决明子中大黄酚和橙黄决明素检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 决明子分析 决明子的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为豆科植物决明Cassia obtuse folia L. 或小决明Cassia tora L. 的干燥成熟种子。秋季采收成熟果实，晒干，打下种子，除去杂质。 【功能与主治】清热明目，润肠通便。用于目赤涩痛，羞明多泪，头痛眩晕，目暗不明，大便秘结。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为284 nm；理论板数按橙黄决明素峰计算应不低于3000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相 B(%) 0~15 40 60 15~30 40→90 60→10 30~40 90 10 对照品溶液的制备：取大黄酚对照品、橙黄决明素对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯(2：1)混合溶液制成每1 mL含大黄酚30 ug、橙黄决明素20pg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL， 蒸干，加稀盐酸溶液30 mL， 置水浴中加热水解1小时，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取4次， 每次30 mL， 合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2：1)混合溶液使溶解，转移至25 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含大黄酚(CHO)不得少于0.20%，含橙黄决明素(CH0，)不得少于0.080%。 决明子 样品来源：本品为豆科植物决明Cassia obtuse folia L. 或小决明Cassia tora L. 的干燥成熟种子。秋季采收成熟果实，晒干，打下种子，除去杂质。产地：安徽。 对照品：大黄酚(中国药品生物制品检定所，批号：110796-200513，含量：98%)橙黄决明素(成都曼曼特生物科技有限公司，批号：A0417，含量：98%)。 对照品溶液的制备：取大黄酚对照品、橙黄决明决对照品照量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯(2：1)混合溶液制成每1mL含大黄酚30 ug、橙黄决明素20pg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)0.5381g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，蒸干，加稀盐酸溶液30mL， 置水浴中加热水解1小时，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取4次， 每次30 mL， 合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣用无水乙 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163 醇-乙酸乙酯(2：1)混合溶液使溶解，转移至25mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 色谱柱： Shim-pack XR-ODS Ⅱ(3.0×75 mm， 2.2 p.m) 仪器配置： 流动相：以乙腈为流动相A， 以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱； 柱 温：30℃ 检测波长：284 nm 采集频率： 40Hz UFLC-20ADXR 高压泵SPD-M20A二极管阵列紫外可见光半微量检测器CTO-20AC柱温箱CBM-20A系统控制器SIL-20AC自动进样器 流 速：1.2 mL/min 进样量： 4uL 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相 B(%) 0~0.2 40 60 0.2~5.5 40→90 60→10 5.5~7.0 90 10 7.0~7.5 90→40 10→60 mAu 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 橙黄决明素 1.670 323731 116593 8776 1.20 大黄酚 4.181 115755 48748 74889 1.08 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163 橙黄决明素标准曲线 重复性数据如下： 橙黄决明素 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 1.666 323497 1.654 98956 2 1.670 323731 1.650 98729 3 1.667 322100 1.649 98756 Average 1.668 323109 1.651 98814 RSD% 0.12 0.27 0.16 0.13 大黄酚标准曲线 大黄酚 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 4.180 115537 4.181 246849 2 4.181 1157 55 4.181 248054 3 4.181 115392 4.180 247804 Average 4.181 115561 4.181 247569 RSD% 0.01 0.16 0.01 0.26 色谱柱：Shim-pack XR-ODS II (3.0 x 75 mm, 2.2um)流动相：以乙腈为流动相A , 以0.1%磷酸溶液为流动相B ,按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温：30℃检测波长：284 nm采集频率：40 Hz流速：1.2 mL/min进样量：4ul