200~300目，3g， 内径为1cm，用甲醇湿法装柱)上，用年醇25mL洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至于，残渣用甲醇5 mL分次转移至10 mL量瓶中，加水约4.5 mL，超声处理(功率300W， 频率50 kHz)30分钟，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 色谱柱： Shim-pack XR-ODS Ⅱ(3.0 mm ×75mm，2.2 um) 仪器配置： 流动相：甲醇-四氢呋喃水(12：10：78) UFLC-20ADXR高压泵 柱温：38℃流速：0.9mL/min进样量：4pL检测器条件：漂移管温度：40℃；氮气压力：350KPa；增益：8；采集频率：5Hz ELSD-LTII蒸发光散射检测器 CTO-20AC 柱温箱 CBM-20A系统控制器 SIL-20AC HT 自动进样器 对照品 实际样品 (I)银杏叶中的银杏内酯C (2)银杏叶中的白果内酯(3) 银杏叶中的银杏内酯A (4)银杏叶中的银杏内酯B (2) (3) (4)* 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 银杏内酯C 2.431 78349 18426 7649 1.28 白果内酯 2.835 107953 24358 9145 1.19 银杏内酯A 3.590 84800 17446 12243 1.18 银杏内酯B 4.952 67637 11178 14865 1.15 银杏内酯C标准曲线 重复性数据如下：银杏内酯C No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 2.431 78349 2.420 13932 2 2.426 76342 2.425 13270 3 2.433 79405 2.416 13798 Average 2.430 78032 2.420 13667 RSD% 0.15 1.99 0.19 2.56 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163白果内酯标准曲线 白果内酯 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 2.835 107953 2.820 34976 2 2.830 111283 2.826 34615 3 2.834 111313 2.819 34004 Average 2.833 110183 2.822 34532 RSD% 0.09 1.75 0.13 1.42 银杏内酯A标准曲线 银杏内酯A No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 3.590 84800 3.571 16073 2 3.589 84521 3.579 16522 3 3.590 84378 3.571 16171 Average 3.590 84566 3.574 16255 RSD% 0.02 0.25 0.13 1.45 银杏内酯B标准曲线 银杏内酯B No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 4.952 67637 4.925 9090 2 4.958 68502 4.940 9177 3 4.957 68003 4.921 9505 Average 4.956 68047 4.929 9257 RSD% 0.06 0.64 0.20 2.36 色谱柱： Shim-pack XR-ODS II (3.0 mm x 75mm, 2.2um)流动相：甲醇-四氢呋喃-水(12:10:78)柱温：38°C流速：0.9 mL/min进样量：4ul检测器条件：漂移管温度：40°C; 氮气压力：350 KPa;增益：8 ;采集频率：5Hz